第三版现代分子生物学课后习题集及答案 朱玉贤
<<现代分子生物学>>课后习题答案(第三版朱玉贤)
(共 10 章)
第一章 绪论 1. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的? 2. 分子生物学研究内容有哪些方面? 3. 分子生物学发展前景如何? 4. 人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么? 答案: 1. 分子生物学是从分子水平研究生命本质的一门新兴边缘学科, 它以核酸和蛋白质等生物大 分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象, 是当前生命科学中发展最 快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。 狭义:偏重 于核酸的分子生物学,主 要研究基因或 DNA 的复制、转录、 达和调节控制等过程,其 中也涉及与这些过程有关的 蛋白质和酶的结构与功能的研究。 分子生物学的发展为人类认识生 命现象带来了前所未有的 机会, 也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。 所谓在分 子水平上研究生命的本质 主要是指对遗传、 生殖、 生长和发育等生命基本特征的分子机理 的阐明,从而为利用和改 造生物奠定理论基础和提供新的手段。 这里的分子水平指的是那些 携带遗传信息的核酸和在 遗传信息传递及细胞内、 细胞间通讯过程中发挥着重要作用的蛋白 质等生物大分子。这些生 物大分子均具有较大的分子量, 由简单的小分子核苷酸或氨基酸排 列组合以蕴藏各种信息, 并且具有复杂的空间结构以形成精确的相互作用系统, 由此构成生 物的多样化和生物个体精 确的生长发育和代谢调节控制系统。 阐明这些复杂的结构及结构与 功能的关系是分子生物学 的主要任务。 2. 分子生物学主要包含以下三部分研究内容:A.核酸的分子生物 学,核酸的分子生物学研究 核酸的结构及其功能。由于核酸的主要作用是携带和传递遗传信 息,因此分子遗传学 (moleculargenetics)是其主要组成部分。由于 50 年代以来的 迅速发展,该领域已形成了比 较完整的理论体系和研究技术, 是目前分子生物学内容最丰富的一 个领域。研究内容包括核 酸/基因组的结构、遗传信息的复制、转录与翻译,核酸存储的信 息修复与突变,基因 达 调控和基因工程技术的发展和应用等。遗传信息传递的中心法则 (centraldogma)是其理论 体系的核心。 B.蛋白质的分子生物学蛋白质的分子生物学研究执行各种生命功 能的主要大分子——蛋白 质的结构与功能。 尽管人类对蛋白质的研究比对核酸研究的历史要 长得多,但由于其研究难 度较大, 与核酸分子生物学相比发展较慢。 近年来虽然在认识蛋白 质的结构及其与功能关系 方面取得了一些进展, 但是对其基本规律的认识尚缺乏突破性的进 展。 3. 21 世纪是生命科学世纪,生物经济时代,分子生物学将取得 突飞猛进的发展,结构基因 组学、功能基因组学、蛋白质组学、生物信息学、信号跨膜转导成 为新的热门领域,将在农 业、工业、医药卫生领域带来新的变革。
4. 社会意义: 人类基因组计划与曼哈顿原子计划、 阿波罗登月计划并称为人类科 学史上的三大工程,具有 重大科学意义、经济效益和社会效益。 1) .极大地促进生命科学领域一系列基础研究的发展, 阐明基因的 结构与功能关系、生命的 起源和进化、细胞发育、生产、分化的分子机理,疾病发生的机理 等,为人类自身疾病的诊 断和治疗提供依据,为医药产业带来翻天覆地的变化; 2) .促进生命科学与信息科学、 材料科学和与高新技术产业相结合, 刺激相关学科与技术领 域的发展,带动起一批新兴的高技术产业; 3).基因组研究中发展起来的技术、数据库及生物学资源,还将推 动对农业、畜牧业(转基 因动、植物) 、能源、环境等相关产业的发展,改变人类社会生产、 生活和环境的面貌,把 人类带入更佳的生存状态。 科学意义: 1).确定人类基因组中约 5 万个编码基因的序列基因在基因组中 的物理位置,研究基因的产 物及其功能 2) .了解转录和剪接调控
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元件的结构和位置, 从整个基因组结构的 宏观水平上了解基因转录 与转录后调节 3) .从总体上了解染色体结构, 了解各种不同序列在形成染色体结 构、DNA 复制、基因转录 及 达调控中的影响与作用 4).研究空间结构对基因调节的作用 5).发现与 DNA 复制、重组等有关的序列 6).研究 DNA 突变、重排和染色体断裂等,了解疾病的分子机制, 为疾病的诊断、预防和 治疗提供理论依据 7).确定人类基因组中转座子,逆转座子和病毒残余序列,研究其 周围序列的性质 8).研究染色体和个体之间的多态性 第二章 核酸结构与功能 一、填空题 1.病毒 X174 及 M13 的遗传物质都是 2.AIDS 病毒的遗传物质是 。 。
3.X 射 分析证明一个完整的 DNA 螺旋延伸长度为 4. 键负责维持 A-T 间(或 G-C 间)的亲和力 5.天然存在的 DNA 分子形式为右手 二、选择题(单选或多选) 型螺旋。 。 1. 证明 DNA 是遗传物质的两个关键性实验是: 肺炎球菌在老鼠体 内的毒性和 T2 噬菌体感 染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是( ) 。 A.从被感染的生物体内重新分离得到 DNA 作为疾病的致病剂 B.DNA 突变导致毒性丧失 C.生物体吸收的外源 DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能 D.DNA 是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的 分子 E.真核心生物、原核生物、病毒的 DNA 能相互混合并彼此替代 2.1953 年 Watson 和 Crick 提出( ) 。 A.多核苷酸 DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋 B.DNA 的复制是半保留的,常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C.三个连续的核苷酸代 一个遗传密码 D.遗传物质通常是 DNA 而非 RNA E.分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3.DNA 双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键,并因此改 变了它们的光吸收特性。 以下哪些是对 DNA 的解链温度的正确描述?( ) A. 哺乳动物 DNA 约为 45℃, 因此发烧时体温高于 42℃是十分危 险的 B.依赖于 A-T 含量,因为 A-T 含量越高则双链分开所需要的能 量越少 C.是双链 DNA 中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值
D.可通过碱基在 260nm 的特征吸收峰的改变来确定 E.就是单链发生断裂(磷酸二酯键断裂)时的温度 4.DNA 的变性( ) 。A.包括双螺旋的解链 B.可以由低温产生 C.是可逆的 D.是磷酸二酯键的断裂 E.包 括氢键的断裂 5. 在类似 RNA 这样的单链核酸所 现出的"二级结构"中, 发夹 结构的形成( ) 。 A.基于各个片段间的互补,形成反向平行双螺旋 B. 依赖于 A-U 含量, 因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的 能量也越少 C.仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生 D.同样包括有像 G-U 这样的不规则碱基配对 E.允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基 6.DNA 分子中的超螺旋( ) 。 A 仅发生于环状 DNA 中。 如果双螺旋在围绕其自身的轴缠绕后 (即 增加缠绕数)才闭合, 则双螺旋在扭转力的作用下,处于静止 B. 在 性和环状 DNA 中均有发生。 缠绕数的增加可被碱基配对 的改变和氢键的增加所抑 制 C. 可在一个闭合的 DNA 分子中形成一个左手双螺旋。 负超螺旋是 DNA 修饰的前提,为酶 接触 DNA 提供了条件 D.是真核生物 DNA 有比分裂过程中固缩的原因 E.是双螺旋中一条链绕另一条链的旋转数和双螺旋轴的回转数的 总和 7.DNA 在 10nm 纤丝中压缩多少倍?( )A.6 倍
B.10 倍 C.40 倍 D.240 倍 E.1000 倍 8.下列哪一条适用于同源染色单体?( ) A.有共同的着丝粒 C.有丝分列后期彼此分开 B.遗传一致性 D.两者都按照同样的顺序,分布着相同的基因,但可具有不同的 等位基因 E.以上描述中,有不止一种特性适用同源染色单体 9. DNA 在 30nm 纤丝中压缩多少倍?( )A.6 倍 B.10 倍 C.40 倍 D.240 倍 E.1000 倍 10. DNA 在染色体的常染色质区压缩多少倍? ( E ) 6 倍 B. A. 10 倍
C.40 倍 D.240 倍 E.1000 倍 11.DNA 在中期染色体中压缩多少倍?( F )A.6 倍 B.10 倍 C.40 倍 D.240 倍 E.10000 倍 12.分裂间期的早期,DNA 处于( )状态。A.单体连续的 性双螺旋分子 B.半保留 复制的双螺旋结构 C.保留复制的双螺旋结构 D.单链 DNA E.以 上都不正确 13. 分裂间期 S 期, DNA 处于 ( ) 状态。 单体连续的 A. 性 双螺旋分子 B.半保留复 制的双螺旋结构 C.保留复制的双螺旋结构 D.单链 DNA E.以
