胆炎康片药学研究资料综述

药学研究资料综述

一、工艺研究的试验资料

(一)药材的分拣去杂质及质量验收

处方中各有关药味经分拣去杂质，按有关法规检验；辅料按《中国药典》20xx年版二部有关规定检验；符合规定者备用。

(二)配料与掺混

符合规定的药材根据生产批量大小，按处方称量配伍，分开放置，分别掺混。

(三)粉碎

根据生产工艺需要，将需粉碎药材土大黄、黄芩用中药粉碎机粉碎，过80目筛，备用。经对三批中试产品粉碎工艺考查，结果表明常规粉碎方法即可符合本品生产需要。

(四)提取工艺研究

提取药材为连钱草、虎耳草、小花清风藤、凤尾草、黄柏、穿心莲。根据各药味所含成分的理化性质，适宜采用水提取，故采取正交试验优化水提取工艺条件。

取提取药材适当破碎，按原处方量配伍，制备工艺正交试验用样品。每正交试验样品药材重1200g，其中连钱草200g、虎耳草200g、小花清风藤200g、凤尾草200g、黄柏200g、穿心莲200g。

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表2、正交试验设计表

取每正交试验样品1200g，依表2设计加溶剂量、提取时间、提取次数，分别提取，放冷，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为 1.20～1.25(80℃)的清膏，减压干燥，恒重，以干膏量中盐酸小檗碱的总量作为评价指标。

表3、正交实验结果评价表

由上述极差分析数据表明：溶剂的倍数为显著因素，其次为提取次数，提取时间，即A>C>B，最佳提取方法为A1B3C3，由于B2和B3 、C2和C3相差甚微，考虑到实际生产中能源问题，拟采用加水10倍量，提取二次，每次2小时。

确证实验：

取两份确证实验样品，每份样品中连钱草200g、虎耳草200g、小花清风藤200g、凤尾草200g、黄柏200g、穿心莲200g，适当破碎，加水10倍量，提取二次，每次2小时。滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.20～1.25(80℃)的清膏，减压干燥，恒重，以干膏量中盐酸小檗碱的总量作为评价指标。

结果表明：加水10倍量，提取二次，每次2小时的提取方法与最优方法相当，且重复性良好。

（五）成型工艺条件的选定

1．制粒工艺选择：根据原标准和本公司多年的生产经验，结合常规制粒操作，拟选用浸膏和药粉直接混合制粒的方法。结果用清膏作粘合剂，14目筛制粒能获得适宜的颗粒，采用60～80℃常压干燥方法干燥，颗粒含水量控制在5～7%，12目筛整粒后能够得到理想的片芯。

2．压片工艺

由于本品的颗粒流动性较差，外加0.5%硬脂酸镁作助流剂，选用直径为12mm的浅平冲头压片，理论片重定为0.50g。压片，结果：成型性好，硬度适中，脆碎度0.2%，符合包衣条件。

3．包衣

与糖衣片相比，薄膜衣片有明显的优势：成膜性好、衣层坚硬稳定、色泽亮丽、光洁细

腻、防潮防湿、崩解时限短、增重少、生产成本低、操作时间短、劳动效率高，无粉尘飞扬，有利于劳动保护等优点，特别是薄膜衣片不含糖，糖尿病患者也可使用。故胆炎康片定为薄膜衣片。

高效包衣操作方法及技术参数：①包衣液配制②筛去素片中的细粉及残片③将素片置高效包衣机内，开启主电机，转速控制在1-3转/分，开启热风，片芯预热至40-45摄氏度。

④开启喷液系统，调整好喷枪高度，包衣液流量，雾化压力，在喷雾过程中片床的温度保持在35℃～40℃(此时锅速为3～5转/分)。⑤待片面包匀一层衣后，调节锅转速为6～9转/分，继续操作，直至将包衣液喷完、吹干。⑥包衣结束后，将包好的薄膜衣片置凉片室干燥。

包衣材料采用xxxx药用辅料有限公司生产的胃溶型薄膜包衣粉（批准文号为x药准字F20xxxxxx），按常规高效包衣工艺操作，可以得到理想的成品。以上八味，土大黄、黄芩粉碎成细粉，其余连钱草等六味，加10倍量水提取二次，每次2小时，合并滤液，浓缩至相对密度为1.20～1.25(80℃)的清膏，加入上述细粉，混匀，制粒，干燥，加入硬脂酸镁，压片，包薄膜衣，即得。

