金银花中绿原酸提取工艺的优化

科学研究

食品研究与开发

２００８年１月第２９卷第１期

５１

金银花中绿原酸提取工艺的优化

聂凌鸿，岳淼

（淮阴工学院食品科学与工程系，江苏淮安２２３００１）

摘要：对金银花中绿原酸的提取方法进行了比较研究，探讨了乙醇回流法的最佳提取方法和最佳工艺条件，并采

用微波和酶液处理金银花以改进乙醇回流法。乙醇回流法最佳条件是加１０倍量７５％乙醇，回流提取１．５ｈ。对于乙醇回流法的改善，微波筛选的最佳工艺条件是：在６００Ｗ微波功率下，样品预浸时间２４ｈ，辐射时间２ｍｉｎ。纤维素酶处理的酶用量为０．５％浓度２ｍＬ，最适温度为４０℃～稳定、５０℃，最佳时间为３．０ｈ。试验表明：优选得到的工艺简单、可行，微波及酶液处理均能显著提高绿原酸的得率。关键词：绿原酸；提取；乙醇回流法；微波法；酶解法

ＯＰＴＩＭＵＭＥＸＴＲＡＣＴＩＯＮＰＲＯＣＥＳＳＦＯＲＣＨＬＯＲＯＧＥＮＩＣＡＣＩＤＩＮＦＬＯＳＬＯＮＩＣＥＲＡＥ

ＮＩＥＬｉｎｇ－ｈｏｎｇ，ＹＵＥＭｉａｏ

（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＨｕａｉｙｉｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈｕａｉａｎ２２３００１，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＢｙｍａｋｉｎｇｃｏｍｐａｒｉｓｉｏｎｏｆｅｘｔｒａｃｔｏｎｍｅｔｈｏｄｓｗｈｉｃｈｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｅｘｔｒａｃｔｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｉｎＦｌｏｓＬｏｎｉｃｅｒａｅ，ｏｕｒｏｂｊｅｃｔｉｖｅｉｓｔｏｓｔｕｄｙｗｈｉｃｈｉｓｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｍｅｔｈｏｄａｎｄｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｅａｃｈｍｅｔｈｏｄ；Ｍｉ－ｃｒｏｗａｖｅｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎａｎｄｅｎｚｙｍｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｔｒｅａｔＦｌｏｓＬｏｎｉｃｅｒａｅｂｅｆｏｒｅｅｔｈａｎｏｌｒｅｆｌｕｘｉｎｇ．Ｃｏｎｃｌｕ－ｓｉｏｎｓｃａｎｂｅｄｒａｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｅｔｈａｎｏｌｒｅｆｌｕｘｉｎｇｉｓ８ｆｏｌｄｏｆ７５％ｅｔｈａｎｏｌ，ｔｈｅｔｉｍｅｏｆｒｅｆｌｕｘ－ｉｎｇｉｓ１．５ｈ．Ｔｈｅｆａｖｏｒａｂｌｅｅｆｆｅｃｔｓｃａｎｂｅａｃｈｉｅｖｅｄｂｙｍｉｃｒｏｗａｖｅｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎｗｉｔｈｔｈｅｔｅｃｈｎｉｃａｌｐａｒａｍｅｔｅｒｓｔｈａｔｐｒｅｓｏａｋｉｎｇｔｉｍｅｉｓ２４ｈ，ｒａｄｉａｔｉｏｎｔｉｍｅｉｓ２ｍｉｎ．Ｔｈｅａｍｏｕｎｔｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｃｏｕｌｄｂｅｏｂｖｉｓｉｏｕｓｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙｔｈｅｃｅｌｌｕｌａｓｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｔｈｅｄｏｓｅａｇｅｏｆｃｅｌｌｕｌａｓｅｗａｓ２ｍＬｂｙ０．５％ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｕｌａｓｅ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆｔｈｅｃｅｌｌｕｌａｓｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｗａｓ４０℃－５０℃，ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｔｈｅｃｅｌｌｕｌａｓｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｔｉｍｅｗａｓ３ｈ．Ｔｈｉｓｏｐｔｉｍｉｚｅｄｐｒｏｃｅｓｓｉｓｓｉｍｐｌｅ，ｓｔａｂｌｅａｎｄｅｆｆｉｃｉｅｎｔ．

