尿中砷的氢化物发生-原子荧光光谱测定法

维普资讯 http://www.77cn.com.cn

1 2 4

中国工业医学杂志 2 O O 4年4月第 1 7卷第 2期

C h i n e s e J I n d M e d A p r 2 O O 4,V o 1 .1 7 N o .2

不干扰。 3 . 9参考值选择7 5名体检合格成年人，男 4 1名，女 3 4名，年龄 2 o~ 6 o岁。空腹静脉采血，用本法测得血清锌含量 (

1 . 0 6×l O s L ( m o l c m)~,虽比 5一 B r - P A D A P自动分析法的灵敏度略有降低，但已完全满足临床应用要求。4 . 2 . 3其他离子的干扰本方法测定血清锌，血清中铁、

±s )为 ( 1 5 . 6 3±3 . 3 2 )t a n o l/ L,参考范围 (±2 s ):8 . 9 9~ 2 2 . 2 7￣ a n o V L。 4讨论 4 . 1本文以水溶性吡啶一偶氮染料 2一( 5一溴一 2一吡啶偶氮 )一 5一 [( N,N一二羧基甲基 )氨基]苯酚 ( 5一 B r - P A D C A P )为显色剂，建立了 5 . B r - P￣单一试剂自动化测定血清锌的新方

钙、镁离子的干扰与 5 - B r - P A D A P法相比有所增加，但铜离子的干扰明显减少。在显色体系中一定浓度的简单、无毒的掩蔽剂存在下，铁、铜、钙、镁的含量少于血清正常含量 3倍量时，对测定结果无影响，血清中其他共存离子正常含量的 1 0倍量对结果也无影响。4 . 3操作时应注意防止铜、锌、铁等微量元素的污染，所用

法。临床应用表明，该法使用微量标本即可进行操作，检测结果与原子吸收法和 5一 B r - P A D A P法有很好的相关性，方法快速、简便。4 . 2与5一 B r - P A D A P￣动分析法的比较

吸管、试管必须经 1 0%盐酸或硝酸浸泡过夜，洗净干燥后备用，使用一次性聚乙烯试管效果更佳；测定的标本应避免溶血，比色杯最好专用，以防交叉污染，尤其是在用双缩脲试剂测定总蛋白后，比色杯和试管壁上吸附有高浓度的 C ,

4 . 2 . 1水溶性

在5一 B r - P A D A P的分子结构中引入水溶性乙羧,染料本身具有良好的水溶性，使用

难以用蒸馏水洗净，易使测定结果偏高。参考文献： [ 1]李东，连国军，方芳，等.血清锌的自动分析法[ J] .临床检验杂志，

2 O O O,1 8( 5 ):2 9 2 .

基团合成的 5 . B r - P应用。

后在比色杯或管道上吸附量极微，适合在自动生化分析仪中 4 . 2 . 2灵敏度用本法测定血清锌，表观摩尔吸收系数为

[ 2 3叶应妩，王毓三 .全国临床检验操作规程[ M] .第 2版.南京：东南大学出版社，1 9 9 7 .2 0 1 . 2 0 2 .

尿中砷的氢化物发生一原子荧光光谱测定法D e t e r mi n a t i o n o f u r ma r y a r s e n i c u s h￣ g HGAF S( h y d r o g e n a i t o n a t o mi c l f u o r e s c e n t s p l e‘= h啊m曲 ) 叶立和，谢勇坚Y E U— h e .X I E Y o n g - j i a n 2

( 1 .东莞市职业病防治中心，广东东莞

5 2 3 0 0 8;2 .肇庆市自来水公司，广东肇庆

5 2 6 0 0 0 )

摘要：采用氢化物发生.原子荧光光谱方法测定尿中砷， 结果表明，线性关系良好 (标准系列溶液 0~5 0 V . g/ L内，相关系数 r为0 . 9 9 9 4以上 ),检出限低 ( 0 . 1 9 1 9 6: 5%~1 0 6 . 6%),是测定尿中砷的理想方法。关键词：尿；砷；氢化物发生；原子荧光光谱

定波长的激发光后被激活，通过能量跃迁，在返回基态时发

出荧光。其荧光强度在一定范围内与砷含量成正比，与标准系列比较定量。 1 . 2主要仪器和试剂

L ),精密度

好 (变异系数 0 . 7 2%~1 . 5 7%),准确度高 (加标回收率

A F S - 2 3 0 a双道原子荧光光度计 (北京万拓仪器有限公

司);计算机系列及砷编码空心阴极灯。实验用水为去离子水或全玻璃蒸馏水，除特别注明外，所用试剂均为优级纯；硝

中图分类号：R 4 4 6 .1 2;0 6 1 3 .6 3

文献标识码：B

文章编号：1 0 0 2—2 2 1 X( 2 0 0 4 ) 0 2—0 1 2 4—0 2‘

酸 (彻=1 . 4 2 g/ m 1 );高氯酸 (彻=1 . 6 7 g/ m 1 );盐酸 ( P∞=

为判断砷化合物接触的水平，测定尿中砷含量是最直接

1 . 1 8 g/ m 1 );消解液，3+1硝酸.

