蕙兰的无菌播种及根状茎培养技术研究(2)

相同培养基上，比较其与未经过处理的种子在萌发率上是否存在差异，重复三次。在培养室中培养90d后统计萌发率。

无菌播种的培养基成分为1/2MS+NAA0.5mg/L+BA0.5mg/L+蔗糖30g/L+

琼脂6g/L+0.2%AC，调节PH值至5.0～5.4。

3．根状茎的培养。播种60～80d后，种子陆续萌发，形成原球茎，30～40d后即发育成根状茎。将发育良好的根状茎转入不添加任何植物生长调节剂的MS+蔗糖6g/L+0.2%AC的培养基中，继代4次后，再将其转入以下9组培养基中：

（1）MS+NAA0.5mg/L+BA0.5mg/L

（2）MS+NAA0.5mg/L+BA1.0mg/L

（3）MS+NAA0.5mg/L+BA2.0mg/L

（4）W+NAA0.5mg/L+BA0.5mg/L

（5）W+NAA0.5mg/L+BA1.0mg/L

（6）W+NAA0.5mg/L+BA2.0mg/L

（7）B5+NAA0.5mg/L+BA0.5mg/L

（8）B5+NAA0.5mg/L+BA1.0mg/L

（9）B5+NAA0.5mg/L+BA2.0mg/L

上述各组培养基均添加3%的蔗糖和0.6%的琼脂，调节PH至5.0～5.4。每个培养瓶接种三条根状茎,重复三次。培养60d后统计根状茎增殖的倍数。

以上各试验的培养条件均为：温度25±2℃，光照强度2000lx，光照时间16h/d。

三、结果与分析

（一）果实发育时间与种子萌发率的关系

分别采收授粉后第60、120、180和240d的未开裂蒴果，经表面消毒后，在无菌条件下，取出种子，均匀地播于前述的培养基上。90d后统计萌发率，其结果见表1。

表3-1 果实发育时间与种子萌发率统计表