艾滋病筛查实验室文件

淄博市博山区中医院科室管理规范文件责任部门：检验科 保 管 者：岳巍 编写者：岳巍 审批者：孙俊岭

文件编号：ZBBSZYY-JYK 版 序：2006 第一版

生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 1 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

目第二页、实验室质量保证

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第三页、艾滋病筛查实验室管理制度 第四页、实验室生物安全管理制度 第六页、艾滋病筛查实验室工作制度 第七页、保密管理制度 第八页、废弃物品消毒处理制度 第九页、菌(毒)种管理制度 第十页、爱滋病实验室档案管理制度 第十一页、实验室安全防护 第十三页、实验室感染控制工作安排 第十四页、HIV 测定操作规程 第二十页、仪器设备维护与校准制度 第二十五页、HIV 筛查实验室意外和事故处理 第二十九页、职业暴露情况的危险度评估程序

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 2 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

实验室质量保证

一、 所有实验室人员必须经过上岗前业务培训。 二、 艾滋病筛查人员必须认真执行实验室各项制度和各项 操作规程，并认真作好记录。 三、 使用国家正式批准的艾滋病筛查试剂，并严格注意试 剂的有效期。 四、 每次实验应做阴性、阳性对照，更换试剂或仪器大修 后做室内质控，并做好记录。 每年参加卫生部检验中心的室间质量评价活动，并做好分析 工作。

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 3 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

艾滋病筛查实验室管理制度

一、 保证实验室安全 ,未经允许 ,任何人不得擅自进入 ,工作 人员必须穿、戴好防护用品方可进入. 二、 按照艾滋病实验室的通用生物安全要求,严格执行分区 制度,各区域只用于特定的操作，不得从事其它工作。 三、 仪器和材料的专用制度,仪器、设备、材料、设施均应 按工作区域进行识别，不得交叉混用。 四、 单向流转制度 , 试验材料只能从清洁区流向污染区 , 不 得逆向流转. 五、 废弃物处理制度,所有废弃物应按照 HIV 污染物品,进 行高压灭菌后处理。 六、 离开实验室时，对工作台面、地面等进行消毒清洁处 理，关好水、电、门窗。工作人员离开实验室时，做好 自身消毒清洁工作，不得将任何污染物品

带出实验室。

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 4 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

实验室生物安全管理制度一、 定期对实验室设施、设备、材料等进行检查、维护和更新， 确保其符合国家标准。 二、 每年定期对工作人员进行严格培训，保证其掌握实验室技 术规范、操作规程、生物安全防护知识和实际操作技能， 并进行考核。 三、 实验室工作人员对病原微生物进行采集、运送、接收、保 存、检测等工作应严格遵守相应的制度和规范，以防以外 事故的发生。 四、 指定专门的人员承担实验室感染控制工作，定期检查实验 室的生物安全防护、病原微生物菌(毒)种样本保存和使 用、安全操作、废弃物品处置等规章制度的实施情况。 五、 定期检查、了解实验室工作人员的健康状况，并做好宣传 教育工作，增强责任心，提高安全意识和自我防护能力。 六、 一旦出现实验室工作人员感染事故和病原微生物泄露，立 即启动实验室感染应急预案，报告有关部门，采取控制措修改次数 修改内容 修改日期 修改单号 修改人

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施，防止扩散。 七、 为确保实验室生物安全管理制度的实施，由实验室负责人 每半年系统检查一次。 八、 本制度依据国务院颁布的《病原微生物实验室生物安全管 理条例》而制定。

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 6 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

艾滋病筛查实验室工作制度一、 实验室承担本单位的艾滋病筛查工作，并提供检测前、 后的咨询服务。 二、 艾滋病筛查实验室工作人员必须严格遵守卫生部颁布 的《全国艾滋病检测规范》 ,必须严格遵守实验室制度， 严肃认真地做好艾滋病筛查工作。 三、 艾滋病筛查实验室工作人员必须经培训后上岗，严格 遵守实验室安全制度，保持实验室肃静，防止实验室感 染。 四、 艾滋病筛查实验室工作人员必须遵守标本采集、查对、 处理、测定制度，严格遵守操作

规程，确保筛查质量。 五、 艾滋病筛查实验室工作人员必须严格遵守报告制度和 保密制度，认真做好各项登记工作。 六、 艾滋病筛查实验室工作人员必须严格遵守标本及耗材 处理制度和消毒制度，避免造成环境污染。修改次数 修改内容 修改日期 修改单号 修改人

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 7 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