高氯酸 (体积分数);盐酸溶液，5+ 9 5(体积分数);硼氢化钾溶液 ( 1 0 g/ L ): .称取 2 . 5 g氢氧化钾溶于 2 5 0 m l水中，加入 5 . 0 g硼氢化钾溶解，加水至 5 0 0 m l(临用时配 );硫脲 ( 5 0 g/ L )一抗坏血酸 ( 5 o L )溶液：称取5 . 0 g硫脲和 5 . 0 g抗坏血酸，溶于 1 0 0 m l水中 (现配现

有效的方法。目前尿中砷的测定有化学法[ , 】及氢化物发生. 火焰原子吸收光谱法… ( H G A A S )。前者操作繁琐，灵敏度低，后者对操作条件要求较严格。我们采用氢化物发生.原子

荧光光谱法测定尿中砷，结果较为满意，现介绍如下。1材料和方法1 . 1原理

用);砷标准储备液 ( 1 0 0 0 t, e,/ r￣ ),由国家标准物质研究中心提供；砷标准使用液 ( 1 0 t, e,/ r￣):准确吸取一定量的砷标准储备液，用 5% (体积分数 )的盐酸溶液逐级稀释，最后稀释为 1 0 t, e,/ r r a的砷标准使用液；载流，5% (体积分数 )盐酸溶液。

尿样用混合酸消化，以破坏有机物。加入硫脲使五价砷还原成三价砷，再加入硼氢化钾，产生砷化氢，由载气导入

石英炉原子化器中，进行原子化。砷的热原子蒸气吸收了特收稿日期：2 0 O 3一 O 1— 0 6;修回日期：2 0 0 3— 0 7— 0 2 作者简介：叶立和 ( 1 9 6 5一),男，副主任技师，主要从事卫生理化检验工作。

1 . 3采样、运输和保存用塑料瓶收集 1次班后尿，混匀后，尽快测定相对密度。 取2 ol T l l尿，放入 5 ol T l l塑料瓶中，可在室温下尽快运输，于

维普资讯 http://www.77cn.com.cn

中国工业医学杂志

2 O O 4年 4月第 1 7卷第 2期

C h i n e s e J I n d M e d A p r 2 O O 4,V 0 1 .1 7 N o .2

l 2 5

4℃下可保存 2周。分析前要将尿样彻底摇匀。1 . 4分析步骤

浓度范围内的标准系列溶液 6次，线性关系良好，回归方程为Y=1 6 . 1 3 4 x+ 0 . 5 3 7,相关系数 r为0 . 9 9 9 4以上。用仪器连续测定空白溶液 1 5次，取最后 1 1

次的测定结果，统计空白测定的标准偏差 s D,按 D L= 3 S D/ K( D L为检出限， 为校正曲

1 . 4 . 1样品处理

取5 m l尿样于锥形瓶中，加入 2 m l混合

酸，置电热板上，在较低温度下加热消化至溶液澄清或白色残渣，冒尽白烟，冷却后，用盐酸溶液溶解，定量转移到 2 5 n l l比色管中，加 2 . 5 m l硫脲一抗坏血酸溶液，并用盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，放置 1 5 m i n后测定。同时取 5 m l蒸馏水同

线斜率 )的计算方法，计算出最低检出限为 0 . 1 9 1 p g/ L。在最佳仪器工作条件下测定砷标准系列，当浓度高于 2 O O p g/ L时，

标准曲线出现弯曲，其线性范围为 0 . 1 9 1—2 O O p g/ L。当样品 溶液浓度高时，应对溶液稀释后进行测定，但必须保持终末溶液条件一致。 2 . 2精密度分别对 1 0 . 0 0、3 0 . 0 0、 5 0 . 0 0 p g/ L低、中、高 3种浓度加

上操作，作空白对照。 1 . 4 . 2工作曲线溶液的制备取6只锥形瓶，各加入正常人尿5 m l,分别加入砷标准使用液 0 . 0、2 5 . 0、5 0 . 0、7 5 . 0、

1 0 0 . 0、1 2 5 . 0 ,按样品处理操作，分别配成砷浓度为 0 . 0、1 0 . 0、2 0 . 0、3 0 . 0、4 0 . 0、5 0 . 0 L的标准系列溶液。