作者简介：聂凌鸿（１９６９－），男（汉），副教授，博士，主要从事食品化学和食品工程技术研究。

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科学研究

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｅｔｈａｎｏｌｒｅｆｌｕｘｉｎｇ；ｍｉｃｒｏｗａｖｅｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ；ｅｎｚｙｍｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔ

金银花（Ｆｌｏｓｌｏｎｉｃｅｒａｅ）是忍冬科植物忍冬的干燥花蕾，是临床常用的中药材之一，具有清热解毒、凉风散热、抗病毒、保肝利胆的功能［１－２］。近年来研究发现，金银花中富含多种对人体健康有益的物质，诸如挥发油、黄酮及绿原酸类、三萜类和微量元素等，具有很高的利用价值。在众多成分中绿原酸较为丰富且具有多种活性功能，因此常以绿原酸含量的高低评价金银花质量的优劣［３］。绿原酸还有增香和护色作用，可用于食品和果品保鲜。绿原酸用于果汁保鲜，可有效防止饮料和食品的腐败变质

［４－５］

表１正交试验安排表

Ｔａｂｌｅ１Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｂｙｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅｓｉｇｎ

水平

因素Ｆａｃｔｏｒｓ

Ｌｅｖｅｌｓ１

２３Ａ乙醇浓度／％Ｅｔｈａｎｏｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ／％

６５７０７５／ｇ／ｍＬ）Ｂ料液比（

（ｇ／ｍＬ）Ｒａｔｉｏ／１∶８１∶１０１２１∶Ｃ时间／ｈ

Ｔｉｍｅ／ｈ０．５１．０１．５

提取工艺流程：称取５．０ｇ金银花粉末→装入圆底烧瓶中加入乙醇热回流提取２次→抽滤→浓缩→回收乙醇→冷沉离心→取上清液，沉淀用少量水洗脱一次再离心→合并两次上清液→真空干燥至粉末

在猪油中，若添加少量绿原酸，可提高猪油。

氧化稳定性，增长贮藏期。将少量绿原酸加到天然溶液中，对色素颜色有稳定作用，因此，绿原酸又是一种良好的食品添加剂。当前天然抗氧化剂越来越受消费者欢迎，绿原酸是一种新型高效的酚型天然抗氧化剂，在某些食品中可取代或部分取代目前的人工合成抗氧化剂。

本文研究了金银花中绿原酸的提取方法，并优化金银花中绿原酸的提取工艺，从而为绿原酸在保健食品中的开发和绿原酸的提取、分析及其相关制剂的生产提供参考。

１．２．２乙醇回流法的优化１．２．２．１微波处理

在装有冷凝管的２５０ｍＬ微波专用容器中装入５．０ｇ金银花（预浸泡时间分别为８、１２、２４ｈ），按乙醇回流法提取，在设定的微波功率（６００Ｗ）和不同辐射时间（１、

２、３ｍｉｎ）下，启动微波炉，提取结束后，合并２次分离提取液，在６０℃条件下减压浓缩，６０℃干燥得粗提物。

１．２．２．２酶解法

取适量干燥并粉碎的金银花加入酶解液处理，后按乙醇回流法提取绿原酸。考察酶的用量、酶解时间、酶解温度对绿原酸得率的影响。

提取工艺流程：干燥→粉碎→酶解→乙醇回流法提取→过滤→减压浓缩→干燥得产品

１材料与方法试剂与仪器１．１材料、

材料：市售金银花。

试剂：纤维素酶为生化试剂，其余试剂均为分析纯。仪器：２ＸＺ—８型旋片式真空泵：上海仪表供销公司；ＴＧＬ—１６Ｇ型台式离心机：上海安亭科学仪器厂；

１．２．３绿原酸的纯化

在提取得到的绿原酸粗提液中加入水，使杂质沉淀，滤去不溶于水的成分，以绿原酸粗提液体积为１倍，分别加入２、过滤、滤液浓缩干燥，３、４、５倍的水，沉淀、测绿原酸含量［６－８］。

