卡介菌多糖核酸对复发性生殖器疱疹患者外周血(2)

生殖器疱疹治疗

２９２

１．１研究对象１．１．１病例组

以２００１年１０月～２００３年６月间在

我科门诊就诊的ＲＧＨ患者共４５例为研究对象，ＲＧＨ诊断均符合２０００年卫生部疾病控制司和全国性病麻风病控制中心联合颁布的ＧＨ诊断标准。半年内未使用任何免疫抑制剂或免疫增强剂，同时除外以下情况：妊娠及哺乳期妇女、严重心肝肾疾病或全身衰竭、结核、肿瘤、器官移植、自身免疫性疾病等。其中男３０例，女１５例；年龄２ｌ～４８岁，平均２９．２岁；病情３个月至７年，平均１．１年。

１．１．２分组与用药将４５例ＲＧＨ患者按２：１随机对照试验方法分为ＢＣＧ—ＰＳＮ组与病例对照组。ＢＣＧ—ＰＳＮ组：３０例，其中男２０例，女１０例，年龄２１～４８岁，平均２９．６岁。均给予万乃洛韦０．３，ｂｉｄ口服，连

用６ｄ；喷昔洛韦软膏外搽，每Ｅｔ４次，直至皮损消退；

同时臀部肌注ＢＣＧ—ＰＳＮ

１．０

ｍｇ，隔日１次，３６ｄ为１

疗程。病例对照组：１５例，其中男ｌｏ例，女５例；年龄２３—３８岁，平均２８．４岁。均只给予万乃洛韦口服，

０．３，ｂｉｄ，连用６ｄ；喷昔洛韦软膏外搽，每日４次，直至

皮损消退。正常对照组：选择年龄、性别相仿的健康志愿者１５例，其中男１０例，女５例；年龄２１～４１岁，

平均２７．９岁。

各组间年龄、性别经ｔ检验均Ｐ＞０．０５，差异无显著性；ＢＣＧ—ＰＳＮ组与病例对照组间患者病程、复发频率经ｔ检验均Ｐ＞０．０５，差异无显著性；患者对该病的知晓程度与医生对病人的咨询教育程度亦具均衡性；表明各组间具有可比性。１．２流式细胞计数

１．２．１试剂异硫氰酸胍（ＦⅡ℃）标记的抗ＣＩＭ单抗（鼠抗人ｉｇＣｌ）、Ｆ１ＴＣ标记的抗ＣＤ８单抗（鼠抗人Ｉ￥１）购自法国基因公司；藻红素（ＰＥ）标记的抗ＩＬ一１２单抗（鼠抗人Ｉ蜘）、Ｃｙｔｏｄｅｔｅｃｔ删试剂盒均购自荷兰ＩｍｍｕｎｏＱｕａｌｉｔｙＰｒｏｄｕｃｔｓ公司；淋巴细胞分离液购自上海恒信化学试剂有限公司。

１．２．２方法无菌静脉采血５ｍＬ，肝素抗凝，常规分离ＰＢＭＣ并配制细胞悬液，细胞浓度为１

Ｘ

１０６／ｍＬ。

加１ｍＬ细胞悬液、５０ｎｇ／ｍＩ．巴豆酯、１ｔｍａｏｌ／Ｌ艾罗霉

素、２ｔｍａｏｌ／Ｌ莫能星于培养板一孔，置３７。Ｃ、５％ＣＯｚ环境中孵育５ｈ后４％冷多聚甲醛液５００以固定细胞

１０

ｍｉｎ，ＨＢＳＳ洗涤并３００皿ＨＢＳＳ重悬细胞后分３管：

前２管分别加５０以ＣＤ４＋一Ｆ１ＴＣ或ＣＤ８＋一ＦＩＴＣ单抗置室温暗处孵育２０ｍｉｎ，细胞破膜液洗涤后分别加５庙抗ＩＬ一１２ＰＥ单抗，第３管为空白对照，４。Ｃ避光孵育２０ｒｎｉｎ，细胞破膜液洗涤后重悬于ＨＢＳＳ，混匀上机，经ＦＡＣＳｏｒｔ流式细胞仪（美国ＢｅｅｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎ公司）依细胞表面抗原标记而分选出ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞亚群，计数ｌ

