BHK21细胞在新型微载体培养系统生长条件优化
摘要:目的:使用bellocell-500ap生物反应器和bionoc?-ii 微载体,对bhk21细胞在此新型高密度培养生物反应器中的生长特性进行研究。方法:首先将1.5×108个bhk21细胞悬液加入含有微载体的生物反应器内,按生物反应器厂家推荐参数进行培养,每天取载体计数观察bhk21的生长特性。然后调整细胞浓度和微载体培养系统运行参数。结果:bhk21细胞经过6 d培养载体中细胞总数达到峰值,细胞密度是起始接入数量的31倍为4.41×109个;经过培养过程参数优化,确定适于bhk21细胞高密度培养参数。试验成功实现了bhk21细胞的高密度培养,为以bhk21细胞为生产基质的病毒疫苗生产提供了一条简便快捷的途径。
关键词:生物反应器微载体 bhk21细胞
中图分类号:s852.659 文献标识码:a 文章编号:1674-098x (2012)12(b)-00-02
目前我国兽医生物制品生产过程中,细胞培养设备相对比较落后,大多是在转瓶内旋转贴壁培养,不仅劳动强度大、操作复杂、容易造成污染,还经常出现细胞贴壁不均造成不同批次细胞的差异。为了提高产量,只有通过增加培养转瓶数,而这往往受到生产场地的限制,而生物反应器就弥补了这些不足。bellocell-500ap 是美国cesco公司研发的一种能有效地使细胞内外营养和气体交换的新型固定床式生物反应器。在国内外该生物反应器已经广泛应用于hek 293、vero、cho、sf-9、st等多种哺乳动物细胞和昆虫细