胸腺五肽纳米粒的制备及其处方优化(3)

表2

星点设计表及其结果

ResultsofCentralcompositedesign

X2300．00300．00750．00750．00300．00300．00750．00750．00525．00525．00146．60525．00525．00525．00525．00525．00525．00525．00525．00525．00

X320．0020．0020．0020．0045．0045．0045．0045．0032．5032．5032．5011．4853．5232．5032．5032．5032．5032．5032．5032．50

Y1246．5556．1198．3468．6398．6675．1375．6488．1226．5768．2693．6205．1206．2316．8236．6238．8237．7234．7234．4236．6

纳米粒的制备，得到1～20号沉淀物。分别称取沉淀物少许放入1～20号西林瓶，超声分散于已用0．2μm微孔滤膜滤过的异辛烷（预实验表明所得水溶性纳米粒在异辛烷中可得到良好的分散）中，得到

－1

混悬样纳米粒质量浓度约为4mg·mL的混悬液，

Table2序号1234567891011121314151617181920

X11．202．501．202．501．202．501．202．500．762．941．851．851．851．851．851．851．851．851．851．85

Y20．2350．3310．2340．2540．3680．5010．2230．3750．2510．5610．5110．1350．1240．2380．1220．1250．1270．1240．1210．125

品液转入不结霜的石英皿，放入动态光散射仪的样ZS品托中，平衡2min后，用马尔文ZetaszierNano-90粒度检测仪进行测量，每个样品平行测量3份。2．4

含量的测定

参考《国家药品标准新药转正标准》第50册及肖远等

［17－19］

5含量测定方法（即报道的TP-

HPLC法）测定TP-5的含量并进行适当调整，具体方法如下。

色谱条件为色谱柱：PhenomenexLunaC18（5μm，4．6mm×250mm）；流动相A：50mmol·L－1磷酸盐缓冲液（以NaOH调节pH在7．0左右）；流动相B：甲醇；A泵流速：0．850mL·minmL·min

－1

－1

；B泵流速：0．150

；柱温：室温；检测波长：275nm；进样

TP-5峰与相邻杂质峰的分量：20μL。结果表明，

5峰计算应不低离度大于1．5，理论塔板数按TP-于1200。

“2．1”5纳测定方法：取按项下方法制备的TP-米粒沉淀物适量，精密称定，加入流动相溶解并稀释成每1mL中约含0．5mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取20μL供试品溶液注入液相色谱仪，记录5对照品适色谱图。另取经P2O5干燥至恒重的TP-5量，同法测定，按外标法以峰面积计算样品中TP-的含量。

3．2模型拟合

以所得纳米粒的粒径（Y1）及PI（Y2）对水的用

TP-5的用量（X3）用量（X1）、卵磷脂的用量（X2）、Design-Expert8．0．5软件包（Stat-EaseInc．，

Minneapolis，USA）进行曲线拟合并进行多元线性回归及非线性估计的分析。所得回归方程如下：

多元线性回归：

Y1=45．26+211．78X1－0．38X2+3．83X3（r=0．7784，S=125．90，F=3．70，0．001＜P＜0．01）；

Y2=0．11+0．10X1－3．19×10－4X2+3．54×10－3X3（r=0．6402，S=0．12，F=8．20，0．01＜P＜0．05）。

二项式拟合：

Y1=790．17－433．40X1－1．57X2+6．17X3－0.17X1X2－2．94X1X3－3．30×10－3X2X3+224．83X21+1．54×10－3X22+0．07X2S=66．67，3（r=0．9648，F=14．97，P＜0．0001）；

Y2=1．28－0．83X1－1．41×10－3X2－5．23×10－3X3－4．87×10－5X1X2+2．60×10－3X1X3－8．58

－62×10－6X2X3+0．24X2X2+1．30×10－41+1．39×10

3

3．1

结果

处方优化

5纳米粒的粒径、根据星点设计制备得到的TP-

PI见表2。此外，1～20号纳据含量测定结果表明，米粒的含量均为最初投药量的98%以上，含量稳定，与预实验相吻合。

表1

星点设计的因素水平及代码

Variablesandcodesofcentralcompositedesign

因素水平值

－1．6820．76

－11．20

01．85

12．50

1．6822．94

Table1

因素X1（V/mL）X2（m/mg）X3（m/mg）

146．60300．00525．00750．00903．4011．48

20．00

32．50

45．00

53．52

X2S=0．048，F=17．34，P＜0.0001）。3（r=0．9694，