７５２型紫外可见分光光度计：上海精密科学仪器有限公司；ＲＥ５２—１型旋转蒸发器：上海沪西分析仪器厂，

ＷＧ９００ＤＳＬ２３—Ｋ６型光波／微波炉：顺德市格兰仕微波炉有限公司。

１．２．４绿原酸含量的测定

采用碘量法测定绿原酸的含量，绿原酸易吸附在介质上，可从混合物中分离，然后用０．１ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶液或稀硫酸洗脱，用碘量法滴定。

１．２方法

１．２．１绿原酸的基本提取工艺１．２．１．１水提法

称取金银花细粉５．０ｇ（３份），用水加热回流２次

（１００ｍＬ），２ｈ／次合并提取液，离心３０ｍｉｎ，离心液浓缩，真空干燥得产品。

２结果与分析

２．１水提法提取金银花中绿原酸

通过水提法试验所得提取物得率为１６．１％，绿原酸得率为３．２３％。传统水提法是一种较好的提取方法，无需用到有机溶剂，简便易行，而且操作较稳定，重复性好，但水提法制得的绿原酸得率低，粗提取物中杂质

１．２．１．２乙醇回流法

采用正交试验法分别以６５％、７０％、７５％的乙醇浓度，加入８、１０、１２倍量的乙醇，回流浸提０．５、１．０、１．５ｈ提取绿原酸。试验安排见表１。

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含量多，损失也较大。这主要是因为在水煮过程中，有多糖类、蛋效成分提取出来的同时，许多杂质如淀粉、

白质、黏液质、鞣质、树胶、无机盐类等也被提取出来，

表２

尽管通过离心除去大部分，但仍有少量留在提取液中。

２．２乙醇回流法提取金银花中绿原酸

选用Ｌ９（３４）因素水平表，结果见表２。

绿原酸得率正交试验表及结果

Ｔａｂｌｅ２Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｂｙｅｔｈａｎｏｌｒｅｆｌｕｘｉｎｇ

试验号

因素Ｆａｃｔｏｒｓ

提取物得率／％

Ｎｏ．２３４５６７８９Ｔ１Ｔ２Ｔ３Ｔ１／３Ｔ２／３Ｔ３／３极差Ｒ

Ａ乙醇浓度／％Ｅｔｈａｎｏｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ／％

（６５）１（６５）１（６５）１（７０）２（７０）２（７０）２（７５）３（７５）３（７５）３８．０４７．６１１５．０７２．６８２．５４５．０２２．４８Ｂ料液比（／ｇ／ｍＬ）

（ｇ／ｍＬ）Ｔｈｅｒａｔｉｏ／（１∶１８）（１∶２１０）（１∶３１２）（１∶１８）（１∶２１０）（１∶３１２）（１∶１８）（１∶２１０）（１∶３１２）１０．３６１０．４１９．９５３．４５３．４７３．３２０．１５Ｃ时间／ｈＴｉｍｅ／ｈ（０．５）１（１．０）２（１．５）３（１．０）２（１．５）３（０．５）１（１．５）３（０．５）１（１．０）２１０．１２９．９２１０．６８３．３７３．３１３．５６０．２５

绿原酸得率／％

２．５２２．２８３．２４２．９８２．５８２．０５４．８６５．５５４．６６３０．７２（Ｔ）

Ｙｉｅｌｄｏｆｅｘｔｒａｃｔ／％

１２．４０１２．１６１３．１２１４．２３１３．８３１３．３５１６．６６１７．３４１６．４６

Ｔｉ为各因素同一水平试验指标（绿原酸含量）之和。极差用Ｒ表示，为Ｔ１／３、Ｔ２／３、Ｔ３／３中最大值减最小值。由表２可知因为ＲＡ＞ＲＣ＞ＲＢ，所以Ａ＞Ｃ＞Ｂ，即在乙醇回流法提取金银花中的绿原酸时，乙醇浓度为第一影响因素，其次为回流时间，最后为料液比。所以乙醇浓度对金银花中绿原酸的提取影响最为显著。

通过方差分析进行Ｆ检验可知，３个因素对绿原酸含量的影响都不显著。究其原因可能是本列误差大且误差自由度小（仅为２），使检验的灵敏度低，从而掩盖了考察因素的显著性。由于各因素对绿原酸含量影响都不显著，不必再进行各因素水平间的多重比较。此时，可直观地从表中选择Ｔ大的水平Ａ３Ｂ２Ｃ３组合成最优水平组合Ａ３Ｂ２Ｃ３，即１０倍量７５％的乙醇回流提取