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上 都不正确 三、判断题 1. 在高盐和低温条件下由 DNA 单链杂交形成的双螺旋 现出几 乎完全的互补性,这一过程可 看作是一个复性(退火)反应。 () 2.单个核苷酸通过磷酸二酯键连接到 DNA 骨架上。( ) 3.DNA 分子整体都具有强的负电性,因此没有极性。 ( ) 4.在核酸双螺旋(如 DNA)中形成发夹环结构的频率比单链分子 低。发夹结构的产生需要回 文序列使双链形成对称的发夹,呈十字结构。( ) 5.病毒的遗传因子可包括 1-300 个基因。与生命有机体不同,病 毒的遗传因子可能是 DNA 或 RNA, (但不可能同时兼有! )因此 DNA 不是完全通用的遗传物质。 ( ) 6.一段长度 100bp 的 DNA,具有 4100 种可能的序列组合形式。 ( ) 7.C t 0 1/2 8.C t 0 1/2 与基因组大小相关。( ) 与基因组复杂性相关。( ) 9.非组蛋白染色体蛋白负责 30nm 纤丝高度有序的压缩。( )
10. 因为组蛋白 H4 在所有物种中都是一样的, 可以预期该蛋白质 基因在不同物种中也是一样 的。 ( ) (不同物种组蛋白 H4 基因的核苷酸序列变化很大, ) 四、简答题 1.碱基对间在生化和信息方面有什么区别? 2.在何种情况下有可能预测某一给定的核苷酸链中"G"的百分含 量? 3.真核基因组的哪些参数影响 C t 0 1/2 值? 4.哪些条件可促使 DNA 复性(退火)? 5.为什么 DNA 双螺旋中维持特定的沟很重要? 6.大肠杆菌染色体的分子质量大约是 2.5×10 9Da,核苷酸的平 均分子质量是 330Da,两个邻 近核苷酸对之间的距离是 0.34nm, 双螺旋每一转的高度 (即螺距) 是 3.4nm,请问: ( 1)该分子有多长? ( 2)该 DNA 有多少转? 7.曾经有一段时间认为,DNA 无论来源如何,都是 4 个核苷酸的 规则重复排列(如 ATCG、 ATCG、 ATCG、 ATCG) 所以 DNA 缺乏作为遗传物质的特异性。 , 第一个直接推 翻该四核苷酸定理的证据是什么? 8.为什么在 DNA 中通常只发现 A-T 和 C-G 碱基配对? 9.为什么只有 DNA 适合作为遗传物质? 答案:
一、 填空 1. 单链 DNA 2. 单链 RNA 3. 3.4nm 4. 氢 5. B 二、1.C 2. A 3.CD 4. ACE 5. AD 6 ACE 7 A 8 D 9 C 10.E 11. E 12 A 13.B 三、XX X 四、简答 1. 答:从化学角度看,不同的核苷酸仅是含氮碱基的差别。 从信息方面看,储存在 DNA 中的信息是指碱基的顺序,而碱基不 参与核苷酸之间的共价连 接,因此储存在 DNA 的信息不会影响分子结构,来自突变或重组 的信息改变也不会破坏分 子。 2. 答: 由于在 DNA 分子中互补碱基的含量相同的, 因此只有在双 链中 G+C 的百分比可知时, G%=(G+C)%/2 3. 答:C t 0 1/2 值受基因组大小和基因组中重复 DNA 的类型和总数影响。 4. 答:降低温度、pH 和增加盐浓度。 5. 答:形成沟状结构是 DNA 与蛋白质相互作用所必需。 6. 答:1 碱基=330Da,1 碱基对=660Da 碱基对=2.5×10 9/660=3.8×10 6 kb 染色体 DNA 的长度=3.8×10
6/0.34=1.3×10 6nm=1.3mm 答:转数=3.8×10 6×0.34/3.4=3.8×105 7. 答:在 1949-1951 年间,E Chargaff 发现: ( 1)不同来源的 DNA 的碱基组成变化极大 ( 2) 和 T、 和 G 的总量几乎是相等的 A C (即 Chargaff 规则) ( 3)虽然(A+G)/(C+T)=1,但(A+T)/(G+C)的比值在各 种生物之间变化极大 8. 答: (1)C-A 配对过于庞大而不能存在于双螺旋中;G-T 碱基 对太小,核苷酸间的空间 空隙太大无法形成氢键。 ( 2)A 和 T 通常形成两个氢键,而 C 和 G 可形成三个氢键。 正常情况下,可形成两个氢键 的碱基不与可形成三个氢键的碱基配对。 9. 答:是磷酸二酯键连接的简单核苷酸多聚体,其双链结构保证 了依赖于模板合成的准确性, DNA 的以遗传密码的形式编码多肽和蛋白质, 其编码形式多样而复 杂 第三章 基因与基因组结构 一、填空题 1.在许多人肿瘤细胞内, 基因的异常活化似乎与细胞的无限分裂能力有关。 2.包装为核小体可将裸露 DNA 压缩的 倍。 3.哺乳动物及其他一些高等动物的端粒含有同一重复序列,即 4.细胞主要在 达基因,此时染色体结构松散。 。 5.在所有细胞中都维持异染色质状态的染色体区,称为 异染色质。 6. 在分裂间期呈现着色较深的异染色质状态的失活 X 染色体, 也 叫作 7.果蝇唾液腺内的巨大染色体叫作 。 ,由众多同样的染色质平行排列而成。 8. 一般说来, 哺乳动物 粒体与高等植物叶绿体的基因组相比, 9.原生动物四膜虫的单个 粒体称作 二、
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选择题(单选或多选) 。 更大些。 1.多态性(可通过 型或 DNA 分析检测到)是指( ) 。
A.在一个单克隆的纯化菌落培养物中存在不同的等位基因 B.一个物种种群中存在至少 2 个不同的等位基因 C.一个物种种群中存在至少 3 个不同的等位基因 D.一个物基因影响了一种 型的两个或更多相关方面的情况 E.一个细胞含有的两套以上的单倍体等位基因
2.真核基因经常被断开( ) 。 A.反映了真核生物的 mRNA 是多顺反子 B.因为编码序列外显子被非编码序列内含子所分隔 C. 因为真核生物的 DNA 为 性而且被分开在各个染色体上, 所 以同一个基因的不同部分 可能分布于不同的染色体上 D. 明初始转录产物必须被加工后才可被翻译 E. 明真核基因可能有多种 达产物, 因为它有可能在 mRNA 加工的过程中采用不同的外 显子重组方式 3.下面叙述哪些是正确的?( ) A.C 值与生物的形态复杂性呈正相关 B.C 值与生物的形态复杂性呈负相关 C.每个门的最小 C 值与生物的形态复杂性是大致相关的 4.选出下列所有正确的叙述。 ( ) A.外显子以相同顺序存在于基因组和 cDNA 中 B.内含子 经常可以被翻译 C.人体内所有的细胞具有相同的一套基因 因 D.人体内所有的细胞 达相同的一套基 E.人体内所有的细胞以相同的方式剪接每个基因的 mRNA 5.两种不同的酵母菌株进行杂交,经由营养生长阶段可形成大量 二倍体细胞。如果用于检 测的标记基因来自亲本双方, 那么经过几代营养生长后, 二倍体细 胞内( A.含有来自单个亲本的 粒体基因标记 B.所有细胞克隆都含有来自双方亲本的核基因标记 C.可观察到来自单个亲本的核基因标记以及 粒体标记 D.A 与 B 正确
6.下列关于酵母和哺乳动物的陈述哪些是正确的?( ) ) 。 A.大多数酵母基因没有内含子,而大多数哺乳动物基因有许多内 含子 B.酵母基因组的大部分基因比哺乳动物基因组的大部分基因小 C.大多数酵母蛋白质比哺乳动物相应的蛋白质小 D.尽管酵母基因比哺乳动物基因小,但大多数酵母蛋白质与哺乳 动物相应的蛋白质大小大 致相同 7. 下列哪些基因组特性随生物的复杂程度增加而上升? ( ) A.基因组大小 B.基因数量 C.基因组中基因的密度 D.单个基 因的平均大小 8.以下关于假基因的陈述哪些是正确的?( A.它们含有终止子 C.它们不被翻译 失活 ) B.它们不被转录 D.它们可能因上述任一种原因而 E.它们会由于缺失或其他机制最终从基因组中消失 F.它们能进化为具有不同功能的新基因 9.假基因是由于不均等交换后,其中一个 贝失活导致的。选 出下面关于此过程的正确叙 述。 ( ) A.失活点可通过比较沉默位点变化的数量和置换位点变化的数量 来确定 B.如果假基因是在基因复制后立即失活,则它在置换位点比沉默 位点有更多的变化 C.如果假基因是在基因复制后经过相当长一段时间后才失活,则 它在置换位点与沉默位点 有相同数量的变化 10.下列哪些基因以典型的串联形式存在于真核生物基因组?( A.珠蛋白基因 B.组蛋白基因 C.rRNA 基因 D.肌动蛋白基因 11.根据外显子改组(exon shuffling)假说( A.蛋白质的功能性结构域由单个外显子编码 ) 。 ) B. DNA 重组使内含子以一种新的方式结合在一起时, 当 新基因就 产生了 C. DNA 重组使外显子以一种新的方式结合在一起时, 当 新基因就 产生了 D.因为一些新的功能(蛋白质)能通过外显子的不同组合装配产 生,而不是从头产生新功 能,所以进化速度得以加快
12.简单序列 DNA( ) 。 A.与 Cot1/2 曲 的中间成分复性 B.由散布于基因组中各个短的重复序列组成 C.约占哺乳类基因组的 10% D.根据其核苷酸组成有特异的浮力密度 E.在细胞周期的所有时期都 达 13.原位杂交( ) 。 A. 是一种标记 DNA 与整个染色体杂交并且发生杂交的区域可通过 显微观察的技术 B. 明卫星 DNA 散布于染色体的常染色质区 C.揭示卫星 DNA 位于染色体着丝粒处 14.非均等交换( ) 。 A.发生在同一染色体内 B.产生非交互重组染色体 C.改变了基因组织形式,未改变基因的总数 D.在染色 体不正常配对时发生 E.降低一个基因簇的基因数,同时增加另一个基因簇的基因数
15.微卫星重复序列( ) 。 A.每一簇含的重复序列的数目比卫星重复的少 B.有一个 10-15(2-6)个核苷酸的核心重复序列 C.在群体的个体间重复簇的大小经常发生变化 D.在