保密管理制度一、与 HIV/AIDS 相关检测项目的所有资料均应妥善 保管、严格保密，不得擅自修改和销毁，并设专 人负责，明确其职责，包括送检单与检测记录的 保管、 报告单的发放和工作人员年度采血检测等。 二、艾滋病检测实验室所有人员应具有高度的保密意 识。不可对无关人员泄露有关信息。任何单位和 个人不得将艾滋病病毒感染者和艾滋病病人的姓 名、 住址等个人情况公布或传播， 防止社会歧视。 三、HIV 抗体初筛实验室检验的阳性结果不是最终结 果，应及时做进一步确认，初筛实验室不得出具 HIV 抗体阳性的结果报告，更不能告知受检者本 人。 四、所有经确认的阳性标本 ,包括在实验室留存的标 本,应送省级 HIV 抗体确认中心或省级卫生行政 部门指定的单位保存,不得擅自处理。修改次数 修改内容 修改日期 修改单号 修改人

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 8 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

废弃物品消毒处理制度一、血液标本置于合适容器内，加盖盖紧后运送，切 勿污染盛器外部。如果盛器被污染，要用消毒液 消毒。也可将血样置于有盖的塑料管内，外面套 上塑料袋，封口，连同送检单一并运送。有血液 外溢时，立即用消毒液消毒。 二、各种试剂和化学品均应帖有标签，放置于合适的 位置，实验台上不放置不必要的物品。任何测试 用的样品和试剂不宜置于桌面或架子的边缘，以 防滑落打破，污染环境。一旦污染，先在污染区 外围倒入消毒液，逐渐向中心消毒处理。 三、实验室所有垃圾，包括用过的一次性手套和工作 衣，置于黄色的污物袋内，送焚烧炉焚烧。污染 的非一次性工作服应先消毒后再洗涤。 四、所有用过的筛查阴性血液标本，保存一周后，密 闭送焚烧炉焚烧。 五、所用尖锐物品应置于不易刺破的容器内，消毒后 用合适的方法处理。 六、 常用的消毒剂和消毒方法，与

病毒性肝炎消毒法 相同。

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 9 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

菌(毒)种管理制度一、 菌(毒)种保管应有专人负责，保存于加锁的低温冰箱 (-20℃)中或特制的白铁箱中加锁荫暗处、确保菌(毒) 种安全。因工作变动时，必须做好交接工作。 二、 菌(毒)种应有详细登记本，包括名称、分离日期、鉴 定日期、鉴定者、主要鉴定性能(包括形态染色、培养、 生化性质、抗原结构、动物致病力等) ,并注明使用、 转移及销毁情况和原因。 三、 各种菌(毒)种应按规定时间定期移种。一般在每移种 三次后作一次全面鉴定。注意菌(毒)种有无污染和变 异，如发现污染和变异时，应及时更换。 四、 菌(毒)种保存范围及向外单位转移，应按卫生部规定 执行。 五、 全部保存菌(毒)种应具备清单，并定期向部门负责人 报告。

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 10 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

艾滋病筛查实验室档案管理制度一. 艾滋病筛查实验室中的与艾滋病检测有关的所有档案资料 应严格保密，包括送样单与检测记录的保管、报告单的发 放和工作人员年度采血检测等，保密制度纳入年度考核。 二. 艾滋病筛查实验室的所有档案应专人保管，未经批准,不得 转借他人,不得复印,严格按照艾滋病筛查实验室 SOP 中规 定的保密制度。

三、建立艾滋病筛查实验室仪器设备档案,定期对仪器进行校准及检定. 四、建立艾滋病筛查实验室技术人员培训档案 ,根据培训制度, 定期对技术人员进行业务培训,并把证书等存入档案. 六、 建立 艾滋病筛查实验室技术人员的健康监测档案 , 把每年 的健康查体记录存入档案,并将长期保存。

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 11 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

实验室安全防护一、防护服 1、 艾滋病实验室所用的个人防护装备均应符合国家有关标准的要求。 艾滋病实验室应为每个

工作人员配备足够的防护服，包括白大衣、隔 离衣或一次性工作服。 平时应将清洁的防护服置于实验室清洁区内专 用存放处。 2、离开实验室时，应脱去防护服。每次穿过的污染的防护服应及时 放入污衣袋中，待消毒后方可洗涤或废弃。 3、当含有 HIV 的液体(样品或病毒培养液)及有可能溅到工作人员 时，应使用防渗透性的(如塑料)围裙。 4、当发现防护服已被污染时，应立即更换。 5、艾滋病实验室应配备一次性手套、一次性口罩、安全防护眼镜及 冲洗眼睛的装置。 6、艾滋病实验室应配备实验室专用的工作鞋，鞋面覆盖足背，鞋底 防滑。

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 12 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

