快速检测西尼罗病毒胶体金免疫层析试纸条方法

JOURNALOFINSPECTIONANDQUARANTINE检验检疫学刊Vol.20No.22010年第2期

快速检测西尼罗病毒胶体金免疫层析试

纸条方法的建立

王彦芳

1,2

　姜宝芹　邢福彬　杨鹏飞　张丽萍　平芮巾　咸庆杰

222221,2

　胡孔新　岳启安

21

(1.潍坊医学院　山东潍坊　261053;2.中国检验检疫科学研究院)

摘要　[目的]建立一种能快速区分、简便诊断西尼罗病毒感染的胶体金免疫层析试纸条方法。[方法]

采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记西尼罗病毒NS1蛋白,采用双抗原夹心法制备胶体金免疫层析试纸条,对试纸条进行特异性和敏感性评价。[结果]15m;在敏感性上,该试纸条对阳性血清的检测较美国Focus公司商品化的ELI;89份阴性血清进行检测,试纸条检出9份阳性,ELISA试剂盒检出3.52%,特异性为89.89%。[结论],为进一步大规模应用奠

定了基础。

关键词　;;免疫层析法中图分类号.2

EstablishmentoftheRapidDetectionofWestNileViruswithGold-immunochromatography

WangYanfang

1,2

,JiangBaoqin,XingFubin,YangPengfei,ZhangLiping,PingRuijin,

XianQingjie

1,2

22222

,HuKongxin

2

(1.WeifangMedicalUniversity,Weifang,Shandong,261053;2.ChineseAcademyofInspectionandQuarantine)Abstract:It’stoestablisharapidandconvenientgold-immunochromatographyfordetectingofWestNileVirus.Synthesize25nmcolloidalgoldparticlesbytrisodiumcitratedisoxidationmethod.Basedonthedoubleantigensandwichtechnique,NS1proteinofWestNileViruswascoupledwithcolloidalgoldtopreparecolloidalprobewhichwasusedtodetectAnti-NS1antibodyofWestNileVirus.Thesensitivityandspecificitywereevaluated.Testingresultscanbeobtainedin15minuteswithsensitivityoftheestablishedmethodislowerthanFocusWestNileVirusIgGELISAatitre;eighty-ninebloodserumsamplesweretestedbymeansofgold-immunochromatographyandELISA,ninesampleswerepositivetestedbygold-immunochromatography,whilethreesampleswerepositivetest2edbyELISA,rateofcoincidenceis86.52%,whencomparedwiththatofELISA.Thegold-immunochromatogra2phyisasimpleandrapidassayfordetectingWestNileVirusonspotwhichcanbefurtherstudiedtobeassembledintocommercialkit.

Keywords:WestNileVirus;Colloidalgold;Immunochromatography1　前言

西尼罗病毒(WestNileVirus,WNV)是黄病毒科黄病毒属日本脑炎病毒血清群的成员,于1937年

在乌干达西尼罗省一名发热妇女血清中首次被分离。该病毒广泛分布于中东、西亚和非洲,由其引起的西尼罗病近年来在罗马尼亚、俄罗斯、美国等地均有过大规模爆发。WNV是虫媒病毒,主要通过库蚊传播,可感染人、马、猪、鸟等多种动物。人感染该病毒后,可出现从不能觉察的亚临床到发

[1]

热、致死性的脑炎等不同程度的临床症状,目前尚无有效的治疗方法和疫苗接种,一旦爆发流行,极易引起人们的恐慌,已构成全球公共卫生的威胁。为了解决WNV感染的诊断、流行病学调查和监测,亟需建立一种敏感、特异和快速的检测方法。

胶体金免疫层析试纸条法因其快速、简便,不需要大型装备,可以实现现场快速检测等特点,已成为目前传染病快速检测的研究热点。本研究中,笔者利用双抗原夹心法制备了检测WNV的胶体金

项目基金:国家公益性行业科研专项(200810162);国家质检总局科研项目(2007IK211,2008IK210)

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