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DNA 重组 时,不具有活性 16.细胞器 DNA 能够编码下列哪几种基因产物?( 小亚基 rRNA
D.tRNA E.4.5S rRNA F.5S rRNA 17.典型的叶绿体基因组有多大?( A.1.5kb B.15kb
C.150kb D.1500kb 18.细胞器基因组( ) 。 ) )A.mRNA B.大亚基 rRNA C. A.是环状的 B.分为多个染色体 C.含有大量短的重复 DNA 序列 19.叶绿体基因组含( ) 。
A.两个大的反向重复 B.两个大的单一序列 DNA C.两个短的单 一序列 DNA 20.酵母 粒体基因组( ) 。 A.编码的基因数目与人 粒体基因组编码的基因数目大致相同 B.大小与人 粒体基因组大小大致相同 C.含有许多内含子,其中有些能编码蛋白质 D.含有 AT 丰富区 E.有几个功能未明的区域 21.在人类 粒体基因组中( ) 。 A.几乎所有的 DNA 都用于编码基因产物 B.几乎所有编码蛋白质的基因都从不同的方向进行转录 C.产生惟一一个大的转录物,然后剪接加工,释放出各种 RNA 分 子 D.大多数编码蛋白质的基因被 tRNA 基因分隔开 22.酵母的小菌落突变( A.已失去全部 粒体的功能 ) 。 B.总是致死的 C. 由编码 粒体蛋白质的细胞核基因突变引起 D. 由 粒体 基因组丢失或重排引起 23 . 当 细 胞 丧 失 端 粒 酶 活 性 后 , 不 会 出 现 以 下 哪 种 情 形 ? ( )
A.随着细胞每次分裂,端粒逐渐缩短 C.免疫系统逐步丧失某些防御机制 24.以重量计,染色质的组成大致为( A.1/3DNA,1/3 组蛋白,1/3 非组蛋白 B.分裂 30-50 次后,出现衰老迹象并死亡 D.大量体细胞具有了无限分裂的能力 ) 。 B.1/3DNA,1/3 组蛋白
C.1/3DNA,1/3 组蛋白,1/3 碱性蛋白质 D.1/4DNA,1/4RNA, 1/4 组蛋白,1/4 非组蛋白 25.染色质非组蛋白的功能不包括( ) 。 A.结构 B.复制 C.染色体分离 D.核小体包装 26.一个复制的染色体中,两个染色质必须在( )期间彼此分离。 A.有丝分裂 B.减数分裂 I C.减数分裂 II D.A 与 B E.A 与 C 27.以下关于酵母人工染色体(YAC)在细胞分裂过程中发生分离 错误的描述,正确的是( ) 。 A.11 000bp 的 YAC 将产生 50%的错误 C.长于 100 000bp 的 YAC 产生 0.3%的错误 28.DNA 酶超敏感(DH)位点多数存在于( 核小体区 C.临近组蛋白丰富区 D.以上都对 B.55 000bp 的 YAC 将产生 1.5%的错误 D.以上都对 ) 。A.该细胞转录基因的 5'区 B.临近 29.叶绿体中参与光合作用的分子( A.全部由叶绿体基因编码 C.全部由核基因编码 ) 。 B.部分由叶绿体基因编码,其他由核基因编码 D.部分由核基因编码,其他由 粒体基因编码 30.关于细胞器基因组的描述不正确的是( ) 。 A. 粒体 DNA 及叶绿体 DNA 通常与组蛋白包装成染色体结构 B. 粒体基因的翻译通常可被抗生素(如氯霉素)抑制 C.与细菌类似, 粒体翻译过程中利用 N-甲酰甲硫氨酸以及 tRNAfmet D.以上描述都正确 31.分子生物学检测证实:DNA 序列可在( )之间转移。 A. 粒体 DNA 与核 DNA B.叶绿体 DNA 与 粒体 DNA C.不 同的叶绿体分子 D.以上 都对 32. 两种不同的酵母菌株进行杂交, 经由营养生长阶段可形成大量 二倍体细胞。如果用于检 测的标记基因来自亲本双方, 那么下列哪个结果可在交配后短时间 内就能观察到?( ) 。 A.细胞内含有来自两个亲本的 粒体基因标记 B.细胞内含有来自两个亲本的核基因标记 C.来自两个亲本的核基因标记以及 粒体基因标记都存在 D.只含有单个亲本来源的核基因标记以及 粒体基本标记 三、判断题 1.水蜥的基因组比人的基因组大。 ( ) 2.高等真核生物的大部分 DNA 是不编码蛋白质的。 ( ) 3.假基因通常与它们相似的基因位于相同的染色体上。 ( ) 4.在有丝分裂中,端粒对于染色体的正确分离是必要的。 ( ) 5.大多数持家基因编码低丰度的 mRNA。 ) ( 6.所有真核生物的基因都是通过对转录起始的控制进行调控的。 ( )
7.所有高等真核生物的启动子中都有 TATA 框结构。 ( ) 8.只有活性染色质转录的基因对 DNase I 敏感。 ) ( 9.内含子通常可以在相关基因的同一位置发现。 ( ) 10.40%以上的果蝇基因组是由简单的 7bp 序列重复数百万次组 成。 ( ) 11.卫星 DNA 在强选择压力下存在。 ( ) 12. 组蛋白在进化过程中的保守性 明其维持染色质结构的重要 功能。 ( ) 13.复制完整染色体时,如果没有引物存在,DNA 聚合酶将不能起 始 5'端
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的复制。 ) ( 14.如果移去一段 DNA 将会干扰染色体的分离,而重新插入这段 序列又可恢复染色体分离 的稳定性,则该 DNA 序列一定位于着丝粒之外。 ( ) 15. 酵母 粒体基因组较人 粒体的基因组大, 并且编码带有 内含子的基因。 ( ) 16.植物 粒体基因组比动物 粒体基因组小。 ( ) 17. 粒体 DNA 的突变频率较核内的 DNA 高 10 倍。 ) ( 四、简答题 1.比较基因组的大小和基因组复杂性的不同。 一个基因组有两个序列,一个是 A,另一个是 B,各有 2000bp, 其中一个是由 400bp 的序列 重复 5 次而成, 另一个则由 50bp 的序列重复 40 次而成的, 问: (1)这个基因组的大小怎 样? ( 2)这个基因组的复杂性如何? 2.一个基因如何产生两种不同类型的 mRNA 分子? 3.在一个克隆基因的分析中发现:一个含有转录位点上游 3.8kb DNA 的克隆,其 mRNA 直 接转录活性比仅含有 3.1kb 上游 DNA 克隆的转录活性大 50 倍。 这 明了什么? 4.被加工的假基因与其他假基因有哪些不同?它是如何产生的? 5.非转录间隔区与转录间隔区分别位于 rRNA 重复的什么位置? 转录间隔区与内含子有何 区别? 6.RNA 分子能被运到细胞器中吗? 7.什么证据 明细胞器与原核生物的关系比细胞器与真核生物 的关系密切? 8.酵母 rho-小菌落突变株的 粒体 DNA 发生了什么变化? 9. 为什么动物中 粒体 DNA 进化的速率, 几乎是核 DNA 的 10 倍? 10.为什么研究者认为某些植物的 COX II 基因是经由 RNA 的过 渡,从 粒体转移到了核基 因组中? 11.请描述 C 值矛盾,并举一个例子说明。 12. 酵母 mRNA 的大小一般与基因的大小相一致, 而哺乳动物 mRNA 比对应的基因明显小。 为什么? 13. 在一个基因复制后, 外显子发生突变的概率比内含子小。 但是, 所有 DNA 的突变率是 相同的。请解释原因。 14.跳跃复制的结果是什么?
15.重复序列并不是在选择压力下存在,因此能快速积累突变。这 些特性 明重复序列相互 间应存在很大的不同,但事实并不是这样的。请举例说明。 16. 哪些细胞器带有自身的基因组?为什么这些细胞器带有自身的 基因组? 17. 粒体 DNA 的突变率与细胞核 DNA 突变率有什么不同?为 什么? 18.人 粒体 DNA 的哪些特征 明了其基因组的组织方式具 有经济性? 19.20 世纪 70 年代提出的"内共生假说",现已被接受为一种理 论。有哪些分子生物学证 据有力支持了该理论? 答案 填空 1.端粒酶 2.7 3. TTAGGG 4. 分裂间期 5.组成型 6.巴氏小 体 7. 多 染色体 8.叶绿体 9.动 粒 二、选择 1.C 2.BDE 3.C
4.AC 5.D 6.ABD 7.ABD 8.DEF 9.A 10.BC 11.ACD 12.CD 13.AC 14.BCDE 15.ABC 16.ABCDEF
17.C 18.A 19.A 20.ACDE 21.ACD 22.ACD 23.D 24.A 25.D 26.E 27.D 28.A 29.B 30.A 31.D
32.C 三、判断 XX XXX XX X 四、简答 1. 答: 基因组的大小是指在基因组中 DNA 的总量。 复杂性是指基 因组中所有单一序列的总 长度。 ( 1)基因组的大小是 4000 bp ( 2)基因组的复杂性是 450 bp 2. 答: 第一种是, 一个原初产物含有一个以上的多聚腺苷化位点, 能产生具不同 3'端的 mRNA。 第二种是, 如果一个原初转录产物含有几个外显子, 发生不同的剪 接,产生多种 mRNA。 3. 答:在转录起始位点上游的 3.1-3.8kb 处有一增强子。 4.答:已加工过的假基因具有明显的 RNA 加工反应的印迹。如缺 少内含子,有些在 3'端已 经经过加工。 推测已加工过的假基因是在基因转录成前体 mRNA、RNA 加工后, 又经反转录形成 DNA, 再将反转录出的 DNA 重新整合进基因组。 5. 答: rRNA 的非转录间隔区位于串联转录单位之间, 而转录间隔 区位于转录单位的 18S RNA 基因与 28S RNA 基因之间。 6. 答:一般来说只有蛋白质才能被输入。但在锥虫 粒体基因 组中没有发现 tRNA 7. 答:细胞器蛋白质合成对抗生素的敏感性与原核生物相似。此 外,细胞器核糖体蛋白和 RNA 聚合酶亚基也与大肠杆菌中的同源 8. 答: rho-酵母 粒体基因组具有大量的缺失和重复。剩 余的 DNA 通过扩增形成多 贝。 9. 答: 因为 粒体 DNA 复制过程中存在更多的错配, 并且其修 复机制的效率更低。 10. 答: 粒体内发现的 COX II 假基因含有一内含子,而核基 因组内的 COX II 基因已缺失 了内含子。 11. 答:C 值矛盾是真核生物单倍体组 DNA 总量与编码基因信息 DNA 总量差异大。对高等 真核生物而言,
