miRNA_21对其靶基因PTEN在前列腺癌中表达调控机制

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现代预防医学2013年第40卷第6期ModernPreventiveMedicine，2013，Vol.40，NO.6

·实验技术及其应用·

ｍｉＲＮＡ－２１对其靶基因ＰＴＥＮ在前列腺癌中表达调控机制的研究

肖黎1，金艳阳2，佟明2

（1.辽宁医学院，辽宁锦州121001；2.辽宁医学院附属第一医院泌尿外科）

摘要：目的观察前列腺癌组织和细胞中miRNA-21和PTEN的表达情况，探讨miRNA-21对PTEN的调控。方法应

用实时荧光定量PCR和Westernblot检测正常前列腺组织、前列腺癌组织、非依赖性前列腺癌PC-3细胞中miRNA-21和PTEN的mRNA表和蛋白质表达水平。在前列腺癌PC-3细胞中通过转染miRNA-21inhibitor成功抑制MiRNA-21表达后，实时荧光定量PCR和Westernblot检测PC-3细胞中PTEN表达水平。结果对表达量为（0.421±0.166），明显高于正常前列腺组织（0.033±0.018）

miRNA-21在前列腺癌组织中的相

（t=6.6，P﹤0.05）。miRNA-21inhibitor转染

PC3细胞后miRNA-21在空白组、转染组和阴性对照组的相对表达量分别为（0.516±0.213）、（0.117±0.044）、（0.392±0.171），转染组与空白组及阴性对照组比较差异有统学意义（F=13.1，q=7.05、4.89，P﹤0.05）。PTENmR-NA在正常前列腺组织、前列腺癌组织的相对表达量分别为（1.534±0.385）、（0.376±0.232），正常前列腺组织高于前列腺癌组织差异有统计学意义（t=5.8，P﹤0.05）；PTEN蛋白在正常前列腺组织、前列腺癌组织中的相对表达量分别为（2.010±0.386）和（0.571±0.143），差异有统计学意义（t=12.3，P﹤0.05）。miRNA-21inhibitor转染PC-3细胞后，PTENmRNA在空白组、转染组和阴性对照组组织中的表达差异不显著，但其蛋白的相对表达量分别为（0.399±0.185）、（0.826±0.197）、（0.442±0.149），转染组与空白组及阴性对照组比较差异有统学意义（F=13.9，q=4.79、4.2，P﹤0.05）。结论前列腺癌组织中miRNA-21的表达上调，在转录后水平抑制PTEN表达，miRNA-21有可能成为

前列腺癌治疗的新靶点。

关键词：前列腺癌；miRNA-21；PTEN

中图分类号：R737.25

文献标志码：A

文章编号：1003-8507（2013）06-1112-04

ThestudyofexpressionandregulatoryroleofmicroRNA-21（miR-21）on

PTENinprostatecancer

XIAOLi*，JINYan-yang，TONGMing.

*LiaoningMedicalUniversity，Jinzhou，Liaoning121001，China

Abstract：OBJECTIVEToinvestigatetheexpressionandregulatoryroleofmicroRNA-21（miR-21）onPTENanditsroleinprostatecancer.METHODSmiR-21andPTENmRNAexpressioninnormaltissue，prostatecancertissueandprostatecancercells（PC3）weretestedbyquantitativereal-timePCR.PTENproteinexpressionwastestedbywesternblot（WB）.Successful-lytransfectedwithmiRNAinhibitionMiR-21expressioninPC-3cellsofprostatecancer，real-timePCRandWesternblot，thelevelofexpressionofPTENinPC-3cells，andthentheexpressionchangesofPTENmRNAandproteinweretestedbyPCRandWB.RESULTSmiR-21wasup-regulatedby11.7multiplesinprostatecancercomparedtonormalprostatetissues.Where-astheexpressionofPTENmRNAandproteindecreasedinprostatecancertissuescomparedwithnormalprostatetissues.ItpromptedthatthemiR-21andPTENwasnegativeiycorrelative.NOobviousdifferencewasfoundamongPTENmRNAaftermiR-21inhibiortransfectionintheorganizationoftheblankgroup，transfectiongroupandnegativecontrolgroup，whereitsrelativeproteinexpressionlevelshadobviousdifference.CONCLUSIONThePTENabnormallow-expressionmaypalyakeyroleinprostatecancerduetothethemiR-21up-regulation.Keywords：Prostatecancer；MicroRNA-21；PTEN

前列腺癌的发生发展涉及一系列的基因组的改变，抑癌基因PTEN（phosphataseandtensinhomologue）丢失在前列腺癌

作者简介：肖黎（1985-），男，硕士，住院医师，研究方向：前列腺

癌相关研究

通讯作者：佟明，博士，教授，主任医师，研究方向：泌尿系肿瘤治

疗及发病机制相关研究，E-mail：Dongmingmir@

的发生及进展中起关键的调控作用［1，2］。miRNA（microrRNA）广泛存在于动植物中，它对生物体生长发育和分化调控起着重要作用，其失衡表达亦可促进多种肿瘤的发生发展［3］；大样本筛查证实miRNA-21在多种实体肿瘤中均出现高表达现象［4］。

miRNA-21的高表达可以提高前列腺癌细胞的凋亡抵抗、活力及侵袭力［5］，而以前的研究也证实下调miRNA-21在前列腺癌表达后，细胞增殖能力减弱。本研究旨在探讨miRNA-21对抑