第2节
基因工程及其应用
自主学习 新知突破
1.简述基因工程的基本原理。 2.掌握基因工程操作工具的作用。 3.理解基因工程的操作步骤。
基因工程的概念及其基本工具1.基因工程的概念理解
2.基因工程的基本工具 (1)基因的“剪刀”:限制性核酸内切酶 ________________(简称限制酶),具 特定的核苷酸序列 , 有特异性,即一种限制酶只能识别一种__________________ 特定的位点 上切割DNA分子。 并在_____________ DNA连接酶 ,连接DNA骨架上的 (2)基因的“针线”:_____________ 脱氧核糖和磷酸 之间的缺口。 ________________
(3)基因的运载体: 受体细胞 。 ①作用:将外源基因送入__________ 噬菌体、动植物病毒 ②种类:质粒、______________________ 等。 ③质粒:存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,是细胞染 自主复制的环状DNA分子 。 色体外能够_________________________
[思考探讨] 的作用部位。
1.基因工程的原理是什么?
2.如图表示一段DNA序列,请确定限制酶和DNA连接酶
提示:
1.基因重组。
2.都是b。
1.限制性核酸内切酶(1)分布:主要在微生物体内。 (2) 特点:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,
并在特定的切点上切割DNA分子。(3)结果:产生两个带有黏性末端或平末端的DNA片段。
2.DNA连接酶 (1) 作用对象:把两个具有相同黏性末端或平末端的 DNA 片段连接起来。
(2)结果:形成重组DNA分子。(3)DNA连接酶与DNA聚合酶的比较: 比较项目 作用对象 作用条件 作用部位 形成化学徤 DNA连接酶 DNA片段 不需要模板 DNA聚合酶 连接游离的脱氧核苷酸 需要模板 磷酸二酯键
连接不同脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖
3.运载体 (1)作用: ①作为运载工具,将目的基因送入受体细胞中;
②通过它在宿主细胞内的复制对目的基因进行大量复制。(2)运载体必须具备的条件: ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制 —— 这是保证目的
基因能在细胞分裂过程中复制并传递给子细胞。②有多个限制酶切点 —— 这是运载体能够接入多种目的基 因所必备的条件。 ③有标记基因 —— 这是检测目的基因是否导入受体细胞中 的重要判断依据。
(1) 基因工程三种工具中,限制酶和 DNA 连 接酶是两种酶工具,前者是切割磷酸二酯键的,后者是连接磷 酸二酯键的。 (2)限制酶和DNA连接酶都是一类酶,而不是一种。
基因工程的步骤及应用1.基因工程的步骤 提取目的基因 ; (1)________________ 运载体 结合; (2)目的基因与__________
(3)将目的基因导入受体细胞; 目的基因的表达和检测 。 (4)______________________
2.基因工程的应用 基因工程与作物育种:
①目的:获得高产
、稳产和具有优良品质的农作物,培育出具有各种抗逆性的作物新品种。 ②实例:抗棉铃虫的转基因抗虫棉。
③意义:抗虫转基因作物的使用,不仅减少了农药的用量、大大降低了生产成本,而且还减少了农药对环境的污染。
3.基因工程与药物研制 (1)实例:用基因工程方法生产胰岛素。
(2) 过程:胰岛素基因与大肠杆菌的 DNA 分子重组并且在大肠杆菌 内获得成功的表达。 __________
[ 思考探讨 ] 生物?
3.生产基因产物的受体细胞为什么常选用微
4.培育转基因动物与转基因植物,常用的受体细胞分别是什么? 提示: 3.因为微生物繁殖快、代谢快、产生的基因产物
多。4.培育转基因动物,一般选用受精卵作为受体细胞;而 培育转基因植物,可选用受精卵或体细胞作为受体细胞。
1.基因工程操作的基本步骤 目的基因:人们所需要的特定基因 提取目 直接分离基因 的基因 取得途径 人工合成基因 ↓ 用同一种限制酶切割质粒和目的基因 目的基因与 加入DNA连接酶 运载体结合 质粒和目的基因结合成重组DNA分子