免疫学实验课 沉淀反应

免疫学诊断、沉淀反应

实验室规则-要点 实验室安全-门窗、水、电、火源 实验结束后关闭门窗、水、电、火源 酒精灯和易燃物的使用注意事项；棉塞着火须报 告老师 电源-空气开关 水的使用

实验室安全-生物安全 白大褂的穿着要求 不得将实验无关物品带入实验室 不得在实验室内饮食 不得擅自开UV灯 污染及潜在污染物品须进行消毒处理

实验室规则-要点 实验课要求 遵守上述规则 必备物品：实验指导、实验报告、红蓝铅笔、白 大褂 注意保护自己、爱惜实验室仪器和设施

按照实验要求，认真完成实验并如实记录实验报 告 实验结束后整理本组的台面 实验废弃物分类(污染/潜在污染物、普通废弃物) 放置； 在确认普通废弃物没有着火隐患后，倒入垃圾桶 3

实验室规则-要点 值日生的职责： 检查实验台面的整理 整理实验室及垃圾 关闭所有非必需的电器和电源 逐一检查并确认水槽水龙头的关闭 关闭窗、门 最后离开实验室

本次实验内容1. 录像 2. 双向免疫扩散试验(操作)3. 对流免疫电泳(示教)

沉淀反应:可溶性抗原(血清蛋白质、细胞裂解液、组织浸液、微生 物蛋白等)与相应抗体，在一定的抗原抗体比例下，在一定离 子浓度的缓冲体系中，发生结合后出现沉淀物称沉淀反应。沉淀原，沉淀素。 环状法、絮状法、琼脂扩散法

类型： ★单向免疫扩散 ★双向免疫扩散 ★对流免疫电泳 ★免疫比浊法6

抗原抗体反应的特点(比例合适!) 1. 特异性 2. 可见性 3. 可逆性

(三) 影响抗原抗体反应的因素 1.温度： 一般最适温度为37℃ 4℃,过夜2.电解质：常用生理盐水 离子强度，盐析

3.pH:一般最适pH6-8 电荷，等电点

(1)单向免疫扩散

抗原的定量技术 Method: Ab- in gel Ag- in well

该方法常用于患者血样中IgG、IgM以及C3含量的检测 Q: 如使用单向免疫扩散试验检测患者血样中的IgG,那 么患者血样是放在琼脂糖胶中，还是放入孔中？

(2)双向免疫扩散 抗原或抗体的定性、组成和两种抗原的相关性分析。 抗原抗体分别加入琼脂凝胶的小孔中，二者自由向四周扩散 ;两者相遇时在比例合适处形成沉淀线。

抗体

抗原

双向琼脂扩散试验

(3)对流免疫电泳检测血清中AFP

1、3孔加抗AFP抗 体 2孔，AFP阳性对照 血清 4孔，待检血清 pH 8.6巴比妥缓冲液

+

1 3

2 4

-

电场力 电渗力Ab

pH8.6 合力 移动方向

Ag

pI~7.5

pI~4.8

琼脂糖：在pH8.6的缓冲液中带负电与琼脂糖接触的可移动液体：带正电15

对流免疫

电泳