时间分辨荧光免疫分析技术的研究进展及在食品安全领域中的应用

时间分辨荧光免疫分析技术的研究进展及

在食品安全领域中的应用

金　晶，赖卫华，涂祖新，李　鹏

（南昌大学　食品科学教育部重点实验室，江西　南昌　　　　　　　３３００４７）

摘　　　要：时间分辨荧光免疫分析技术是一种建立在免疫吸附分离和时间分辨荧光技术基础上的超灵敏检测方法。这项技术发展迅速，已广泛地应用于诸如临床检测、食品安全快速检测等领域。本文旨在全面地介绍时间分辨免疫荧光分析技术的原理和优点，并对这项技术的研究进展和在食品安全领域的应用作一综述。关键词：时间分辨荧光分析；研究进展；食品安全

Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　Ｆｏｏｄ　Ｓａｆｅｔｙ　ｏｆ　　Ｔｉｍｅ－ｒｅｓｏｌｖｅｄ　Ｆｌｕｏｒｏｉｍｍｕｏａｓｓａｙ

ＪＩＮ　Ｊｉｎｇ，ＬＡＩ　Ｗｅｉ－ｈｕａ，ＴＵ　Ｚｕ－ｘｉｎ，ＬＩ　Ｐｅｎｇ

（Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，　Ｎａｎｃｈａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　Ｎａｎｃｈａｎｇ　　　　　　　　３３００４７，　Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｔｉｍｅ－ｒｅｓｏｌｖｅｄ　ｆｌｕｏｒｏｉｍｍｕｏａｓｓａｙ（ＴＲＦＩＡ），　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｉｍｍｕｎｏｍａｇｎｅｔｉｃ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｉｍｅ－ｒｅｓｏｌｖｅｄ　ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｒｙ，ｉｓ　ａ　ｓｕｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗｈｉｃｈ　ｉｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｒａｐｉｄｌｙ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｅｘｔｅｎｓｉｖｅ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｍａｎｙ　ｆｉｅｌｄｓ，　ｓｕｃｈ　ａｓ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｎｄｆｏｏｄ　ｓａｆｅｔｙ　ｒａｐｉｄ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．　Ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ　ｍａｉｎｌｙ　ａｉｍｓ　ｔｏ　ｉｎｔｒｏｄｕｃｅ　ｔｈｅ　ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ，　ｔｈｅ　ａｄｖａｎｔａｇｅｓ　ｏｆ　ＴＲＦＩＡ，　ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｃｈ　ｐｒｏｇｒｅｓｓａｎｄ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｆｏｏｄ　ｓａｆｅｔｙ．

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｔｉｍｅ－ｒｅｓｏｌｖｅｄ　ｆｌｕｏｒｏｉｍｍｕｏａｓｓａｙ；ｐｒｏｇｒｅｓｓ；ｆｏｏｄ　ｓａｆｅｔｙ

中图分类号：ＴＳ２０７．３　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　文章编号：１００２－６６３０（２００６）１２－０８８６－０４

随着分析方法的飞速发展，无论是食品中有毒有害物质，还是环境中痕量元素的检测，或者生物体内功能因子的分析，都迫切需要一种灵敏度高、快速准确、性能稳定的痕量分析方法。时间分辨荧光免疫分析技术（ｔｉｍｅ－ｒｅｓｏｌｖｅｄ　ｆｌｕｏｒｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，简称为ＴＲＦＩＡ）是２０世纪８０年代中期发展起来的一种新的荧光标记技术。这种方法应用某些特殊的稀土金属，能够区分背景光的散射所引起的干扰，从而大大地提高了分析的灵敏度。与传统的酶免疫法（ＥＩＡ）、发射免疫分析法（ＲＩＡ）相比，它具有很多优点：灵敏度高达１０－１９；稳定性好，克服了酶和放射性荧光物质的不稳定性；动态范围宽；试剂货架期长；无放射性危害等，　时间分辨荧光分析目前被公认为是灵敏度最高的分析方法之一［１，２］。１

时间分辨荧光免疫分析法的原理及优势

物，标记抗体、抗原、激素、多肽、蛋白质、核酸探针及生物细胞，以代替传统的荧光物质、酶、同位素、化学发光物质。用时间分辨荧光免疫分析检测仪测定反应产物中的荧光强度，根据产物荧光强度和相对荧光强度的比值，准确地测定反应体系中被分析物的浓度。

ＴＲＦＩＡ所使用的荧光标记物是镧系稀土金属［４］，由于镧系稀土金属离子螯合物有很长的荧光寿命（微秒级），有别于传统荧光的短荧光寿命，使其能通过时间分辨方式区别于背景荧光（钠秒级），正是由于荧光衰变时间长，可以延缓测量时间，待测样品中短寿命的本底荧光衰变后再测稀土离子的特异荧光，因此可完全消除本底荧光的干扰。镧系稀土金属离子螯合物荧光很宽的Ｓｔｏｋｅｓ位移使其容易通过波长分辨方式进一步区别于背景荧光，提高方法学的稳定性。镧系稀土金属离子螯合物狭窄的荧光发射峰使其荧光检测具有很高的效率，进一步提高了信号检测的特异性和灵敏性。此外，由于检测时加入了荧光增强液，它可使原来荧光增强１００

时间分辨荧光免疫分析法（ＴＲＦＩＡ）是在荧光分析（ＦＩＡ）的基础上发展起来的一种特殊的荧光分析法［３］。它利用了具有独特荧光特性的镧系元素及其螯合物为示踪

收稿日期：２００６－０８－１８

１９８２）

品的检测［１２］。３．４

万倍，以上各种因素使ＴＲＦＩＡ的检测灵敏度和准确性大大提高。２

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