标样进行 6次重复测定，根据不同测定次数的测定值计算变异系数分别为 1 . 3 7%、1 . 0 2%、0 . 7 2%。2 . 3准确度

1 . 4 . 3仪器工作条件灯电流6 0 m A,光电倍增管负高压 2 5 0V,原子化器高度 8 . 0 I T l r f l,原子化温度 2 0 0 c c,载气流速 3 0 0 m l/ m i n,屏蔽气流速 8 0 0 m l/ m i n,读数时间 1 2 s,延迟时间 1 s,测定方法为标准曲线法，积分方式为峰面积。断续流动设置 (自动测量 ),见表 l。 表 1断续流动自动设置

取3份样品加标 (加标量 1 0 . 0 0、3 0 . 0 0、5 0 . 0 0 p g/ L ),回 收率分别为 9 6 . 5%、 9 8 . 7%、1 0 6 . 6%。2 . 4干扰及消除

试验

表明，加入硫脲一抗坏血酸后测 A s,各种干扰离子浓度 ( p g/ L )在 A g( 1 0 )、H g( 1 0 )、s n( 1 0 0 0 )、P d( 3 O O 0 )、T e( 1 0 0 0 )、B i( 2 O O O )、N i( 2 O O O)、s b( 2 5 O O)、S e( 5 O O O )、C u

( 3 O O O O )、其他元素 ( K、N a、C a、M g、Z r I、F e、P b、C o、s r、注：输入样品参数及标准系列浓度后，预热 2 o m岫 .。

C d、L i、M n等 )( 5 X l o s )时不产生干扰。 2 . 5样品测定结果及与 H G A A S的比较经对 1 6份尿样分别用本法和 H G A A S法进行测定，其中正常人群尿样 8份，尿砷浓度为 1 . 6 4—3 6 . 6 4 p g/ L,职业接触工人尿样 8份，尿砷浓度为 4 4 . 8 6—1 6 8 . 3 8 p g/ L,经 t检验分析， 。 t=1 . 6 3 8,P> 0 . 1 0,两种方法测定结果差异无显著性。参考文献：[ 1]线引林 .生物材料中有毒物质分析方法手册[ M] .北京；人民卫生出版社，1 9 9 4 .1 9 8 . 2 0 9 .

1 . 4 . 4测定1 . 4 . 5计算

将配好的样品、空白对照及标准系列溶液分别= 5 C

倒入样品管中，按上述条件进行测定，输出检验报告。式中： ——尿中砷的浓度，p g/ L;5——尿样稀释倍数； c——由工作曲线查得的砷溶液的浓度，p g/ L; ——尿样换算成标准密度下的浓度校正系数。2结果与讨论

2 . 1标准曲线、最低检出限及线性范围按本方法给定条件，在不同时间内测定 0 . 0 0 5 0 . 0 0 p g/ L

[ 2]徐伯洪 .作业场所空气和生物材料检测推荐方法[ M] .北京：人民卫生出版社，1 9 9 6 .2 7 7 . 2 8 0 .

血清硒流动注射氢化物发生器一原子吸收测定法De t e r mi n a t i o n o f s e r u m s e l e n i u m b y I, I GA A S( h y d r o g e n a t i o n a t o mi c a h s o r p t i o n s p e c m mm r y )w i t h l f o w.岫i e c t j o n

姜禾，唐玉

海J I AN G He ,T ANG Yu - h a i 2

( 1 .沈阳市第三人民医院，辽宁沈阳

1 1 0 0 1 3; 2 .辽宁省 l临床检验中心，辽宁沈阳

1 1 0 0 0 6 )

摘要：采用流动注射氢化物发生器与原子吸收分光光度

文章编号：l t g￣ 2—2 2 1 X( 2 0 0 4 ) 0 2—0 1 2 5—0 2

计联用方法，对血清硒进行测定。结果表明，该方法样品用 量小、操作简单、重现性好，适于临床定量测定。 关键词：硒；血清；流动注射技术中图分类号：R 4 4 6.1 1;0 6 1 3.5 2 文献标识码：B

血清硒是临床分析诊断克山病、胃肠病、紫斑病等疾病

发生原因的重要检验指标之一【。人体内血清硒的正常含量范围很小，准确测定难度较大。目前国内外主要采用间歇式氢化物发生原子吸收分光光度法测定样品中的硒含量[,但

收稿日期：2 0 0 3—1 2—1 6;修回日期：2 O 0 4—0 2—1 2

作者简介：姜禾 ( 1 9 6 3一),男，主管检验师，从事临床检验工作。

此法试剂、样品耗量大。本文采用流动注射技术，流动注射氢化物发生器与原子吸收分光光度计联用，对血清硒进行测