基因工程复习重点(3)

9、什么叫抗药性筛选法、HAT选择法？

幻灯片11

第七章

名词解释：T-Vector T-DNA

1、简述基因克隆的方法有那些？

2、简述鸟枪法克隆目的基因的基本战略。

3、简述鸟枪法克隆目的基因的局限性。

4、简述cDNA法克隆目的基因的基本战略。

5、简述cDNA法克隆目的基因方法之一差异分离程序。

6、简述cDNA法克隆目的基因的局限性。

7、简述PCR克隆目的基因的基本程序。

8、如何设计探针序列？

幻灯片12

9、简述DNA化学合成的用途。

10、简述基因文库的构建程序。

11、如何从基因文库中筛选目的基因？

12、在基因组文库的构建过程中，如何避免外源DNA片段之间的连接？

13、基因组文库重组克隆如何排序？

幻灯片13

第八章

名词解释：包涵体（Inclusion Bodies）

1、什么叫表达载体（Expression vector）？简述作为表达载体应具有的元件有那些？

2、简述一个好的表达系统的标准是什么？

3、简述大肠杆菌作为基因工程受体菌的优缺点。

3、简述作为基因工程宿主必须具备的主要条件

4、简述外源基因在大肠杆菌中进行高效表达应考虑的因素有那些？

5、如何克隆启动子和终止子？

6、核糖体结合位点对外源基因表达有何影响？

7、密码子对外源基因表达有何影响？

幻灯片14

8、简述包涵体（Inclusion Bodies）及其性质，包涵体形成机制。

9、简述以包涵体形式表达目的蛋白的优缺点。

10、如何对包涵体形式表达目的蛋白进行后处理？

11、简述以分泌形式表达目的蛋白的优缺点。

12、简述蛋白质的分泌机制。

13、如何构建分泌型目的蛋白表达系统？

14、简述以融合形式表达目的蛋白的优缺点。

15、融合蛋白表达质粒的构建原则是什么？

16、融合型异源蛋白如何回收？

17、简述以寡聚形式表达目的蛋白的优缺点。

18、如何构建寡聚型目的蛋白表达系统？

幻灯片15

19、简述以整合形式表达目的蛋白的优缺点。