蕙兰的无菌播种及根状茎培养技术研究(3)

试验结果表明，授粉后种子能否萌发与果实成熟度密切相关。授粉后60d的果实，种子的胚发育不成熟，萌发率低；授粉后240d的果实，可能积累了过多的生长抑制物，萌发率也有所降低。以采收授粉后120d的蒴果，进行无菌播种，种子的萌发率最高。

（二）NaOH溶液预处理对种子萌发的影响

取一枚发育良好的未开裂蒴果，消毒后将其纵切，将种子分为4份，其中一份直接播种于前述培养基中，其余三份分别经0.1mol·L-1NaOH溶液处理10、20、30min后，用无菌水冲洗后再播种于相同培养基中。90d后统计各组的萌发率并重复三次，结果如下表2所示。

表3-2 NaOH溶液预处理与种子萌发率统计表

由上表不难看出，0.1mol·L-1NaO

H溶液浸泡处理对提高蕙兰种子萌发率的作用并不明显。

（三）培养基类型和植物生长调节剂浓度配比对根状茎增殖的影响

种子在培养基上吸水膨胀，不久胚细胞开始分裂，种胚增大，60～80d后陆续萌发，形成原球茎。原球茎不久即伸长形成根状茎，根状茎的生长具有极性，以合轴的方式进行分枝，先端可发育成芽。根状茎的表面有许多瘤状突起，表皮细胞伸长形成白色的吸收毛，可能与吸收水分和营养有关。旺盛生长的根状茎呈深绿色。

为避免其他因素的干扰，试验前先把发育良好的根状茎转入不添加植物生长调节剂的MS培养基中，连续继代培养4次。再将新增殖的根状茎分别转入述的9组培养基中，60d后统计根状茎增殖的倍数，结果见下表3。

表3-3 根状茎增殖倍数统计表

以上的结果表明：蕙兰根状茎增殖的最佳培养基的配方为MS+NAA0.5mg/L+BA0.5mg/L+蔗糖30g/L+

琼脂6g/L或B5+NAA0.5

Mg/L+BA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L。

培养60d后，根状茎的增殖倍数分别可达2.56和2.74。

四、讨论