细胞生物学 提纲附内容(2)

1973年重组质粒，并在大肠杆菌中表达。

1990年，美国国立卫生研究院（NIH）进行了世界首例基因治疗。

2. 通过学习细胞学发展简史，你如何认识细胞学说的重要意义? 1.

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5. 推动产业革命，创造新的经济生长点（转基因动植物，基因武器等） 推动医学革命，延长人类寿命（干细胞研究、基因改造人、抗癌婴儿） 推动绿色革命，解决食品危机（转基因技术） 创造新品种，改善生态环境（抗旱、抗寒、抗盐植物基因的发现，三废处理的基因工程） 发展绿色能源，解决能源危机（生物能、植物光合作用、人工光解水）

细胞生物学的研究方法：

1. 分辨率概念及分辨率的调节

分辨率：区分邻近两个物点最小距离的能力。 分辨率（R）大小决定于光的波长（λ）、镜口率（N.A.）和介质折射率（n）。 R=0.61λ/N.A. （N.A.=n·sinα/2）

2. 不同显微技术的适用性

㈠光学显微镜

普通光学显微镜：对不同细胞组分进行选择性染色能显示出细胞中特殊部分如核或膜。 相差显微镜和微分干涉差显微镜：可直接从显微中观察未经固定和染色的活细胞。 细胞荧光技术（已被广泛利用）：用荧光显微镜可观察细胞中的荧光。

激光扫描共聚焦显微术

㈡电子显微镜 透射电子显微镜：用于观察超微结构（小于0.2μm）

制样技术

超薄切片技术：超薄切片机

固定技术：固定剂（戊二醛和锇酸）

负染法和投影法：样品本身显浅色，立体的形象

复刻和冷冻蚀刻技术

扫描电子显微镜

与电镜相关的技术

扫描隧道电子显微镜

3. 超薄切片技术的过程

一个一般大小的动物细胞要切成300片。

方法与步骤：锇酸和戊二醛固定样品----丙酮逐级脱水---环氧树脂包埋-----以热膨胀或机械伸缩的方式切片----重金属（铀，铅）盐染色．

4. 电子显微镜的染色方法

负染法是在将颗粒和纤维样品分散在具有亲水性支撑膜的载网上以后，滴加磷钨酸或醋酸双氧铀等染料，并随即吸去多余的染液。样