二、个人保健 1、高标准的个人保健对于减少感染的危险性很重要。皮肤受损、患 病都会增加感染的危险。皮肤的任何伤口和擦伤都应以防水敷料覆 盖。 2、进实验室前要摘除首饰，修剪长的带刺的指甲，以免刺破手套。 3、进入实验室应穿隔离衣，戴手套。如果接触物传染危险性大，则 应戴双层手套和防护眼镜。 4、离开实验室前必须脱去隔离衣，并洗手。 5、严禁在艾滋病实验室内进食、饮水、吸烟和化妆。

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 13 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

实验室感染控制工作安排实验室设立后，由主任岳巍担任感染控制工作负责人，采取 负责人定期检查与实验室人员平时自我检查的原则， 对生物安全 防护、样本的保存和使用、安全操作、实验室排放的废气以及其 他废物处置等的实施情况进行检查。 实验室感染控制工作负责人具有了 HIV 初筛实验室有关的 传染病防治知识， 对实验室工作人员进行控制病原微生物的宣传 和教育，并定期调查、了解实验室工作人员的健康状况。 实验室工作人员出现与 HIV 有关的感染临床症状或体征时， 感染控制工作负责人应及时报告，并派专人陪同就诊，如实告知 医疗机构。 负责人报告后， 应立即启动实验室感染应急处置预案， 并组织人员对该实验室生物安全状况等情况进行调查。 实验室发生 HIV 泄露时，实验室工作人员应当立即采取控制措 施，防止扩散，并同时向

实验室感染控制工作负责人报告。负责 人应采取控制措施，对有关人员进行医学观察或者隔离治疗，封 闭实验室，防止扩散。修改次数 修改内容 修改日期 修改单号 修改人

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 14 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

HIV 测定操作规程一.样本的采集血液是最常见的标本,包括血清、血浆和全血，有时用唾 液或尿液做测试样本。样本采集应按试剂和说明书要求采 集。 采血时一定要注意安全，采用一次性注射器抽取一定量 静脉血(一般采血 3ml) ,室温下自然放置 1 2h,待血液凝 固、血块收缩后再用 3000r/min 离心 15min,吸出血清备用。 采集样本注意事项：采集样本原则上应按临床采血技术 规范操作(试剂盒说明书有特殊要求除外) 。采集样本时应 注意安全，采血用一次性注射器，谨慎操作，防止发生刺伤 皮肤和造成外污染。 采血器皿要清洁干燥， 血液注入容器时， 应取下针头避免过分震荡，以免造成不同程度的溶血，影响 检验结果。

二.样本的保存1、用于抗体检测的血清或血浆样本，应存放于-20℃以下，短期修改次数 修改内容 修改日期 修改单号 修改人

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 15 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

(1 周)内进行检测的样本可存放于 2-8℃。 2、用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样本应冻存于 -20℃以 下， 进行病毒 RNA 检测的样本如需保存 3 个月以上应置于-80℃。 3、用于 CD4 /CD8 T 淋巴细胞测定的样本不能长期保存，样本采集 时间超过 48h 则不可检测。+ +

三.样本的运送1、实验室间传递的样本应为血清或血浆，除特殊情况外一般不 运送全血。 2、应采用 WHO 提出的三级包装系统 (1)第一层容器：装样本，要求防渗漏。样本应置于带盖的试 管内，试管上应有明显的标记，标明样本的编号或受检者姓名、 种类和采集时间。 在试管的周围应垫有缓冲吸水材料， 以免碰碎。 随样本应附有送检单，送检单应与样本分开放置。 (2)第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层 容器， 可以装若干个第一层容器。 将试管装入专用带盖的容器内，修改次数 修改内容 修改日期 修改单号 修改人

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 16 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

容器的材料要易于消毒处理。 (3)第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。 在第三层容器外面要贴标签(数量，收、发件人) 。 3、 血清和血浆样本应在 2 8℃条件下由专人运送。 用于 CD4 /CD8 T+ +

淋巴细胞测定的样本应在室温下 18 23℃运送。每一包装的体积 以不超过 50ml 为宜。 4、运送感染性材料必须有记录。 5、如分离血浆仍有困难，可直接将抗凝血-20℃以下冻存，采用 冰壶冷藏运输，避免冻融。 6、特殊情况下如需对个别样本进行复测，可以用特快专递形式 投寄，但必须按三级包装系统将盛样本的试管包扎好，避免使用 玻璃容器，以保证不会破碎和溢漏。

四.样本的接收1、含有感染性样本的包裹必须在具有处理感染源设备的实 验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的 包裹应进行消毒。修改次数 修改内容 修改日期 修改单号 修改人

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 17 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

