2.2.1动物细胞培养和核移植技术(公开课)

在治疗烧伤病人时，通常采用的方法是取 烧伤病人健康皮肤进行自体移植。但对于一个 大面积烧伤的病人来说，自体健康皮肤非常有 限，使用他人皮肤来源不足，而且会产生免疫 排斥反应。那么，怎么才能获得大量的自体健 康皮肤呢？

是其他动物细胞工程技术的基础。

动物细胞培养

动物 细胞 工程 常用 技术

动物细胞核移植动物细胞融合 单克隆抗体技术

1、概念：就是从动物机体中取出相关的组 织，将它分散成单个细胞，然后放在 适宜的培养基中，让这些细胞生长和 增殖。

2、原理：细胞增殖

3、过程相关概念 ★原代培养 ★传代培养 ★细胞贴壁 ★接触抑制

取动物组织块

制成细胞悬液

增殖能力强，分裂旺盛， 分化程度低，容易培养

胚胎或幼龄动物器官组织剪碎 胰蛋白酶处理加培养液

单个细胞 原代培养 制成细胞悬液 转入培养瓶内培养细胞贴壁

接触抑制

培养箱

强调一：细胞贴壁过程■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就 贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。

■培养瓶或培养皿壁要求： 内表面光滑、无毒、无菌、易 于贴附

强调二：接触抑制■当贴壁细胞分裂生 长到表面相互接触时, 细胞就会停止分裂增 殖，这种现象称为细 胞的接触抑制。细胞的接触抑制

【随堂练习】

【例1】动物细胞工程技术的基础是 ( D )A.动物细胞融合 C.胚胎移植 B.单克隆抗体 D.动物细胞培养

【例2】下列属于动物细胞工程中的工具是( C ) A.限制性内切酶 B.DNA连接酶 C.胰蛋白酶 D.果胶酶

【随堂练习】 【例3】用于动物细胞培养的组织和细胞大

都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官 或组织，其主要原因是这样的组织细胞 (D )A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强

【随堂练习】

【例4】动物细胞培养的特点

(

A )

①细胞贴壁 ②有丝分裂 ③细胞分化 ④接触抑制 ⑤减数分裂

⑥原代培养一般传1-10代

A、①②④⑥C、①③④⑥

B、②③④⑤D、③④⑤⑥

★传代培养当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用 胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来, 然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并 从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个 过程称传代培养.(分瓶培养的过程)

接触抑制分瓶 胰蛋白酶

10代细胞 传 代 培 养 细胞株 遗传物质未改变 50代细胞 细胞系 无限传代 遗传物质改变

4、动物细胞培养条件1、无菌、无毒的环境(添加一定量的抗生素，定期更换培养液)

2、营养葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、 微量元素(合成培养基)+动物血清等

3、温

度和PH温度36.5+0.5度，pH7.2~7.4

保证细胞顺利的 生长增殖

4、气体环境O2和CO2(95%空气和5% CO2 )

植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养细胞的全能性 固体培养基 细胞增殖 液体培养基 葡萄糖等、 动物血清

原

理

培养基性质

培养基特有成分 蔗糖、植物激素

培养结果 培养目的

新的个体或细胞产品

细胞或细胞产品获得细胞 或细胞产物

快速繁殖、培育 无病毒植株等

【随堂练习】 【例5】在动物细胞培养中有部分细胞可能在 培养条件下 无限制地传代下去，这种传代细 胞称之为( D )

A.原代培养 C.细胞株

B.传代培养 D.细胞系

【例6】动物细胞培养的正确过程是( A ) A.原代培养→传代培养→细胞株→细胞系 B. 原代培养→传代培养→细胞系→细胞株 C.传代培养→细胞系→原代培养→细胞株 D. 原代培养→细胞系→传代培养→细胞株

【随堂练习】(2008宁夏)回答下列有关动物细胞培养的问题： (1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分 裂生长到细胞表面 相互接触 时，细胞会停止分裂 增殖，这种现象称为细胞的 接触抑制 。此时，瓶 壁上形成的细胞层数是 单层 。要使贴壁的细胞 从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的 是 胰蛋白酶 。 (2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细 胞分裂停止，进而出现 衰老或死亡 的现象；但极 少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传 物质发生改变而变成 不死性 细胞，该种细胞的黏 着性 降低 ，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的 量 减少 。