一些绿原酸不易被高体积分数的乙醇提取，且在回流提取中乙醇体积分数越高，提取温度就越低，从而使得率很低［９－１０］。

２．３微波处理优化乙醇回流法提取金银花中绿原酸２．３．１微波辐射时间对产品收率的影响

在其它因素不变的条件下，改变辐射时间，考察不同辐射时间对样品收率的影响，结果见表３。

表３

微波辐射时间对产品收率的影响

Ｔａｂｌｅ３Ｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｒａｄｉａｔｉｏｎｔｉｍｅ

辐射时间／ｍｉｎＲａｄｉａｔｉｏｎｔｉｍｅ／ｍｉｎ提取物得率／％Ｙｉｅｌｄｏｆｅｘｔｒａｃｔ／％绿原酸得率／％Ｙｉｅｌｄｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ／％

１２２．３６．２４

２２５．５６．７３

３２７．６６．７４

＞３２８．７６．７４

１．５ｈ，此条件下，提取物得率为１７．４１％，绿原酸得率为５．７３％。

由乙醇回流法的正交试验可知醇提法绿原酸得率较高，提取物中杂质含量少，是一种理想的提取方法。并从结果中得出最佳提取条件为采用１０倍量７５％乙醇回流提取１．５ｈ。但乙醇回流法也存在着缺陷，即溶剂消耗量大。这是因为在６５％和７０％乙醇浓度时，乙醇浓度低，绿原酸不能充分溶出。因为绿原酸是含有羟基和邻二酚基的有机酸，极性与乙醇相对接近。因此，根据原理，含有乙醇的溶媒更易有效地提“相似相溶”取出绿原酸。又由于乙醇本身的特性，金银花组织内的

注：微波辐射功率６００Ｗ，样品预浸时间２４ｈ。

由表３可知，随着微波辐射时间的增大，提取物的量增大，绿原酸的含量也增大，辐射２ｍｉｎ时，提取物得率为２５．５％，绿原酸得率为６．７３％。但超过２ｍｉｎ时，绿原酸的得率趋向稳定。这表明采用特定功率究其原因可能是微波６００Ｗ时，最佳处理时间为２ｍｉｎ。

辐射使金银花中的绿原酸充分溶出，且随辐射时间延长，提取物得率增加，提取物中绿原酸含量趋向稳定。

２．３．２样品预浸泡时间对产品收率的影响

在其它因素相同的条件下，对样品进行不同时间的预浸泡，然后按１．２．１．２方法提取，结果见表４。

５４

表４

２００８年１月第２９卷第１期

样品预浸泡时间对产品收率的影响＊

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表５

酶用量对绿原酸得率的影响

科学研究

Ｔａｂｌｅ４Ｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｐｒｅｓｏａｋｉｎｇｔｉｍｅ

８１９．２６．０３

１２２１．９６．２９

２４２５．７６．７４

＞４８３０．８６．７５

Ｔａｂｌｅ５Ｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｔｈｅｄｏｓｅａｇｅｏｆｃｅｌｌｕｌｏｓｅ

酶用量／ｍＬＣｅｌｌｕｌｏｓｅｄｏｓｅａｇｅ／ｍＬ提取物得率／％Ｙｉｅｌｄｏｆｅｘｔｒａｃｔ／％绿原酸得率／％Ｙｉｅｌｄｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ／％

预浸泡时间／ｈＰｒｅｓｏａｋｉｎｇｔｉｍｅ／ｈ提取物得率／％Ｙｉｅｌｄｏｆｅｘｔｒａｃｔ／％绿原酸得率／％Ｙｉｅｌｄｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ／％

００．５１１．５２２．５３．０６．７３

１７．４４１９．０１２３．２４２７．３６２９．７４３０．２４３０．４６５．７５５．８４６．１２６．４６６．６７６．６９

注：微波辐射功率６００Ｗ，辐射时间２ｍｉｎ。

由表４可知，预浸泡时间越长，提取物得率越高，绿原酸的得率也越高，但超过２４ｈ，提取物的量有所增加，但是绿原酸得率趋向稳定。这表明最佳预浸泡时间为２４ｈ，究其原因可能是长时间浸泡使金银花细胞内的溶质能充分溶出，从而使提取物的得率增加，提取物中绿原酸的含量趋向稳定，说明并不是浸泡得越久越好。