2、核对样本与送检单，检查样本管有无破损和溢漏。如发现 溢漏应立即将尚存留的样本移出，对样本管和盛器消毒，同 时报告有关领导和专家。 3、检查样本的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂 过多以及黄疸等情况。如果污染过重或者认为样本不能被接 受，则应将样本安全废弃。并要将样本情况立即通知送样人。 4、打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。样本处理时若 内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进行。同时 应戴口罩、防护眼镜，以防皮肤或粘膜污染。 5、因特殊临床治疗导致自发荧光的样本不可用于荧光方法测 试。 6、接收样本时应详细填写样本接收单。

五. 酶标仪的操作程序1.打开酶标仪电源开关,同时打开计算机和打印机,将仪器预热 二十分钟. 2.在计算机的菜单中,双击“酶标仪软件”,从菜单中选择“检测修改次数 修改内容 修改日期 修改单号 修改人

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 18 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

功能” ,然后调出所用的板型号。 3.按酶标仪面板上的“1”键,选择检测功能,用回车键找到所用 的

程序序号,该程序即被调出. 4.将酶标板放入检测槽内,直接按回车键,仪器自动开始检测. 5.检测完毕后，按酶标仪面板上的“ F1”键,立即点击“数据 接收”按钮，将显示的吸光度数值打印。 6.取出酶标板，关闭酶标仪电源开关；将计算机中的酶标仪程 序退出，关闭电源开关，最后关闭打印机。

六.洗板机的操作程序1.打开电源开关，将酶标板放入酶标板托盘上。 2.在主菜单中选择“冲洗”按钮，在冲洗菜单中选择“换 液”置换出管路中的蒸馏水。 3.回主菜单，选择“洗板” ,在洗板程序中按下“1”后， 选择所需要的洗板程序，仪器将自动按程序进行洗板。 4.返回主菜单，选择“冲洗” ,在冲洗菜单中选择“冲洗” , 用蒸馏水置换出管路中的洗液。关闭电源开关。修改次数 修改内容 修改日期 修改单号 修改人

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 19 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

七.样本的检测详见试剂盒说明书.

八. 结果的报告制度艾滋病筛查实验阴性结果，核对后由具体测定人员签 字后可直接发出阴性报告。HIV 初筛阳性的标本应复查并 重新采样复查，复查阳性的标本应尽快(一般要求 48 小 时)将血样连同原始实验资料(包括试剂种类、厂家、批 号、有效期)和送检化验单由专人送卫生行政部门指定的 艾滋病筛查中心实验室或直接送艾滋病确认实验室进一 步确认。 送检化验单必须由初筛实验室一名直接实验操作人 员和科长签名。初筛实验室不得向受检者宣布初筛阳性结 果。 做好标本的收集和检测登记工作，每月按统一的表格 向卫生行政部门指定的艾滋病筛查中心实验室报告检测 情况。修改次数 修改内容 修改日期 修改单号 修改人

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 20 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

仪器设备维护与校准制度一、酶标读数仪、洗板机每天：核对滤光片波长，检查洗板机管道是否通畅，是否有漏液 现象。 每周：清洁仪器表面，保护光学零件不沾灰尘。 每月：检查洗涤时各孔是否与相应的冲洗头对位良好，负压是否 符合规定要求。 每年：检查、清洗滤光片，如果出现破裂或霉点则要更换。根据 仪器内具有的校准程序或使用校准板， 对滤光片的精密度进行校 准并保留记录。 实验过程中发现异常情况，应随

时进行处理，可根据使用情况更 换必要的部件。

二、移液器1 年至少应该标定 1 次，发现异常情况应随时进行校准。

校准多道移液器时，必须保证每一个加样头都能 够连续、准确地加样。移液器的精密度应在厂家说明修改次数 修改内容 修改日期 修改单号 修改人

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生效日期：2006 年 8 月 1 日 页码：第 21 页 批准日期：2006 年 07 月 20 日

书规定的范围内。用蒸馏水称量法标定移液器： 在室温 22℃无风的工作室中，在万分之一级别天平上放置 一个小三角烧瓶， 用待校准的移液器吸取存放过夜的蒸馏水加入 烧瓶底部，称重并计算蒸馏水重量，连续称重 10 次。加蒸馏水 的量根据待校准移液器的规格而不同(表 6) ,10 次校准称量均 在要求的重量范围内为合格，贴上合格标签，注明校准日期，不 合格移液器要请生产厂家进行校准。填写和保存校准记录。 称重法校准移液器方案 移液器规格 0.5 10μ l 5 40μ l 40 200μ l 200 1000μ l 1 5ml 2 10ml修改次数 修改内容 修改日期 修改单号

蒸馏水量 2μ l 10μ l 70μ l 300μ l 2000μ l 3500μ l

要求重量范围 1.75 2.25 mg 9.8 10.2 mg 69.4 70.6 mg 298.0 302.0 mg 1990.0 2010.0 mg 3485.0 3515.0 mg修改人