蛋白质的沉淀及变性

实验一蛋质的沉白淀及性变

一实、验目的 、二验原实 三理实、验仪器试剂 四、和实步验 骤五实、现验象录及原因记

实验目的

1 加、深对蛋白胶质溶体稳定液因 素认的。 2识了解、淀沉白质蛋的几种方法及其 用实义。意 3了、解蛋质变性与沉淀的白系关

。实

验原理 在水溶液中的白蛋分质子由于表生 面成水化和双层层而成电为定稳亲的水胶体颗 粒在，一定的化理因素影下，响蛋 质白颗可因粒失电去和脱荷水而 沉淀

。

实原验a可理逆的淀沉应反此：蛋白时分质的子结构尚发生未显 著化，除变引起沉淀去的素后因沉，的淀蛋质白仍然 解溶于原的溶来剂中并保持。其天然性而不质性变。 大多数如白质的蛋盐析用或在低温作下乙用(醇丙醇)或 时短作间用白质等。一般蛋在化蛋白质纯，常利用 此类反时应。b 不逆可沉的反淀：此应时蛋质白子内分部结发生构大重改 ，蛋白变质因变而沉性，淀除去起沉引淀因的素后， 蛋质不再白溶于原来溶中剂。加如热引的起白质蛋沉 与淀固、凝白质蛋重与属金子离或些某机有的反酸 应都等于此属。类蛋白质但性后变，时有由维于持液 溶定的条稳件然仍存(如在荷)电并，不析出。因此 性蛋变质并白一不定都表现沉淀，而为淀的沉白蛋质 也未必已都性变。

实原理验 蛋在白质液溶中入适量的无机加盐硫酸(、铵柳酸钠、氯化纳 )等浓溶液会使就蛋白质出析称 这，种用作为蛋质的白盐析用作。盐当浓度同， 析不的蛋出质也白同。不球如白蛋在可饱和硫半酸 铵溶中析出液，清而蛋白则在饱和酸铵溶液硫中 才析出能。由盐作析获用的得白蛋沉质淀，降 低其盐当类浓度，又时能再溶解故，白蛋的质盐 作析是用可逆程。过

实仪验和试剂(1器)器仪试管：、试架、管管吸量、。 筒(2试剂) :、A蛋质白—化纳溶液：取20mL氯清，加蒸馏蛋200水L和m和氯化饱 钠溶液01mL,充分搅0后匀用布滤去纱溶物(不氯化加钠目的的溶是解 球白蛋。 B、)蛋质溶液白取5m:L清，蛋蒸用馏水稀至100释L,m拌搅均匀， 用纱后布过。 C滤饱和、硫铵溶酸液：称酸硫铵80g加于1500m0蒸馏水L,中在 0~708温下搅度拌溶，室温促放置中夜过瓶，析底白出结晶，色清 液即上饱为和硫铵溶酸液。D、饱 苦和酸味溶液取：2苦味g放入三酸烧角瓶加，馏水100蒸L, 放m80度入浴约1水0im使之n完全溶，解室于下冷温后瓶底却析黄色出 结，晶清液上即饱和为苦酸，味此液可放存数年 E。、1%乙溶液酸、%1乙酸溶铅、液%硫酸1铜1、三氯乙酸%溶。液 、0F5.磺基水%酸杨液溶 G、5%鞣酸溶。液。L、硫酸铵粉 。

末实

验骤步

1(盐析作);用 (2)乙沉醇蛋白淀质；(3 有)机酸淀蛋沉白；质 (4重)金沉属蛋白质淀 (;5)生碱试剂物淀蛋白质。

沉

实验象记现及录因原