酸的得率，酶用量增加到２．０ｍＬ以后，绿原酸得率和提取物得率均趋于稳定。随着酶用量的增加，金银花提取物的得率和绿原酸的得率都明显增加。这是因为纤维素酶是一类将纤维素水解成水溶性糖的复合酶类，植物的细胞壁主要是由纤维素组成，绿原酸是胞内物质，金银花用纤维素酶处理后，细胞壁中结构致密的纤维素被水解成水溶性的糖类物质，而细胞壁的水解有利于胞内物质的溶出，酶用量的增加使反应速度加快。在绿原酸提取过程中，增加酶解工艺，可使绿原酸得率大大提高。

２．４酶解法优化乙醇回流法提取金银花中绿原酸２．４．１酶用量对绿原酸得率的影响

将纤维素酶配成含量为０．５％的标准酶液，在样品中分别加入０．５、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０ｍＬ酶液，与不加酶液对照，３５℃处理２ｈ。所得结果见表５。

由表５可知，在一定处理时间内，具有相同比活力的酶，酶用量的不同，影响金银花提取物的得率和绿原

表６

２．４．２酶处理温度对绿原酸得率的影响

为优化酶处理温度，设置了２５、３０、３５、４０、４５、

５０、５５、６０℃８个水平。

研究温度对纤维素酶处理效果的影响。试验时每个金银花样品中加酶液２．０ｍＬ，酶处理２ｈ，结果见表６。

温度对绿原酸得率的影响

Ｔａｂｌｅ６

温度／℃Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ／℃

提取物得率／％Ｙｉｅｌｄｏｆｅｘｔｒａｃｔ／％

绿原酸得率／％Ｙｉｅｌｄｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ／％

Ｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆｃｅｌｌｕｌｏｓｅ

３０１９．０１６．２７

３５２３．２４６．６３

４０２７．３６７．１８

４５２９．７４７．３６

５０３０．２４７．１５

５５３０．２４６．５９

６０３０．４６６．１１

２５１７．４４５．９５

由表６可知，温度对酶处理效果有显著影响，随着温度升高，酶分子的运动速度加快，增加了酶分子与底物纤维素结合的机会，提高了反应速度，但温度过高，使酶蛋白变性，失去催化能力，纤维素酶处理的最适温度范围为４０℃～５０℃。

表７

２．４．３酶解时间对绿原酸得率的影响

试验时在金银花样品中加入２．０ｍＬ酶液，酶解温度４５℃，酶解时间分别为０．５、１．０、１．５、２．０、２．５、

３．０、３．５ｈ，金银花提取物的得率和绿原酸得率如表７所示。

酶解时间对绿原酸含量的影响

Ｔａｂｌｅ７Ｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｔｉｍｅｏｆｔｈｅｃｅｌｌｕｌａｓｅ

时间／ｈＴｉｍｅ／ｈ

提取物得率／％Ｙｉｅｌｄｏｆｅｘｔｒａｃｔ／％

绿原酸得率／％Ｙｉｅｌｄｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ／％

１．０１７．４４６．２５１．５１９．０１６．５８２．０２３．２４６．９４２．５２７．３６７．２８３．０２９．７４７．４６３．５３２．１５７．４８４．０３２．２３７．５１

由表７可知，绿原酸的含量及提取物的量随酶解时间的增长而增多，因为延长酶解时间能使金银花中的绿原酸充分溶出，但在３．０ｈ以后增长并不明显，纤

表８

维素酶的最佳处理时间为３．０ｈ。

（见表８）。２．５金银花中提取绿原酸不同工艺比较

由表８说明，用微波处理和酶解处理均可提高

最佳条件下不同工艺提取绿原酸的比较

Ｔａｂｌｅ８

提取方法

Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓ

提取物得率／％

提取物中绿原酸含量／％

绿原酸得率／％

Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓ

水提法Ｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ

乙醇回流法Ｅｔｈａｎｏｌｒｅｆｌｕｘｉｎｇ

微波优化乙醇回流法Ｍｉｃｒｏｗａｖｅｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ酶解优化乙醇回流法ＣｅｌｌｕｌａｓｅｔｒｅａｔｍｅｎｔＹｉｅｌｄｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ／％

