2012高二生物：1.1.1 DNA重组技术的基本工具课件

发布时间：2024-11-17 来源：未知

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1.1 DNA重组技术的基本工具

课标领航 1.了解限制酶及DNA连接酶的来源。 2.掌握限制酶及DNA连接酶的作用。

3.理解载体需具备的条件。【重点】三种工具的作用。

【难点】

黏性末端和平末端；载体的特点。

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转基因夜光猫美国新奥尔良奥德班濒危物种研

究中心为探索一些人类疾病的治疗方法，以猫为实验对象 ( 猫的基

因构成与人类相似 ) 进行了一系列实验。为了了解外源基因是否可

以安全地移植到猫科动物的基因序列中，该研究中心利用基因工程技术培育出美国首只转基因夜

光猫。紫外线灯光下夜光猫的眼睛、牙床和舌头会发出鲜艳的橙黄色的荧光。夜光猫的培育施工是在DNA分子水平上进行的，在微小的DNA分子上进行的操作，需要专门的工具。这些工具是什么？各自的作用是什么？让我们一起来了解一

下吧！

基础自主梳理

一、基因工程的概念 1.基因工程的别名：DNA重组技术。

2.操作环境：生物体外。基因。 3.操作对象：______ DNA分子水平。 4.操作水平：_______________

剪切→拼接→导入→表达。 5.基本过程：________________________6.结果：人类需要的新的生物类型和生物产品。

1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”

原核生物。 (1)主要来源：______ 核苷酸序列 ①能够识别DNA特定的____________ (2)特点：磷酸二酯键 ②切开两个核苷酸之间的____________(3)DNA 末端：限制性核酸内切酶切割 DNA 产生的黏性末端和平末端 DNA 末端有两种形式为__________ _______。

2.DNA连接酶——“分子缝合针” (1)作用：将双链DNA片段缝合起来，恢复被限制酶磷酸二酯键。切开的两个核苷酸之间的___________ (2)种类

黏性 ①E.coliDNA 连接酶：只能缝合双链 DNA 的 ______末端。 _______ ②T4DNA连接酶：既可缝合双链DNA的黏性末端，平末端。又可缝合双链DNA的________

思考感悟限制酶和DNA连接酶作用的位点相同吗？

【提示】

相同。都是磷酸二酯键。

3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 1 载体的种类 ①质粒：是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核 DNA之外，并具有自我复制 _________能力的双链环状DNA 分子 ②λ噬菌体的衍生物 ③动植物病毒

2 质粒载体的特点 ①能够在细胞内自我复制限制酶切割位点，便于供外源DNA ②具有一个或多个__________________ 插入 ③具有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择 (3)质粒载体的处理：真正用作载体的质粒，都必须在细胞外经人工改造。

核心要点突破

利用图解法理解记忆限制酶的有关问题

1.识别序列的组

成大多数限制酶的识别序列由 6 个核苷酸组成，例

如EcoRI、Sma I限制酶的识别序列，也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成。 2 .限制酶都是切割识别特定的核苷酸序列的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。