(六)三批中试生产考核工艺稳定性

取处方十倍量药材，在中试设备上试验，考核工艺稳定性，三批数据表明，工艺稳定，具可重复性和再现性。根据中试制成品量，确定本品每处方量制成1000片。

二、质量研究的试验资料及文献资料

胆炎康胶囊收载于国家药品监督管理局《国家中成药标准汇编》（中成药地方标准上升国家标准部分内科肝胆分册），胆炎康片是根据胆炎康胶囊改变剂型的中药8类新药（减免临床研究），为了实施胆炎康片的质量标准研究，将成型工艺中制备的样品（批号：xx1103）用于质量标准研究，现将质量标准起草说明报告如下：

【名称】胆炎康片

【处方】除辅料外，与原剂型标准一致。

【制法】除成型工艺外，与原剂型标准一致。

【性状】依三批中试产品的实际性状描述。

【鉴别】(1)为处方中连钱草的薄层色谱鉴别，经与连钱草对照药材、熊果酸对照品、缺连钱草阴性对照样品对照，斑点显色清晰，Rf值适宜，专属性强。予以采用。本鉴别项与原剂型标准一致。

（2）为处方中黄芩的薄层色谱鉴别，经与黄芩对照药材、黄芩苷对照品、缺黄芩阴性样品对照，在与对照药材及对照品相应的位置上显相同颜色的斑点，斑点显色清晰，Rf值适宜，专属性强。予以采用。本鉴别项与原剂型标准一致。

（3）还进行了黄柏的薄层色谱鉴别，参考文献，取本品10片，除去包衣,研细，取1g，加甲醇10ml，加热回流30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。同法制

成对照药材和缺黄柏阴性样品溶液。再取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg 的对照品溶液。吸取上述溶液各10µl点于硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10:6:1:1）或正丁醇-醋酸-水（7:1:2）为展开剂，置氨蒸汽预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，阴性样品有干扰，本品中黄柏暂未找到具特异性的薄层色谱鉴别方法。

（4）还进行了穿心莲的薄层色谱鉴别，参考文献，取本品10片，除去包衣,研细，取2g，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，作为供试品溶液。同法制成对照药材和缺穿心莲阴性样品溶液。再取穿心莲内酯对照品、脱水穿心莲内酯对照品适量，加无水乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液,作为对照品溶液。吸取上述溶液各5µl点于硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙醇（2:1）或三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇（4:3:0.4）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，斑点不清晰，专属性不强,本品中穿心莲暂未找到具特异性的薄层色谱鉴别方法。

【检查】依照《中国药典》20xx年版一部附录(ⅠL)的有关规定对三批中试产品检查，均符合药典有关规定。此项与原剂型标准一致。

重金属三批中试产品重金属均低于百万分之五，暂不设定重金属检查项。

砷盐检查三批中试产品砷盐均低于百万分之二，暂不设定砷盐检查项。

【微生物检查】依《中国药典》20xx年版一部附录（ⅩⅢC）的有关规定对三批中试产品检查，均符合药典有关规定。此项是根据《中国药典》20xx年版一部与历版药典的不同而增加的。

【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典20xx年版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.4％磷酸溶液(75:25)为流动相；检测波长为436nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备取大黄素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含20μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取重量差异项下的本品，研细，取3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，加入 1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加热回流1小时，放冷，转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。

大黄素对照品中国药品生物制品检定所756-

样品自制批号：xx1103

仪器与试剂

高效液相色谱仪xx xx 型高压恒流泵

xxxx紫外可见波长检测器

xxxx色谱数据工作站

色谱柱xxxx

填料：Hypersil ODS2 5um 尺寸：4.6×200mm

柱号：E1523753批号：

色谱甲醇天津四友

磷酸为分析纯

精密称取大黄素对照品适量,加甲醇制成每1ml含510µg的溶液,作为对照品溶液。

以510µg/ml的对照品溶液为母液，分别配制102µg/ml、51µg/ml、40.8µg/ml、30.6µg/ml、20.4µg/ml、10.2µg/ml的对照品溶液。