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生物体基因组的大小与其复杂性没有直接关系。 亲 缘关系相近的生物 DNA 含量可能差异很大。如一些两栖动物比其它两栖动物的 DNA 相差 100 倍。 12. 答:大部分基因含有内含子。 13. 答: 外显子发生突变使功能丧失而个体被淘汰, 因此外显子受 选择压力的作用。 14. 答:产生串联的 DNA 序列。 15. 答:如卫星 DNA 的同源性是通过固定的交换来维持,它们通 过不均等交换导致其中一个 重复单元的增加和另一个单元的消失。 16. 答: 粒体和叶绿体。 因为这两种细胞器具有不同于细胞质 的独特的胞内环境。 17. 答: 在哺乳动中, 粒体 DNA 的突变率比细胞核 DNA 的突 变率高,但在植物中, 粒 体 DNA 的突变率比细胞核 DNA 的突变率低。 粒体采用不同于 细胞核的 DNA 聚合酶和 DNA 修复体系。 18. 答:基因组小,基因直接相连甚至重叠,仅出现一个启动子, 一些基因甚至不包括终止 密码。 19. 答: (1) 粒体与叶绿体具有自身的基因组,并独立核基因 组进行复制; ( 2)类似于原核 DNA, 粒体与叶绿体基因组不组装为核销 小体结构; ( 3) 粒体基因利用甲酰甲硫氨酸作为起始氨基酸; ( 4)一些抑制细菌蛋白质翻译成的物质也抑制 粒体中蛋白 质的翻译过程。 第 4 章 DNA 复制 一、填空题 1.在 DNA 合成中负责复制和修复的酶是 2.染色体中参与复制的活性区呈 Y 开结构,称为 。 。 3.在 DNA 复制和修复过程中,修补 DNA 螺旋上缺口的酶称为 4.在 DNA 复制过程中,连续合成的子链称为 ,另一 条非连续合成的子链称为 。 5.如果 DNA 聚合酶把一个不正确的核苷酸加到 3′端,一个含 3′5′活性的独立催化区会将这个 错配碱基切去。这个催化区称为
6.DNA 后随链合成的起始要一段短的 酶。 ,它是由 以核糖核苷酸为底物合成的。 7.复制叉上 DNA 双螺旋的解旋作用由 DNA 链单向移动。 8.帮助 DNA 解旋的 催化的,它利用来源于 ATP 水解产生的能量沿 与单链 DNA 结合,使碱基仍可参与模板反应。 9.DNA 引发酶分子与 DNA 解旋酶直接结合形成一个 下移,随着后随链的延伸合成 RNA 引物。 单位,它可在复制叉上沿后随链 10.如果 DNA 聚合酶出现错误,会产生一对错配碱基,这种错误 可以被一个通过甲基化作用来 区别新链和旧链的判别的 系统进行校正。 11.对酵母、细菌以及几种生活在真核生物细胞中的病毒来说,都 可以在 DNA 独特序列的 处观察到复制泡的形成。 12. 可被看成一种可形成暂时单链缺口(I 型)或 暂时双链缺口(II 型)的可逆核酸酶。 13.拓扑异构酶通过在 DNA 上形成缺口 超螺旋结构。 14.真核生物中有五种 DNA 聚合酶,它们是 A. ;B. ; C. ;D. ;E. ; 15 有真核 DNA 聚合酶 和 显示 3'5' 外切 核酸酶活性。 二、选择题(单选或多选) 1.DNA 的复制( ) 。 A.包括一个双螺旋中两条子链的合成 C.依赖于物种特异的遗传密码 E.是一个描述基因 达的过程 2.一个复制子是( ) 。 B.遵循新的子链与其亲本链相配对的原则 D.是碱基错配最主要的来源 A.细胞分裂期间复制产物被分离之后的 DNA 片段 B.复制的 DNA 片段和在此过程中所需的酶和蛋白质 C.任何自发复制的 DNA 序列(它与复制起点相连) D.任何给定的复制机制的产物(如单环) E.复制起点和复制叉之间的 DNA 片段 3.真核生物复制子有下列特征,它们( ) 。 A.比原核生物复制子短得多,因为有末端序列的存在 B.比原核生物复制子长得多,因为有较大的基因组 C.通常是双向复制且能融合 D.全部立即启动,以确保染色体的 S 期完成复制 E.不是全部立即启动,在任何给定的时间只有大约 15%具有活性 4.下述特征是所有(原核生物、真核生物和病毒)复制起始位点 都共有的是( ) 。 A.起始位点是包括多个短重复序列的独特 DNA 片段 B.起始位点是形成稳定二级结构的回文序列 C.多聚体 DNA 结合蛋白专一性识别这些短的重复序列 D.起始位点旁侧序列是 A-T 丰富的,能使 DNA 螺旋解开 E.起始位点旁侧序是 G-C 丰富的,能稳定起始复合物 5.下列关于 DNA 复制的说法正确的有( ) 。 A.按全保留机制进行 B.按 3′5′方向进行 C.需要 4 种 dNMP 的参与 D.需要 DNA 连接酶的作用 E.涉及 RNA 引物的形成 F.需要 DNA 聚合酶 I 6.滚环复制( ) A. 是细胞 DNA 的主要复制方式 B. 可以使复制子大 量扩增 C. 产生的复制子总是双链环状 贝 D. 是噬菌体 DNA 在 细菌中
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最通常的一种复制方式 E.复制子中编码切口蛋白的基因的 达是自动调节的 7.标出下列所有正确的答案。 ( ) A.转录是以半保留的方式获得两条相同的 DNA 链的过程 B.DNA 依赖的 DNA 聚合酶是负责 DNA 复制的多亚基酶 C.细菌转录物(mRNA)是多基因的 D. 因子指导真核生物的 hnRNA 到 mRNA 的转录后修饰 E.促旋酶(拓扑异构酶 II)决定靠切开模板链而进行的复制的起 始和终止 8. 哺乳动物 粒体和植物叶绿体基因组是靠 D 环复制的。 下面 哪一种叙述准确地描述了这 个过程?( ) A.两条链都是从 oriD 开始复制的,这是一个独特的二级结构, 由 DNA 聚合酶复合体识别 B.两条链的复制都是从两个独立的起点同时起始的 C.两条链的复制都是从两个独立的起点先后起始的 D.复制的起始是由一条或两条(链)替代环促使的 E.ter 基因座延迟一条链的复制完成直到两个复制过程同步 9.DNA 多聚体的形成要求有模板和一个自由 3′-OH 端的存在。 这个末端的形成是靠( ) 。 A.在起点或冈崎片段起始位点(3′-GTC)上的一个 RNA 引发体 的合成 B.随着链替换切开双链 DNA 的一条链 C.自由的脱氧核糖核苷酸和模板一起随机按 Watson-Crick 原则 进行配对 D.靠在 3′端形成环(自我引发) E.一种末端核苷酸结合蛋白结合到模板的 3′端 10.对于一个特定的起点,引发体的组成包括( A.在起始位点与 DnaG 引发酶相互作用的一个寡聚酶 B.一个防止 DNA 降解的单链结合蛋白 C.DnaB 解旋酶和附加的 DnaC、DnaT、PriA 等蛋白 ) 。 D.DnaB、单链结合蛋白、DnaC、DnaT、PriA 蛋白和 DnaG 引发酶 E.DnaB 解旋酶、DnaG 引发酶和 DNA 聚合酶 III 11.在原核生物复制子中以下哪种酶除去 RNA 引发体并加入脱氧 核糖核苷酸?( ) A.DNA 聚合酶 III B.DNA 聚合酶 II C.DNA 聚合酶 I D.外切 核酸酶 MFI E.DNA 连接 酶 12.使 DNA 超螺旋结构松驰的酶是( ) 。A.引发酶 B.解旋 酶 C.拓扑异构酶 D.端 粒酶 E.连接酶 13.从一个复制起点可分出几个复制叉?( A.1 B.2 C.3 D.4 E.4 个以上 三、判断题 ) 1.大肠杆菌中,复制叉以每秒 500bp 的速度向前移动,复制叉前 的 DNA 以大约定 3000r/min 的速度旋转。 ) (如果复制叉以每秒 500 个核苷酸 ( 的速度向前移动,那么它前面 的 DNA 必须以 500/10.5=48 周/秒的速度旋转,即 2880r/min) 2.所谓半保留复制就是以 DNA 亲本链作为合成新子链 DNA 的模 板,这样产生的新的双链 DNA 分子由一条旧链和一条新链组成。( ) 3. "模板"或"反义" DNA 链可定义为: 模板链是被 RNA 聚合酶识 别并合成一个互补的 mRNA,这一 mRNA 是蛋白质合成的模板。( ) 4.DNA 复制中,假定都从 5'3'同样方向读序时,新合成 DNA 链 中的核苷酸序列同模板链 一样。
( ) (尽管子链与亲本链因为碱基互补配对联系起来, 但子链核苷酸序列与亲链又很 大不同) 5. DNA 的 5′3′合成意味着当在裸露 3′OH 的基团中添加 dNTP 时,除去无机焦磷酸 DNA 链就会伸长。( ) 6. 在先导链上 DNA 沿 5′3′方向合成, 在后随链上则沿 3′5′ 方向合成。( ) 7.如果 DNA 沿 3'5'合成,那它则需以 5'三磷酸或 3'脱氧核苷 三磷酸为末端的链作为前体。 ( ) 8.大肠杆菌 DNA 聚合酶缺失 3′5′校正外切核酸酶活性时会降 低 DNA 合成的速率但不影 响它的可靠性。( ) 9.DNA 的复制需要 DNA 聚合酶和 RNA 聚合酶。( ) 10.复制叉上的单链结合蛋白通过覆盖碱基使 DNA 的两条单链分 开,这样就避免了碱基配 对。( ) (单链结合蛋白与磷酸骨架结合,离开暴露碱基)
11. 只要子链和亲本链中的一条或两条被甲基化, 大肠杆菌中的错 配校正系统就可以把它们 区别开来,但如果两条链都没有甲基化则不行。( ) (亲本链甲 基化,子链没有甲基化) 12.大肠杆菌、酵母和真核生物病毒 DNA 的新一轮复制是在一个 特定的位点起始的,这个 位点由几个短的序列构成,可用于结合起始蛋白复合体。( ) 13.拓扑异构酶 I 之所以不需要 ATP 来断裂和重接 DNA 链,是 因为磷酸二酯键的能量被暂 储存在酶活性位点的磷酸酪氨酸连接处。( ) 14.酵母中的拓扑异构酶 II 突变体能够进行 DNA 复制,但是在 有丝分列过程中它们的染色 体不能分开。( ) 15.拓扑异构酶 I 和 II 可以使 DNA 产生正向超螺旋。 ( ) 16.拓扑异构酶 I 解旋需要 ATP 酶。 ( ) 17.RNA 聚合酶 I
