226 中 国 农 业 科 学 43卷
A:野生型叶片横切结构;B:YZ138的叶片横切结构;C:WG206的叶片横切结构;D:野生型叶片叶绿体超微结构;E:YZ138叶绿体超微结构;F:WG206叶片中白色条纹部分的叶绿体超微结构;G:WG206叶片中绿色部分的叶绿体超微结构
A: Leaf cross-section of wild-type; B: Leaf cross-section of YZ138; C: Leaf cross-section of WG206; D: Chloroplast ultrastructure of wild-type; E: Chloroplast ultrastructure of YZ138; F: Chloroplast ultrastructure of the mutant parts of WG206; G: Chloroplast ultrastructure of the green parts of WG206
图2 突变体的电镜观察
Fig. 2 Electron microscope observation of mutant
对各杂交组合的F1和F2群体的叶色分离情况进行统计分析(表2)。结果表明,白色条纹突变体WG206与G99B和G60杂交(WG206分别做父本与母本)的并且F2中正常植株与突变植株分F1全是正常的绿色,
离比符合3﹕1的比例(χ20.01=6.63),说明白色条纹性状是由1对隐性的核基因控制。白色条纹突变体WG206与黄色突变体YZ138杂交的F1群体的叶色全部是正常的绿色,并且F2中正常植株与黄色突变植株、白条突变植株的分离比为:319﹕95﹕101,符合3﹕1﹕1的比例(χ20.01=9.21,v=2)。这证明了黄色突变性状也是由1对隐性核基因控制,且与控制白色条纹性状的基因不等位。 2.4 突变基因的分子定位
表2 突变体的叶色分离分析
Table 2 Segregation of leaf color in F1 and F2 population of the crosses between two mutants and normal rice lines
组合类型 Cross type
总株
Total number of plants
F1
绿 Green 659 514 319
F2 白 White 215 136 95
黄 Yellow
- - 101
分离比 Segregation ratio
卡方 χ2
利用白色条纹突变体WG206与黄色突变体首先选用均YZ138杂交产生的F2群体作为定位群体,
匀分布在水稻12条染色体上的876对SSR标记,用极端个体分组——隐性群体定位法定位突变基因。用这种方法将st9(t)和chl12(t)分别定位到第一染色体和第三染色体上,分别与标记RM1331和RM411等连锁(图3-A,图3-B,图3-D,图3-E)。在RM1331和RM411附近寻找新的具有多态性的SSR标记,然后用这些标记分析所有隐性突变个体,其中黄色突变隐性单株86株,白色条纹突变隐性单株79株。最后将白条突变基因st9(t)定位到第一染色体短臂最末端,与标记RM1331的遗传距离为9.8 cM,并且与标记M3252等标记紧密连锁(没有发现重组单株),见图3-F。
WG206/G99B 874 全绿 All green G60/WG206 650 全绿 All green WG206/ YZ138
523
全绿 All green
3﹕1 0.07 3﹕1 5.76 3﹕1﹕1 2.28