万　

方数据Ｘ

１０４个细胞，用ＣｅｌｌＱｕｅｓｔ软件分析数

ｇ坠堕』堡匹墨堕翌望堡：垒卫！至Ｑ堕：ｙ坐：丝：№：堡

据，打印出散点图，以荧光抗体染色阳性细胞的百分率记录结果。

１．３临床疗效的观察病例组均连续跟踪观察３个月，３个月内无复发者为治疗有效，否则观察复发情况。复发患者均详细记录复发间隔时间、复发皮损面积并追踪复发皮损痊愈时间。

１．４统计学处理采用ＳＡＳ８．１软件进行两样本均数方差齐性ｔ检验和四格表资料的ｘ２检验。

２结果

２．１治疗前ＲＧＨ患者与正常对照组外周血ＩＬ一１２阳性Ｔ细胞百分率比较与正常对照组相比，治疗前ＲＧＨ患者外周血ＩＬ一１２阳性ＣＩＭ＋Ｔ细胞的百分率与ＩＬ一１２阳性ＣＤ８＋Ｔ细胞的百分率均呈显著性降低（Ｐ＜０．０５，见表１）。

表１复发性生殖器疱疹患者外周血ＩＬ—１２阳性ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞的百分率（％）

ＩＩＪ—１２一ＣＤ４＋Ｔ

ＩＬ一１２一ＣＤ８＋Ｔ

组别

例数

正常对照组

１５

３．３２±１．８６０．４２±０．１６

病例组４５

１．７６±０．４６

３．２０＋０．２６±０．１５

３．２６“

注：ｔ值为与正常对照组比较＊Ｐ＜０．０５

２．２

ＢＣＧ—ＰＳＮ组与病例对照组治疗前后外周血ＩＬ

一１２阳性Ｔ细胞百分率比较与治疗前相比，ＢＣＧ—ＰＳＮ组患者外周血ＩＬ一１２阳性ＣＤ４＋Ｔ细胞百分率与ＩＬ一１２阳性ＣＤ８＋Ｔ细胞百分率于治疗后均显著升高（Ｐ＜０．０１）。而病例对照组ＩＬ一１２阳性ＣＩＭ＋Ｔ细胞百分率与ＩＬ一１２阳性ＣＤ８＋Ｔ细胞百分率治疗前后差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。对ＢＣＧ—ＰＳＮ组与病例对照组治疗前、后外周血ＩＬ一１２阳性ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞百分率差值分别进行比较，差异均有显著性（Ｐ＜

０．０１，见表２）。

表２

ＢＣＧ—ＰＳＮ组和病例对照组治疗前后ＣＩＭ＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞ｍ一１２的表达水平（牙±ｓ，％）

ＩＬ—１２一ＣＤ４＋Ｔ

ＩＬ一１２一ＣＤ８＋Ｔ

组别ＢＣＧ—ＰＳＮ病例对照ＢＣＧ—ＰＳＮ病例对照

组（３Ｑ２

组ｆ１５２组【３Ｑ２组（１５）治≯ｉ：前１．７５±０．４９

１．７８±０．４２

０．２６±０．１５

０．２７±０．１６

治疗后

３．０６±１．６０。２．Ｏｌ±０．２５

０．３８±０．１２＋０．３３±０．１３治疗前后差１．４０±１．２７４

０．３６±０．２２

０．１１±Ｏ．０８１“０．０５９±０．０３９

注：治疗前、后比较，＊Ｐ＜０．０１；与病例对照组治疗前后比较，＃Ｐ＜０．Ｏｌ。

２．３

ＢＣＧ—ＰＳＮ组与病例对照组的临床疗效比较。

２．３．１

ＢＣＧ—ＰＳＮ组有１９例复发，复发率为

６３．３３％；病例对照组有１４例复发，复发率为９３．３３％。对它们的复发率进行７２检验，结果两组间差异有显著性（７２＝４．６０２，Ｐ＜０．０５），表明ＢＣＧ—ＰＳＮ组的复发率明显低于病例对照组，即临床有效率亦明显高于