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合成 DNA 复制的 RNA 引物。 ( ) 18.当 DNA 两条链的复制同时发生时,它是由一个酶复合物,即 DNA 聚合酶 III 负责的。真 核生物的复制利用三个独立作用的 DNA 聚合酶,Pol 的一个 贝(为了起始)和 Pol 的两 个 贝 (DNA 多聚体化, MF1 将 RNA 引发体移去之后填入) 当 。 ( ) 19. ori 开始的噬菌体复制的起始是被两个噬菌体蛋白 O 和 P 从 所控制的。在 E.coli 中 O 和 P 是 DnaA 和 DnaC 蛋白的类似物。 基于这种比较, 蛋白代 O 一 个解旋酶,而 P 蛋白调节解 旋酶和引发酶结合。( ) 20. 粒体 DNA 的复制需要使用 DNA 引物。 ( ) 21.在真核生物染色体 DNA 复制期间,会形成链状 DNA。 ( ) 四、简答题 1.描述 Meselson-Stahl 实验,说明这一实验加深我们对遗传理 解的重要性。 答: Meselson-Stahl 实验证实了 DNA 的半保留复制。 证实了两个 假说: ( 1)复制需要两条 DNA 的分离(解链/变性) ( 2) 通过以亲本链作为模板, 新合成的 DNA 链存在于两个复制 体中。 2. 请列举可以在 性染色体的末端建立 性复制的三种方式。 答: (1)染色体末端的短重复序列使端粒酶引发非精确复制。 ( 2)末端蛋白与模板链的 5'端共价结合提供核苷酸游离的 3' 端 ( 3) 通过滚环复制, DNA 双链环化后被切开, 产生延伸的 3'-OH 端 3.为什么一些细菌完成分裂的时间比细菌基因组的复制所需的时 间要少?为什么在选择营 养条件下, E.coli 中可以存在多叉的染色体或多达 4 个以上的开 环染色体 贝,而正常情况 下染色体是单 贝的? 答:单 贝复制由细胞中复制起点的浓度控制的。 在适宜的培养条件下,细胞呈快速生长,稀释起始阻遏物的浓度, 使复制连续进行。 4.在 DNA 聚合酶 III 催化新链合成以前发生了什么反应? 答:DnaA(与每 9 个碱基重复结合,然后使 13 个碱基解链) 、 DnaB(解旋酶)和 DnaC(先 于聚合酶 III 与原核复制起点相互作用。后随链复制需要引发体 完成的多重复制起始,引发 体由 DnaG 引发酶与多种蛋白质因子组成。 5.DNA 复制起始过程如何受 DNA 甲基化状态影响? 答:亲本 DNA 通常发生种属特异的甲基化。在复制之后,两模板复制体双链 DNA 是半甲 基化的。半甲基化 DNA 对膜受体比对 DnaA 有更高的亲和力,半 甲基化 DNA 不能复制,从 而防止了成熟前复制。 6.请指出在 oriC 或 X 型起点起始的 DNA 复制之间存在的重要 差异。 答:oriC 起点起始的 DNA 复制引发体只含有 DnaG。 X 型起点起始的 DNA 复制需要额外的蛋白质—Pri 蛋白的参与。 Pri 蛋白在引物合成位点装 配引发体。 7. 大肠杆菌被 T2 噬菌体感染, 当它的 DNA 复制开始后提取噬菌 体的 DNA,发现一些 RNA 与 DNA 紧紧结合在一起,为什么? 答:该 DNA 为双链并且正在进行复制。RNA 片段是后随链复制的 短的 RNA 引物。 8.DNA 连接酶对于 DNA 的复制是很重要的,但 RNA 的合成一般 却不需要连接酶。解释这 个现象的原因。 答:DNA 复制时,后随链的合成需要连接酶将一个冈崎片段的 5' 端与另一冈崎片段的 3'端连 接起来。而 RNA 合成时,是从转录起点开始原 5'3'一直合成的, 因此不需 DNA 连接酶。 9. 曾经认为 DNA 的复制是全保留复制, 每个双螺旋分子都作为新 的子代双螺旋分子的模板。 如果真是这样,在
Meselson 和 Stahl 的实验中他们将得到什么 结果? 答:复制一代后,一半为重链,一半为轻链;复制两代后,1/4 为 重链,3/4 为轻链。 10. 描述 Matthew 和 Franklin 所做的证明 DNA 半保留复制的实 验。 答: (1)将大肠杆菌在 15N 培养基中培养多代,得到的 DNA 两条 链都被标记,形成重链。 ( 2)细胞移到 14N 培养基中培养,提取 DNA; ( 3)将 DNA 进行氯化铯密度梯度离心, ; ( 4)经过一定时间后,DNA 在离心管聚集成带,每个带的密度 均与该点的氯化铯溶液的密 度相同; ( 5)照相决定每条带的位置和所含的 DNA 量。 1)经 15N 培养基,所有 DNA 都聚集在一条重密度带; 2)经 14N 培养基一代后,所有的 DNA 形成一条中间密度带; 3)经 14N 继续培养基一代,DNA 一半是中间密度带,另一半是轻 密度带; 4)最后,他们证明第一代的分子是双链,且为半保留复制。 11.解释在 DNA 复制过程中,后随链是怎样合成的。 答:DNA 聚合酶只能朝 5'3'方向合成 DNA,后随链不能像前导链 一样一直进行合成。后 随链是以大量独立片段(冈
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崎片段)合成的,每个片段都以 5'3' 方向合成,这些片段最后 由连接酶连接在一起。每个片段独立引发、聚合、连接。 12.描述滚环复制过程及其特征。 答:仅是特定环状 DNA 分子的复制方式。 ( 1)复制过程: 1)环状双链 DNA 的+链被内切酶切开; 2) 以-链为模板, DNA 聚合酶以+链的 3'端作为引物合成新的+链, 原来的+链 DNA 分子 的 5'端与-链分离; 3)+链的 3'端继续延长; 4) 引发酶以离开的+链为模板合成 RNA 引物, DNA 聚合酶以+链为 模板合成新的-链; 5)通常滚环复制的产物是一多聚物,其中大量单位基因组头尾相 连。 ( 2)复制过程的特征: 1)复制是单方向不对称的; 2)产物是单链 DNA,但可通过互补链的合成转变为双链; 3)子代 DNA 分子可能是共价连接的连环分子; 4)连环分子随后被切成与单个基因组相对应的片段。 四、简答题 1.描述 Meselson-Stahl 实验,说明这一实验加深我们对遗传理 解的重要性。 2. 请列举可以在 性染色体的末端建立 性复制的三种方式。 3.为什么一些细菌完成分裂的时间比细菌基因组的复制所需的时 间要少?为什么在选择营 养条件下, E.coli 中可以存在多叉的染色体或多达 4 个以上的开 环染色体 贝,而正常情况 下染色体是单 贝的? 4.在 DNA 聚合酶 III 催化新链合成以前发生了什么反应? 5.DNA 复制起始过程如何受 DNA 甲基化状态影响? 6.请指出在 oriC 或 X 型起点起始的 DNA 复制之间存在的重要 差异。 7. 大肠杆菌被 T2 噬菌体感染, 当它的 DNA 复制开始后提取噬菌 体的 DNA,发现一些 RNA 与 DNA 紧紧结合在一起,为什么? 8.DNA 连接酶对于 DNA 的复制是很重要的,但 RNA 的合成一般 却不需要连接酶。解释这 个现象的原因。 9. 曾经认为 DNA 的复制是全保留复制, 每个双螺旋分子都作为新 的子代双螺旋分子的模板。 如果真是这样,在 Meselson 和 Stahl 的实验中他们将得到什么 结果? 10. 描述 Matthew 和 Franklin 所做的证明 DNA 半保留复制的实 验。 11.解释在 DNA 复制过程中,后随链是怎样合成的。 12.描述滚环复制过程及其特征。 答案 一、 填空 1. DNA 聚合酶 2. DNA 复制叉 3. DNA 连接酶 4. 先导链 后随链 5. 校正核酸外切 6. RNA 引物 DNA 引发酶 7. DNA 解旋酶 8. 单链结合 蛋白(SSB) 9. 引发体 10. 错配 校正(错配修复) 11. 复制起点 12. DNA 拓扑酶 13. 松弛 14. 15. 二、选择 1.BD 2.C 3.C 4.ACD 5.DEF 6.BDE 7.BC 8.CD 9.ABDE 10.AC 11.C 12.C
13.B 三、判断 X XXX XX XXX X 四、简答 1. 答:Meselson-Stahl 实验证实了 DNA 的半保留复制。证实了 两个假说: ( 1)复制需要两条 DNA 的分离(解链/变性) ( 2) 通过以亲本链作为模板, 新合成的 DNA 链存在于两个复制 体中。 2. 答: (1)染色体末端的短重复序列使端粒酶引发非精确复制。 ( 2)末端蛋白与模板链的 5'端共价结合提供核苷酸游离的 3' 端 ( 3) 通过滚环复制, DNA 双链环化后被切开, 产生延伸的 3'-OH 端 3. 答:单 贝复制由细胞中复制起点的浓度控制的。 在适宜的培养条件下,细胞呈快速生长,稀释起始阻遏物的浓度, 使复制连续进行。 4. 答:DnaA(与每 9 个碱基重复结合,然后使 13 个碱基解链) 、 DnaB(解旋酶)和 DnaC (先于聚合酶 III 与原核复制起点相互作用。后随链复制需要引 发体完成的多重复制起始, 引发体由 DnaG 引发酶与多种蛋白质因子组成。 5. 答:亲本 DNA 通常发生种属特异的甲基化。在复制之后,两模 板-复制体双链 DNA 是半 甲基化的。半甲基化 DNA 对膜受体比对 DnaA 有更高的亲和力, 半甲基化 DNA 不能复制, 从而防止了成熟前复制。 6. 答:oriC 起点起始的 DNA 复制引发体只含有 DnaG。 X 型起点起始的 DNA 复制需要额外的蛋白质—Pri 蛋白的参与。 Pri 蛋白在引物合成位点装 配引发体。 7. 答: DNA 为双链并且正在进行复制。 该 RNA 片段是后随链复制 的短的 RNA 引物。 8. 答:DNA 复制时,后随链的合成需要连接酶将一个冈崎片段的 5'端与另一冈崎片段的 3'端 连接起来。 RNA 合成时, 而 是从转录起点开始原 5'3'一直合成的, 因此不需 DNA 连接酶。 9. 答:复制一代后,一半为重链,一半为轻链;复制两代后,1/4 为重链,3/4 为轻链。 10. 答:1) ( 将大肠杆菌在 15N 培养基中培养多代, 得到的 DNA 两 条链都被标记,形成重 链。 ( 2)细胞移到 14N 培