分别精密吸取上述各对照品溶液10µl,注入液相色谱仪,测定,计算，即得。

回归曲线为Y(峰面积)=28.7987X (浓度)＋67.6584 r=0.9995

线性范围为10.2～102μg/ml，标准曲线近似过圆点，采用外标一点法定量。

供试品溶液制备方法的选择：

1.取重量差异项下的本品，研细，取3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷25ml和

2.5mol/L硫酸溶液20ml，称定重量，置80℃水浴上加热回流2小时，冷却至室温，再称定重量，用三氯甲烷补足减失重量，摇匀。分取三氯甲烷液，精密量取10ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.取重量差异项下的本品，研细，取3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，加入 1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加热回流1小时，放冷，转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。

同一样品按上述二种方法，每种方法制备三个供试品，分别取上述溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，经比较两种方法测定得的含量基本一致，第二种方法重现性好，操作简单，故选用第二种供试品溶液制备方法。

精密度同一样品连续进样测定5次，相对标准偏差为0.94%，小于3.0%。

稳定性同一样品,制备后在30分钟、1小时、2小时、6小时、12小时后分别测定，相对标准偏差为3.06%，小于5.0%，表明样品放置12小时内稳定。

重现性同一样品，取5份，各约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，加入1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加热回流1小时，放冷，转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液作为供试品溶液。取上述供试

品溶液各10µl，注入液相色谱仪，测定。相对标准偏差为1.89%，小于5.0%。

加样回收率取已知含量的样品5份(约3g)，精密称定，置具塞锥形瓶中，各精密加入每1ml含510μg的大黄素对照品溶液5ml，蒸干，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量,用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，加入1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加热回流1小时，放冷，转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。作为供试品溶液。取上述供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪，测定,平均回收率为99.72%。

样品测定对三批中试产品，采用原标准的含量测定方法测定，其结果如下：

【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典20xx年版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.4％磷酸溶液(75:25)为流动相；检测波长为436nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备取大黄素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含20μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取重量差异项下的本品，研细，取3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，加入 1.5mol/L的硫酸溶液5ml，加热回流1小时，放冷，转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0．45μm)滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。

三批中试样品含量测定数据表

参考原剂型标准，暂定本品每片含土大黄以大黄素(C15H1005)计，不得少于200μg。

【功能与主治】苗医：泱疴洼胗，沓斡档孟：陡：乃兴仰，乃兴仰·蒙浮秋管兜。

中医：清热利湿，排石止痛。用于肝胆湿热蕴结所致急慢性胆囊炎，胆管炎，胆石症，以及胆囊手术后综合症。与原剂型标准一致

【用法与用量】口服，一次2～4片，一日3次。与原剂型标准一致

【注意事项】孕妇忌服。与原剂型标准一致

【规格】基片每片重0.5g 与原剂型标准一致

【贮藏】密封。与原剂型标准一致

【有效期】暂定2年。

三、稳定性试验研究

依据《中药新药质量稳定性研究的技术要求》，将拟上市铝塑泡罩包装的胆炎康片用胆炎康片质量标准（草案）及《中华人民共和国药典》20xx年版一部附录ⅩⅢ C微生物限度检查法对三批中试产品进行试验。经对拟上市铝塑泡罩包装的胆炎康片置常温下放置考查六个月；又经对拟上市铝塑泡罩包装的胆炎康片置温度40±2℃，相对湿度75%±5%的条件下放置6个月(相当于常温下二年)，按稳定性重点考察项目（性状、鉴别、重量差异、崩解时限、含量测定、微生物限度检查等）检测。实验结果都表明该品种放置过程中质量稳定，包装材料对质量无影响。

主要参考文献

《中国药典》20xx年版一部国家药典委员会

《中国药典》20xx年版二部国家药典委员会

《中国药典》20xx年版一部国家药典委员会

《中国药典》20xx年版二部国家药典委员会

《中国药典》1977年版一部国家药典委员会

《中药新制剂开发与应用》人民卫生出版社第二版

《现代实用中药鉴别技术》人民卫生出版社

《中成药中的药材薄层色谱鉴别》人民卫生出版社

《贵州省中药材.民族药材标准》贵州省食品药品监督管理局