甘薯块根特异蛋白——Sporamin的研究进展(10)

以甘薯优良品种"新大紫”的茎尖培养再生植株为试材, 经根癌农杆菌介导将甘薯块根贮藏蛋白启动子(Sporamin

promoter)调控下的10 kD玉米醇溶蛋白基因导入到"新大紫”中, 并获得了转化植株. 甘薯品种"新大紫”再生植株的茎切段,与携带有表达载体质粒pSP10Z的根癌农杆菌菌株LBA 4404共培养后, 在含75 mg/L 卡那霉素(Kan)的筛选培养基上可产生抗性芽,最高频率达6.2%. 其中, 32.1%的抗性芽可在含100 mg/L Kan的培养基上生根, 从而形成转化植株. PCR和PCR-Southern检测证实, 10 kD玉米醇溶蛋白基因已导入并整合到甘薯品种"新大紫”的基因组中.

9.学位论文 张彦伟 蔗糖转运蛋白基因在提高甜菜含糖量中的初步研究 2009

蔗糖是植物光合作用同化产物最主要的转运形式，其转运的方向和速率对于高等植物的生长发育至关重要。蔗糖由源向库的运输是通过韧皮部进行的。蔗糖转运蛋白（SUCs）在蔗糖转运过程中起着极为重要的作用。在农业生产中，为了获得高产，不仅要设法提高光合作用形成的生物学产量，而且要通过一定的措施来提高经济学的产量。利用蔗糖转运蛋白来定向的提高经济学的产量，是一种调控库源关系的有效手段。因此，分离、鉴定高等植物蔗糖转运蛋白，并对其功能进行深入研究不仅具有深远的理论意义，而且对提高农作物的经济产量具有重大的实践价值。甜菜是2年生异交草本植物，由于其栽培驯化时间较短，遗传背景狭窄，资源贫乏。特别是自交高度不亲和性，往往使得优良单株基因型很容易丢失，给优良品种选育材料的繁殖和保存带来了不少的困难。因此可以通过植物组织培养为甜菜基因工程育种提供新的途径。目前关于甜菜组织培养的众多研究表明，采取直接器官发生再生植株方式（不经历愈伤组织阶段）获得的再生苗更适合作为转化外源基因的受体植物。

本研究根据蔗糖转运蛋白在糖分积累中的作用，从调控源到库的关系的角度出发，利用分子生物学手段，从拟南芥中分别克隆AtSuc3和AtSuc4基因，从葡萄中分别克隆VvSuc11和VvSuc12基因，并利用甘薯贮藏蛋白基因（sporamin）的根部特异性启动子分别构建相应的单价和双价的植物表达载体：pBI2301-03-S3、pBI2301-03-S12、pBI2301-04-S4、pBI2301-04-S11和pBI2301-03-S3-Q4-S4。甜菜是比较难以再生的植物。本研究通过筛选，成功建立了甜菜（kws9103）叶柄直接再生体系，实验通过种植无菌苗、预培养、诱导分化培养，获得了再生植株，建立了甜菜快速繁殖体系。结果表明：甜菜种子经过消毒处理，其幼苗经MS附加一定量的6-BA和NAA组合的培养基中预培养，再取叶柄作为外植体转入预培养的培养基中诱导不定芽，不定芽诱导率为50％。MS附加一定量的IBA生根培养基，诱导生根率在75％以上，移栽成活率高达95％.种子萌发培养基：（1）1/2 MS。预培养培养基：（2）MS+6-BA0.5mg·L-1（单位下同）+NAA0.05。不定芽诱导培养基：（3）MS+6-BA0.5+NAA0.05。生根培养基

：（4）MS+IBA2.0。将构建好的植物表达载体侵染甜菜进行了初步的遗传转化试验，为进一步研究蔗糖转运蛋白基因在转基因甜菜中调控蔗糖转运功能打下基础。

引证文献(13条)

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8.胡盛安 影响甘薯可溶性蛋白含量的因素[期刊论文]-粮油加工 2007(7)

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