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养基中培养,提取 DNA; ( 3)将 DNA 进行氯化铯密度梯度离心, ; ( 4)经过一定时间后,DNA 在离心管聚集成带,每个带的密度 均与该点的氯化铯溶液的密 度相同; ( 5)照相决定每条带的位置和所含的 DNA 量。 1)经 15N 培养基,所有 DNA 都聚集在一条重密度带; 2)经 14N 培养基一代后,所有的 DNA 形成一条中间密度带; 3)经 14N 继续培养基一代,DNA 一半是中间密度带,另一半是轻 密度带; 4)最后,他们证明第一代的分子是双链,且为半保留复制。 11. 答:DNA 聚合酶只能朝 5'3'方向合成 DNA,后随链不能像前 导链一样一直进行合成。 后随链是以大量独立片段 (冈崎片段) 合成的, 每个片段都以 5'3' 方向合成,这些片段最 后由连接酶连接在一起。每个片段独立引发、聚合、连接。 12. 答:仅是特定环状 DNA 分子的复制方式。 ( 1)复制过程: 1)环状双链 DNA 的+链被内切酶切开; 2) 以-链为模板, DNA 聚合酶以+链的 3'端作为引物合成新的+链, 原来的+链 DNA 分子 的 5'端与-链分离; 3)+链的 3'端继续延长; 4) 引发酶以离开的+链为模板合成 RNA 引物, DNA 聚合酶以+链为 模板合成新的-链; 5)通常滚环复制的产物是一多聚物,其中大量单位基因组头尾相 连。 ( 2)复制过程的特征:
1)复制是单方向不对称的; 2)产物是单链 DNA,但可通过互补链的合成转变为双链; 3)子代 DNA 分子可能是共价连接的连环分子; 4)连环分子随后被切成与单个基因组相对应的片段。 第五章 DNA 损伤与修复 一、名词解释 1、错义突变 2、无义突变 3、同义突变
4、移码 突变 5、DNA 的体外重组 6、限制性核酸内切酶 7、C-值 8、基因家族 9、转座子 二、简答题 1.诱变剂的作用机制? 2、突变类型及其遗传效应? 3.典型的 DNA 重组实验通常包括哪些步骤? 4.为什么在 DNA 中通常只发现 A—T 和 C—G 碱基配对? 5.什么是增效与减效突变? 6.噬菌体整合到宿主基因组后 4-6 个宿主 DNA 的核苷酸被复制, 这是为什么?这与转座子插 入新位点有何相似之处?另外,两个核苷酸从 5'U3 的 5'和 3'被 切除,这意味着遗传信息从反 转录病毒中被丢失吗? 7.列出病毒和非病毒超家族反转录转座子之间的 4 种差异. 8.描述两种转座子引起基因组重排的方式。 9.IS 元件整合到靶位点时会发生什么? 10.一个复合转座子和一个 IS 元件之间的关系是什么?。 11.列出一个转座子插入到一个新位点所要求的步骤. 12.当(1)DNA 在两个定向重复之间(2)DNA 在两个反向重复之间发 生重组的效应各是什么? 13.在什么过程中会形成一个共整合体?它的结构是什么? 14.Tn10 元件只有在自己的转座酶基因具有活性时发生转座(与利 用基因组中 Tn10 元件 达 的转座酶的情况正好相反),这种偏爱的原因是什么? 15.跳跃复制的结果是什么? 16.重复序列并不是在选择压力下存在,因此能快速积累突变。这 些特性 明重复序列相互 间应存在很大的不同,但事实并不是这样的。请举例说明。 17. 检体 DNA 的突变率与细胞核 DNA 突变率有什么不同?为 什么? 18.简述大肠杆菌的插入序列,并指出它们对自发突变的重要性。 19.分析比较细菌转座子的结构与特点。 三、分析题 1. 面抗原的变异和哺乳动物免疫多样性都是 DNA 重排的结 果。锥虫通过 DNA 重 排选择 达所携带的一千多个不同的 VSG 基因中的一个。而哺乳动物细胞 则通过 DNA 重排产生 成百上千个不同的抗体,包括与 VSG 蛋白反应的抗体,尽管抗体 在数量上的优势,锥虫仍 然能够成功地逃避宿主的免疫系统,为什么? 2.分析比较细菌转座子的结构与特点。 答案: 一、名词解释 1、错义突变:DNA 分子中碱基对的取代,使得 mRNA 的某一密码 子发生变化,由它所编码 的氨基酸就变成另一种的氨基酸, 使得多肽链中的氨基酸顺序也相 应的发生改变的突变。 2、无义突变:由于碱基对的取代,使原来可以翻译某种氨基酸的 密码子变成了终止密码子 的突变。 3、同义突变:碱基对的取代并不都是引起错义突变和翻译终止, 有时虽然有碱基被取代, 但在蛋白质水平上没有引起变化, 氨基酸没有被取代, 这是因为突 变后的密码子和原来的密 码子代 同一个氨基酸的突变。 4、移码突变:在编码序列中,单个碱基、数个碱基的缺失或插入 以及片段的缺失或插入等 均可以使突变位点之后的三联体密码阅读框发生改变, 不能编码原 来的蛋白质的突变。 5、 DNA 的体外重组:
第三版现代分子生物学课后习题集及答案 朱玉贤
DNA 的体外重组是指含有特异目的基因的 DNA 片段与载体 DNA 在 试管内连接的过程。常用的方法:1. 粘性末端连接法;2. 平末端 连接法;3. 结尾法;4. 人工 接头法(linker) 。
6、限制性核酸内切酶(restriction endonuclease, 内切酶) :是 一类特异性地水解双链(ds) 的 DNA 的磷酸二酯酶。分 、II、 Ш 型。内切酶的用途: 1. 制作 DNA 物理图谱; 2.DNA 限制性片段长度多态性分析(RFLPS) 。 3.基因克隆及亚克隆; 4.DNA 杂交与序列分析; 5.基因组同源性研究; 6.基因突变和化学修饰的研究。 7、C-值:通常是指一种生物单倍体基因组 DNA 的总量。 8、基因家族:真核生物中许多相关的基因常按功能成套组合,被 称为基因家族。 9、 转座子: 是存在于染色体 DNA 上可自主复制和位移的基本单位。 二、简答题 1.诱变剂的作用机制? 答:1、碱基的类似物诱发突变 2、改变 DNA 的化学结构 3、结合 到 DNA 分子上诱发移码突 变 4、紫外 及其他射 引起的 DNA 分子的变化 2、突变类型及其遗传效应? 答:1、突变类型: A. B. C. D. 点突变 NA 大分子上一个碱基的变异。分为转换和颠换。 缺失:一个碱基或一段核苷酸链从 DNA 大分子上消失。 插入: 一个原来没有的碱基或一段原来没有的核苷酸链插入到 DNA 大分子中间。 倒位 NA 链内重组,使其中一段方向倒置。 2、突变的遗传效应: A.遗传密码的改变:错义突变、无义突变、同义突变、移码突变 B.对 mRNA 剪接的影响: 一是使原来的剪接位点消失; 二是产生新 的剪接位点。 C.蛋白质肽链中的片段缺失: 3.典型的 DNA 重组实验通常包括哪些步骤? a、 提取供体生物的目的基因 (或称外源基因)酶接连接到另一 DNA , 分子上(克隆载体) , 形成一个新的重组 DNA 分子。 b、将这个重组 DNA 分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存, 这个过程称为转化。 c、对那些吸收了重组 DNA 的受体细胞进行筛选和鉴定。 d、对含有重组 DNA 的细胞进行大量培养,检测外援基因是否 达。 4.为什么在 DNA 中通常只发现 A—T 和 C—G 碱基配对? 答: (1)C—A 配对过于庞大而不能存在于双螺旋中; G—T 碱 基对则太小,核苷酸间的空 隙太大无法形成氢键。 (2)A 和 T 通常有两个氢键,而 C 和 G 有三个。正常情况下,可形成 两个氢键的碱基不能与可形成三个氢键的碱基配对。 5.什么是增效与减效突变? 答: 顺式作用的启动子等调控序列的突变不是阻碍相对应的转录 单元转录所必需的。然而, 转录启动的效率可能会因此而下降, 相邻基因的转录会减弱,这样 的突变称为减效突变。若 改变启动子序列的突变能提高转录启动的效率, 则这样的突变称为 增效突变。 6.噬菌体整合到宿主基因组后 4-6 个宿主 DNA 的核苷酸被复制, 这是为什么?这与转座子插 入新位点有何相似之处?另外,两个核苷酸从 5'U3 的 5'和 3'被 切除,这意味着遗传信息从反 转录病毒中被丢失吗? 答: 由于反转录病毒整合酶(reboviral integase)在整合位点切 开一个交错切口造成靶位点重 复。插入之后,填补切口产生重复序列。转座酶在靶位点产生同向 重复序列。病毒基因组每 侧两个核苷酸的缺失并不会导致类似基因组另一端的序列的其他 贝的丢失。 7.列出病毒和非病毒超家族反转录转座子之间的 4 种差异. 答: 病毒超家族成员含有长末端重复序列 LTR、 编码反转录酶或 整合酶的可读框以及内含 子,但非病毒反转录转座子并不含有这些序列。同样,病毒反转录 转座子的整合会在靶位点 产生一段 4-6 个核苷酸,的短重复序列,而非病毒反转录转座子 则产生 7-21 个核苷酸重复序 列。 8.描述两种转座子引起基因组重排的方式。 答: 转座子转座时能够导致宿主序列的缺失、 重复或插入。 另外, 转座子通过宿主重组系 统导致基因组重排。 9.IS 元件整合到靶位点时会发生什么? 答: 由于在转座子插入之前已产生一个交错切口, 而且这一交错 切口在转座子插入后被填 补,因此导致靶位点序列重复。 10.一个复合转座子和一个 IS 元件之间的关系是什么?。 答: 复合转座子在两个末端有 IS 序列 11.列出一个转座子插入到一个新位点所要求的步骤. 答: 首先,在靶位点处产生一个交错切口,切出转座子。接着, 转座子与靶位点连接。最 后,填补插入位点两侧的单链区。 12.当(1)DNA 在两个定向重复之间(2)DNA 在两个反向重复之间发 生重组的效应各是什么? 答: 同向重
