高纯度燕麦β-葡聚糖测定方法研究
随着人类物质生活水平的提高,人类的饮食结构反而愈不均衡。因此具有显著降血脂、降血糖及维持肠道微生物生态环境功能的燕麦葡聚糖[1~4]的需求市场明显增大,而高纯度的燕麦葡聚糖因其功效更为显著,其需求更为明显。但目前国内外对于高纯度燕麦葡聚糖的检测并无统一标准,这极其不利于高纯度燕麦葡聚糖的研究发展。
目前,谷物麸中β-葡聚糖的测定[4~7]主要是采用AOAC995.16酶法,该方法应用于测定高纯度燕麦葡聚糖的原理虽然相同,但是由于含量的增加,产品的分子量不同,对于酶解的用量,水解的时间等条件有所不同,因此,本文着重研究酶解测定高纯度葡聚糖时的作用条件,并通过对方法的精密度和回收率进行判断方法的准确性。
1 材料
1.1试剂与待测样
70%纯度燕麦β-葡聚糖:广东省食品工业研究所 试剂盒:Megazyme ;K-BGLU 1.2主要仪器设备
移液枪:Tomos;L1160471
恒温水浴锅:上海申胜生物技术有限公司;W201B 漩涡混合振荡器:上海琪特分析一起有限公司;XW-80A 紫外可见分光光度仪:上海美谱达仪器有限公司;UV-6300PC 2 实验方法 2.1测定步骤
准确称量约10mg70%纯度燕麦β-葡聚糖样品到试管内,确保全部样品完全落入试管。
用0.2ml乙醇(50%v/v)湿润样品,加磷酸钠缓冲液(4.0ml,20mM,Ph6.5)并且用振荡器振荡。
然后,马上将试管放入开水中,保持一分钟。用振荡器振荡样品,保持在开水中2分钟,再次振荡。