3种化学物质诱导马铃薯块茎抗早疫病的初步研究(2)

1期高冬婷等:3种化学物质诱导马铃薯块茎抗早疫病的初步研究

149

抗病性的报道还不多见[5]。在河北大学生命科学实验室利用生物或非生物因素诱导马铃薯增强其抗真

菌病害的研究中[6-9],已筛选出一些能显著诱导马铃薯抗早疫病的化学物质[10],本研究进一步就其中3种芳香族类化合物诱导马铃薯抗早疫病及其可能的机理进行了初步探讨。

文献[10]的方法进行。

1.4 酶的提取

精确称取用于测定酶活的马铃薯块茎切片1g,在1mL酶提取液中冰浴研磨后,10000r/min,4 ,离心15min,上清液作为待测酶液冰冻保存。1.5 酶活测定

过氧化物酶(Peroxidase,POD)和苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine,PAL)的测定分别参照文献[11,12]的方法进行。

1 材料和方法

1.1 材料

马铃薯商品薯(中薯5号),购自市场;茄链格孢(Alternariasolani(Ellis&Martin)Jones&Grout),河北大学生命科学实验室保存菌种;苯酚,苯甲酸,对氨基苯甲酸。

1.2 化学物质的制备

苯酚用去离子水配成40mmol/L的母液,对氨基苯甲酸用去离子水配成50mmol/L的母液,苯甲酸用去离子水配成5mmol/L的母液,3种溶液均调整pH为6 5。将母液稀释成所需浓度,灭菌细菌过滤器过滤,待用。

1.3 诱导方法

马铃薯块茎的诱导处理、病害统计及取样按照

2 结果与分析

2.1 3种化学物质的诱导抗病效果

3种芳香族类化合物对马铃薯块茎抗早疫病的

诱导效果列于表1。在供试浓度范围内,3种化合物在较低浓度下均表现出较强的诱导抗病效果,其中,苯甲酸在0 01mmol/L时保护率最高,达到40.72%,与对照差异极显著;苯酚的保护率在1mmol/L时最高,为43.21%,与对照差异极显著;对氨基苯甲酸在5mmol/L时保护率最高为28 75%,与对照差异极显著。保护率=[(对照发病面积-处理发病面积)/对照发病面积] 100%,于接种后第10天统计计算。

表1 3种化学物质对马铃薯抗早疫病的诱导效果

Tab 1 InductionofresistanceinpotatotuberagainstA.solaniwith3chemicals

化学

物质Chemicals苯甲酸BenzoicAcid

浓度/(mmol/L)Concentration

0.010.05510.1CK50.150

发病面积

2/mmArea199.7278.0287.4321.4326.3336.

1230.5282.0303.9

保护率/%Protectionratio40.7217.3714.374.192.99-28.5712.425.59

SSR检验SSRtest =0.05 =0.01cbababaabbab

BAAAAABABAB

化学物质Chemicals苯酚Phenol

浓度/(mmol/L)Concentration

15401020CK101CK

发病面积

2/mmArea184.2235.9276.9280.4282.1324.6309.1319.8321.7

SSR检验保护率/%

SSRtes

tProtection

ratio =0.05 =0.0143.2127.1614.8113.5812.96-4.350.64-cbabababaabaa

BBABABABAABAA

对氨基苯甲酸ParaAmino对氨基苯甲酸ParaAmino2.2 3种化学物质对马铃薯块茎POD,PAL的活性影响

根据诱导抗病效果,选取最适浓度的苯酚、对氨基苯甲酸和苯甲酸处理马铃薯块茎后进行酶活测定,无菌水处理作对照。

苯酚处理马铃薯块茎后对2种酶活的影响见图1和2。诱导处理后1d,处理组诱导端POD的活性开始升高,且活性水平始终高于对照,第5天达到最大值,较对照提高165.90%(图1)。诱导处理后1d,处理组诱导端PAL的活性开始缓慢升高,3d后活性迅速升高,且活性水平始终高于对照,较对照提高559.39%(图2)。说明苯酚对上述2种酶活性均有不同程度的促进作用。

A 对照薯块诱导端;B 对照薯块非诱导端;C 处理薯块诱导端;D 处理薯块非诱导端。图2~6,同

A Inducedterminalofcontrolledtuber;B Treatedterminalofcontrolledtu-ber;C Inducedterminalofinducedtuber;D Treatedterminalofinducedtu-ber.ThesameasFig 2-6

图1 1mmol/L苯酚处理马铃薯块茎后对POD活性变化

Fig 1 TheeffectofPhenolontheactivityof

PODinpotatotuber