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复序列之间的重组会导致重复序列之间 DNA 序列发 生缺失。反向重复序列之间 的重组则会使重复序列之间的 DNA 序列发生倒位。 13.在什么过程中会形成一个共整合体?它的结构是什么? 答: 在复制转座中会形成共整合体(cointegrant),其中含有两 个方向相同的转座子 贝,并 由原有复制子隔开。 14.Tn10 元件只有在自己的转座酶基因具有活性时发生转座(与利 用基因组中 Tn10 元件 达 的转座酶的情况正好相反),这种偏爱的原因是什么? 答: 转座酶一旦合成就立即与 DNA 牢固结合,以免扩散到基因 组的其他元件中。有假说认 为游离的转座酶半衰期很短,但若与 DNA 结合后较为稳定。因为 未结合状态是不稳定的, 所以游离的转座酶不会扩散到其他位点。 15.跳跃复制的结果是什么? 答: 跳跃复制产生串联的 DNA 序列。比如说,小鼠 27bp 的重 复序列跳跃复制产生 54bp 的 重复序列,它由两个串联的 27bp 的重复序列所组成。 16.重复序列并不是在选择压力下存在,因此能快速积累突变。这 些特性 明重复序列相互 间应存在很大的不同,但事实并不是这样的。请举例说明。 答: 如卫星 DNA 的同源性是通过固定的交换来维持的,它通过 不均等交换导致其中一个重 复单元的增加和另一个的消失。 17. 检体 DNA 的突变率与细胞核 DNA 突变率有什么不同?为 什么? 答: 在哺乳动物中, 粒体 DNA 的突变率比核 DNA 的突变率 高。但在植物中, 粒体 DNA 的突变率比核 DNA 的突变率低。出现这种差异的可能原因是 粒体采用不同于细胞核 的 DNA 聚合酶和 DNA 修复体系。 18.简述大肠杆菌的插入序列,并指出它们对自发突变的重要性。 答: 插入序列(IS)是可以转座的遗传元件, 它们只插入自我复制 的 DNA。中,如细菌和噬 菌体的染色体及质粒。大肠杆菌中,有几种不同的 IS 元件,长度 都是 0.7—1.5kb. 每种都有 特定核苷酸序列,有的编码转座酶,负责启动特定 IS 的转座。一 般来说,每个 IS 的两端都 有一对短的反向重复, 长约 9-41bp(图 A8.1), 转座酶似乎就是通 过识别这些反向重复序列起 始转座的;也就是说,特异的转座酶和反向重复序列对转座都很重 要。转座的另一个性质是 每个 IS 的两端都与宿主 DNA 的短正向重复序列(3—13bp)相连; 这是宿主 DNA 上的靶位点, 在转座过程中该位点被复制。转座时,IS 向基因组中新的位置随 机地移动。通常,它插入一 个结构基因产生突变 型, 有时是因为编码序列受到阻断, 有时 则因为 IS 元件含有多种转 录或翻译的终止信号。另外,IS 赐可插入操纵子的操纵基因-启动 子区域,导致整个操纵子被 关闭, 但偶尔操纵子的 达也会变为组成型。 IS 含有一个正 当 确定向的启动子时,可以转 录细菌操纵子.因为这个启动子不受调节细菌操纵子的正常调控蛋 白调控,产生的效果类似 于操纵基因组成型突变。所以,IS 元件的转座是自发突变的一个 重要来源。必须意识到这些 突变不能被碱基类似物或移码突变诱变剂诱导和回复。 大肠杆菌中 有几种不同的 IS 元件, 贝数在 1—5。 19.分析比较细菌转座子的结构与特点。 答: 1974 年,随着发现与抗生素抗性有关的基因可以在质粒与 细菌的染色体之间转移,科 学家发现了转座子。转座子比 IS 元件大很多(一般为 2—20kb), 它们至少含有一个基因,给 宿主带来可遗传的标记, 一般是对一种或多种抗生素的抗性。 这是 一种非常有用的性质,因 为每种质粒可以用一种转座子"标记",这样通过对药物的抗性 型可以简单地检测质粒的 存在和转移; 同样, 可以轻易地观察到转座。 转座子 Tn5(图 A8.2) 长 5.7kb,是一种结构最简 单的转座子;它由三个成分组装而成:一个长中心区(2—7kb),含 有卡那霉素的抗性基因,两 端为一对 IS 元件,每个长 1.5kb,方向相反。其他的转座.子两 端为不同的 IS 元件,有时两 个 IS 同向。 这些转座子的转座类似 IS 元件, 转座过程中宿主的 一个序列或 DNA 靶位点被复 制。 发生转座首先是因为任意一个 IS 序列或两个 IS 序列同时起 作用,编码一个转座酶(在某 些元件中,如 Tn5,一个 IS 只有部分功能,不能编码一个有活性 的转座酶);其次,转座子两 端通常有一对与 IS 特异相应的反向重复序列: 无论 IS 元件是正 向还是反向的,这些末端重 复序列都存在。 还有一种可能性: 任一对 IS 元件可以相互作用 使它们之间的任意序列转座, 这样任一个基因都可以在两
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端连上两个同样的 IS 元件成为转座 子;这个性质已被用构建重组 DNA 分子。 Tn5 因为其组件的组成被称为集成转座子。 其他转座 子,如复杂的转座子的结 构是不同的; 它们两端不是一对 IS 而是一对反向重复, 编码转座 所需蛋白的基因位于转座 子的中心区。 三、分析题 1. 面抗原的变异和哺乳动物免疫多样性都是 DNA 重排的结 果。锥虫通过 DNA 重 排选择 达所携带的一千多个不同的 VSG 基因中的一个。而哺乳动物细胞 则通过 DNA 重排产生 成百上千个不同的抗体,包括与 VSG 蛋白反应的抗体,尽管抗体 在数量上的优势,锥虫仍 然能够成功地逃避宿主的免疫系统,为什么? 答: 锥虫因为细胞分裂周期短而取胜。当锥虫感染哺乳动物时, 它在血流中以快速的倍增 时间复制。 在感染开始后不久,识别锥虫 VSG 的 B 细胞从休眠状 态被激活并开始膨大,而 哺乳动物细胞的分裂比锥虫慢得多。当 B 细胞膨大到足以杀死锥 虫时,一些锥虫的 VSG 已 经发生了改变,使 B 细胞不再能识别它。这样就起始了新一轮的 感染,直到免疫系统能识别 它时就已改变成能逃得过免疫系统的变体,于是又开始了新的循 环。 2.分析比较细菌转座子的结构与特点。 答: 1974 年,随着发现与抗生素抗性有关的基因可以在质粒与 细菌的染色体之间转移,科 学家发现了转座子。转座子比 IS 元件大很多(一般为 2—20kb), 它们至少含有一个基因,给 宿主带来可遗传的标记, 一般是对一种或多种抗生素的抗性。 这 是一种非常有用的性质, 因为每种质粒可以用一种转座子"标记",这样通过对药物的抗性 型可以简单地检测质粒 的存在和转移; 同样, 可以轻易地观察到转座。 转座子 Tn5(图 A8.2) 长 5.7kb,是一种结构最 简单的转座子;它由三个成分组装而成:一个长中心区(2—7kb), 含有卡那霉素的抗性基因, 两端为一对 IS 元件,每个长 1.5kb,方向相反。其他的转座.子 两端为不同的 IS 元件,有时 两个 IS 同向。 这些转座子的转座类似 IS 元件, 转座过程中宿主 的一个序列或 DNA 靶位点被 复制。 发生转座首先是因为任意一个 IS 序列或两个 IS 序列同时 起作用,编码一个转座酶(在 某些元件中,如 Tn5,一个 IS 只有部分功能,不能编码一个有活 性的转座酶);其次,转座子 两端通常有一对与 IS 特异相应的反向重复序列: 无论 IS 元件是 正向还是反向的,这些末端 重复序列都存在。 还有一种可能性: 任一对 IS 元件可以相互作 用使它们之间的任意序列转 座, 这样任一个基因都可以在两端连上两个同样的 IS 元件成为转 座子;这个性质已被用构建 重组 DNA 分子。 Tn5 因为其组件的组成被称为集成转座子。其 他转座子,如复杂的转座子 的结构是不同的; 它们两端不是一对 IS 而是一对反向重复, 编码 转座所需蛋白的基因位于 转座子的中心区。 第六章 RNA 的转录与转录后加工 一、名词解释 1、基因诊断 2、RFLP 3、启动子 4. 信号肽 5. 核受 体 6.hnRNA 7、基因治疗 8、反义 RNA 9、核酶 10、三链 DNA 11、 SSCP 12、管家基因 13. 增强子 14. 基础转录装置 18. 重叠基因 19.假基因 20.RNA 干扰 21.酵母双杂交 22.转录因子 23.转录因子的结构 24.衰减子 25.内含子 27.弱化子 28.魔斑 29.上游启动子元 件 30.DNA 探针 二、简答题 1. 简述转录的基本过程? 2.简述原核和真核细胞在蛋白质翻译过程中的差异. 3.试比较原核和真核细胞的 mRNA 的异同. 4.分别说出 5 种以上 RNA 的功能? 5.简述遗传密码的性质 6.简述 tRNA 的二级结构特征并指明作用与作用机制。 7.简述增强子的作用特点。 8. 列举一个已知的 DNA 序列编码一种以上蛋白质的三种方法。 9.在体内,rRNA 和 tRNA 都具有代谢的稳定性,而 mRNA 的寿命 却很短,原因何在? 10.为什么真核生物核糖体 RNA 基因具有很多 贝? 11.为什么说信使 RNA 的命名源自对真核基因 达的研究, 比说 源自对原核基因 达的研究 更为恰当? 12. 说 明 为 什 么 mRNA 仅 占 细 胞 RNA 总 量 的 一 小 部 分 (3 % 一 5%)。 13.为何 rRNA 和 tRNA 分子比 mRNA 稳定? 14.简要说明证明信使的存在及其本质为 RNA 的证据。 15.列举 4 种天然存在的具有催化活性的 RNA。 16.I 型内含子发生改变后,可以产生其他酶的活性吗?如果可以, 是哪些活性?这意味着 I 型 内含子的催化中心有什么特点? 17.某些自剪接的内含子具有可读框, 它们编码何种蛋白?这
