6-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分析过氧化物酶同工(5)

聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分析过氧化物酶同工酶

社

七、 思考题：

1、 化学聚合是通过一系列的化学反应来完成聚合的过程；光聚

合是通过不同的光照刺激下来完成物质的聚合过程。

2、 不可以混合；分离缓冲液与浓缩缓冲液中都有Cl-离子在电

泳的时候Cl-离子已经进入了连接正极的缓冲液中，而连接负极的缓冲液中Cl-离子含量减少。

3、 为了不使溶液扩散，向样品液中加入等量40%的蔗糖。加入

了蔗糖的样品液能提高沉降率，增加样品比重使样品液能很好的沉降到样品孔的底部。

4、 本实验关键步骤：1）配制分离胶和浓缩胶时要按顺序加入

各组分并迅速倒入两玻璃板间，防止胶体变质凝固；2）装胶要快，太慢则形成的胶不均匀3）装分离胶后应立即加水封闭，防止氧气是胶体变质；4）拔出梳子的时候要均匀用力向上，否则容易破坏样品槽

八、 实验小结：

本实验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术，分离小麦幼苗过氧化物酶同工酶，根据酶的生化反映，通过染色方法显示出酶的不同区带，以鉴定小麦幼苗过氧化物酶同工酶。通过本实验，主要掌握电泳技术的原理、方法、设计、装臵、凝胶配臵等问题，熟悉所有的操作过程，另外，对同工酶有一个感性的认识。

如图中所示，不同的蛋白质在电泳中分成不同的条带，实验结果