３．２３５．７３６．７４７．４６Ｙｉｅｌｄｏｆｅｘｔｒａｃｔ／％

１６．１１７．４２５．７２９．７

Ｃｏｎｔｅｎｔｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｉｎｅｘｔｒａｃｔ／％

３２．９２６．２２５．１

科学研究

食品研究与开发

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５５

胡芦巴种子中半乳甘露聚糖脱色、

脱蛋白工艺研究

张黎明，孙茜＊，赵朝

（天津科技大学生物工程学院，天津３００４５７）

摘

４

要：采用乙醇回流法考察了影响由胡芦巴种子提取的半乳甘露聚糖脱色效果的因素，并应用Ｌ（９３）正交实验设

计优化脱色工艺条件。结论：影响脱色效果的主次因素顺序为；脱色次数＞脱色时间＞料液比，最佳的工艺条件是：脱色时间为１２０ｍｉｎ，料液比为１∶（ｇ／ｍＬ），脱色次数为３次。在此基础上，以蛋白质残余量为指标，比较了Ｓｅｖａｇ法及１２（三氯乙酸法）脱除半乳甘露聚糖中蛋白质的工艺。实验结果表明，ＴＣＡ法脱蛋白效果优于Ｓｅｖａｇ法，最终蛋ＴＣＡ法

白质残余量为１．９２％，多糖损失量为５．３０％。关键词：胡芦巴；半乳甘露聚糖；脱色；脱蛋白

ＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹＯＦＤＥＣＯＬＯＲＩＺＡＴＩＯＮＡＮＤＤＥＰＲＯＴＥＩＮＩＺＡＴＩＯＮＦＯＲＧＡＬＡＣＴＯＭＡＮＮＡＮ

ＥＸＴＲＡＣＴＥＤＦＲＯＭＴＨＥＳＥＥＤＳＯＦＴＲＩＧＯＮＥＬＬＡＦＯＥＮＵＭＧＲＡＥＣＵＭ

ＺＨＡＮＧＬｉ－ｍｉｎｇ，ＳＵＮＱｉａｎ＊，ＺＨＡＯＺｈａｏ

作者简介：张黎明（１９６３－），男（汉），副教授，博士，硕士生导师，主要从事天然产物有效成分的研究与开发。

＊通讯作者：孙茜（１９８３－），女（汉），硕士生，主要从事天然药物的研究与开发。

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绿原酸得率，而酶解优化乙醇回流法绿原酸得率（７．４６％）最高；水提法提取物中绿原酸含量（２０．１％）最低，杂质最多，微波优化乙醇回流法和酶解优化乙醇回流法提取物中所含绿原酸相近，乙醇回流法所得提取物中绿原酸含量（３２．９％）最高，杂质最少。

水提法和醇提法都是绿原酸的传统提取工艺，水提无需溶剂，提取物得率还较高，但绿原酸得率低，粗提取物中杂质多，损失也较大；醇提得率高，杂质含量少，但溶剂消耗量大。可见传统的绿原酸提取方法中都存在着一些缺点，都需要加以优化。

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涂资源综合调查报告［Ｍ］．北京：海洋出版社，１９８７

用纤维素酶处理优化乙醇回流法可以显著提高提取物得率和绿原酸得率，纤维素酶处理的酶用量为０．５％浓度２ｍＬ，其最适处理温度为４０℃～５０℃，最佳处理时间为３ｈ。

［４］王天制，李永梅．金银花的研究进展［Ｊ］．华西药学杂志，２０００，１５

３结论

乙醇回流法是提取金银花中绿原酸的最好方法之一。采用正交试验研究乙醇回流法，可得乙醇回流最佳工艺条件为采用１０倍量７５％乙醇回流提取１．５ｈ。在用乙醇回流前加以微波处理，绿原酸的含量能显著提高，表明微波处理能促进金银花中绿原酸的分离，使提取率增加。且不同的微波辐射时间，预浸泡时间对提取率都有影响，由本研究可得微波辐射的最佳工艺条件为一定功率这一研（６００Ｗ）下预浸泡２４ｈ，辐射２ｍｉｎ。究还表明微波是一种较好的处理手段，它不仅可以提高绿原酸的提取率，而且又简洁、方便、节能、环保。采

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收稿日期：２００７－０３－０４