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与内含 子的移动有什么关系? 18.转录涉及模板链和编码链的分离, 解释在转录中单链 DNA 是怎 样被保护的。 19.哪三个序列对原核生物 mRNA 的精确转录是必不可少的? 20.反转录病毒怎样获得像 onc 基因这样的细胞基因?获得此类基 因会对反转录病毒基因产生 影响吗?一个反转录病毒怎样才会丢失如 pol 和 env 这样的重要 的基因而复制? 21.转录如何在基因或基因组末端终止? 22.(1)如何区分由启动子起始转录的 RNA 片段与 5'端被加工过 的 RNA 片段; (2)证明多肽是 从氨基端到羧基端方向合成的。 23.被加工的假基因与其他假基因有哪些不同?它是如何产生的? 24.非转录间隔区与转录间隔区分别位于 rRNA 重复的什么位置? 转录间隔区与内含子有何区 别? 三、分析题 1.试证明一个基因中只有一条 DNA 链作为模板被转录。 2.有一个被认为是 mRNA 的核苦酸序列,长 300 个碱基,你怎样 才能: (1)证明此 RNA 是 mRNA 而不是 tRNA 或 rRNA。 (2)确定它是真核还是原核 mRNA。 3.如果两个 RNA 分子具有适当的序列以及配对恰当,就可以利用 它们构建锤头型核酶。其 中,"底物链"必须含有 5'—GUN—3'(N 代 任一种核苷酸)序 列,而"酶链"则必须具有 核酶催化中心的序列,同时与底物链配对。这样,酶链在 N 核昔 酸的 3'端对底物链进行切割。 提供适当的酶链,可以降解细胞中不能被锤头型核酶切割的 RNA, 这为把酶链作为阻断某 些基因 达的治疗试剂提供了可能。 例如, 一些研究小组正在设 计可以切割 HIV RNA 的酶 链,将如何设计这种核酶的酶链?如何选择 HIV RNA 中的靶序列? 该酶链应具有什么特点? 另外,以 RNA 作为药物,将会碰到什么问题? 答案:
一、名词解释 1、基因诊断:以 DNA 或 RNA 为诊断材料,通过检查基因的存在、 结构缺陷或 达异常, 对人体的状态和疾病作出诊断的方法和过程。 2、RFLP:即限制性片段长度多态性,个体之间 DNA 的核苷酸序列 存在差异,称为 DNA 多 态性。 若因此而改变了限制性内切酶的酶切位点则可导致相应的限 制性片段的长度和数量发 生变化,称为 RFLP。 3、启动子——是 DNA 分子可以与 RNA 聚合酶特异结合的部位, 也就是使转录开始的部位。 在基因 达的调控中, 转录的起始是个关键。 常常某个基因是否 应当 达决定于在特定的启 动子起始过程。 4. 信号肽:在蛋白质合成过程中 N 端有 15~36 个氨基酸残基的 肽段,引导蛋白质的跨膜。 5. 核受体——细胞内受体分布于胞浆或核内,本质上都是配体调 控的转录因子,均在核内启 动信号转导并影响基因转录,统称核受体。
6.hnRNA——核不均一 RNA, mRNA 的前体, 即 经过 5'加帽和 3' 酶切加多聚 A,再经过 RNA 的剪接, 将外显子连接成开放阅读框, 通过核孔进入细胞质就 可以作为蛋白质合成的 模板了。 7、 基因治疗: 一般是指将限定的遗传物质转入患者特定的靶细胞, 以最终达到预防或改变 特殊疾病状态为目的治疗方法。 8、 反义 RNA: 碱基序列正好与有意义的 mRNA 互补的 RNA 称为反 义 RNA。可以作为一种 调控特定基因 达的手段。 9、 核酶: 是一种可以催化 RNA 切割和 RNA 剪接反应的由 RNA 组 成的酶,可以作为基因 达和病毒复制的抑制剂。 10、三链 DNA:当某一 DNA 或 RNA 寡核苷酸与 DNA 高嘌呤区可 结合形成三链,能特异地 结合在 DNA 的大沟中,并与富含嘌呤链上的碱基形成氢键。 11、SSCP:单链构象多态性检测是一种基于 DNA 构象差别来检测 点突变的方法。相同长度 的单链 DNA,如果碱基序列不同,形成的构象就不同,这样就形成 了单链构象多态性。 12、管家基因:在生物体生命的全过程都是必须的,且在一个生物 个体的几乎所有细胞中持 续 达的基因。 13. 增强子(enhancer):远离转录起始点(1~30 kb) 、决定基 因的时间、空间特异性 达、 增强启动子转录活性的 DNA 序列, 其发挥作用的方式通常与方向、 距离无关。增强子也是 由若干功能组件——增强体(enhanson)组成,是特异转录因子结 合 DNA 的核心序列。 14. 基础转录装置 (basical transcriptional apparatus) 在 TF : ⅡA~F 等参与下,RNA 聚合酶Ⅱ 与 TFⅡD、TFⅡB 等聚合,形成一个功能性的前起始复合物 PIC, 可以开始转录但其速率低, 因此称为基础转录装置。 18. 重叠基因
(overlapping gene): 是一种转录单位,一个基因 可决定多种 mRNA 和蛋白质。 它们
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可以有 2 个启动子,2 个终止子,几个外显子。转录时,可 能使用 2 个启动子中的 1 个 或 2 个, 也可能使用 2 个终止子中的 1 个或 2 个, 或用不同的 剪切方式对转录的初级产物进 行加工,产生多种 mRNA 中的一种。如 Bcl-X 基因 。 19.假基因(pseudogene):在多基因家族中,不产生有功能基因产 物的基因。即序列与有功能 的基因相似, 但或者不能转录, 或者转录后生成无功能的基因产物。 用 示。造成原因是 基因在进化过程中,发生突变所致(如缺失、倒位、点突变等) 。 假基因往往缺少正常基因 的内含子,两侧有顺向重复序列。 20.RNA 干扰:siRNA 是一类长 21—25 个核苷酸的双链 RNA,产 生于病毒感染或其他双链 RNA 诱导以后, 其功能是引起特异的靶 mRNA 降解, 以维持基因组 稳定,保护基因组免受 外源核酸入侵和调控基因 达等,这一细胞反应过程叫做 RNA 干扰(RNAi) 。 21.酵母双杂交:酵母双杂交是一种新的遗传体系,它是以酵母菌 的基因分析为基础,用它 在体内研究蛋白质与蛋白质相互作用的实验方法。 双杂交系统是在 酵母菌体内用于研究蛋白 质相互作用的实验方法,能用于鉴定已知蛋白质之间的相互作用, 可对蛋白质的作用部位及 关键片段做准确定位, 可以从 cDNA 文库中筛选出与所研究蛋白质 相互作用的蛋白质及其编 码基因。并逐渐推广应用到其他一些研究领域如:细胞周期调控, 转录调节和信号传导等。 22.转录因子:转录调节因子由某一基因 达后,通过与特异的 顺式作用元件相互作用 (DNA-蛋白质相互作用) 反式激活另一基因的转录, 故称反式作用 因子(trans-acting factor) 。 23.转录因子的结构:DNA 结合域(DNA binding domain)、转录激 活域(activation domain)、蛋 白质-蛋白质相互作用结构域(如二聚化结构域)(1)DNA 结构 。 域:通常由60~10 0个氨基酸残基组成。A、 指(zinc finger)结构。B、碱性螺 旋-环-螺旋(basic helix-loophlix,bHLH)。C、碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper,bZIP)。 (2)转录激活域:由3 0 ~ 1 0 0 个氨 基 酸 残基 组成 。 转 录 激 活域 又 有 酸性 激活 域 (acidic activation domain)、谷氨 酰 胺 富 含 域 (glutamine-rich domain) 及 脯 氨 酸 富 含 域 (proline-rich domain)。 (3)二聚化结构域: 二聚化作用与 bZIP 的亮氨酸拉链、bHLH 的螺旋-环-螺旋结构 有关。 24.衰减子(attenuator) :细菌 E.coli 的 trp 操纵子中第一个 结构基因与启动序列 P 之间有一 衰减子区域。Trp 操纵子的序列 1 中有两个色氨酸密码子,当色 氨酸浓度很高时,核蛋白体 (核糖体)很快通过编码序列 1,并封闭序列 2,这种与转录偶联 进行的翻译过程导致序列 3、4 形成一个不依赖 (rho)因子的终止结构---衰减子。(转录 衰减是原核生物特有的调控 机制)。 25.内含子(intron):指基因组中的非编码序列。 26.密码的简并性:由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称 为密码的简并性 27.弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的 核苷酸序列。
28.魔斑:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会 产生一个应急反应,停止 全部基因的 达。 产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp) 和鸟苷五磷酸
(pppGpp) 。PpGpp 与 pppGpp 的作用不只是一个或几个操纵子, 而是影响一大批,所以称 他们是超级调控子或称为魔斑。 29.上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的 DNA 序列,-10 区的 TATA、-35 区的 TGACA 及增强子,弱化子等。 30.DNA 探针:是带有标记的一段已知序列 DNA,用以检测未知序 列、筛选目的基因等方面 广泛应用。 二、简答题 1. 简述转录的基本过程? 答案要点: 转录的基本过程包括:模板的识别;转录起始;通过 启动子;转录的延伸和终 止。要求叙述各过程设计到的因子。 2.简述原核和真核细胞在蛋白质翻译过程中的差异. 答案要点:1、起始因子不同; 3、翻译过程(肽链延伸)因子不同; 4、终止因子不同。 要求详述其差异。 3.试比较原核和真核细胞的 mRNA 的异同. 答案要点:A.真核生物 5'端有帽子结构大部分成熟没 mRNA 还同 时具有 3'多聚 A 尾巴,原 核一般没有; B.原核的没 mRNA 可以编码几个多肽真核只能编码一 个。C.原核生物以 AUG 作为起始密码有时以 GUG,UUG 作为起始密码,真核几乎