大分子提取分离 层析技术 电泳技术
第一章 生物大分子的提取与沉淀分离技术
一、名词解释
1.生化技术:是在生物化学及其相关学科应用的各种技术。主要是指生物体内物质及其代谢产物,特别是生物大分子的分离、检测、制备与改造技术。
2.提取(萃取):是在一定的条件下,用一定的溶剂处理样品,使欲分离的物质充分释放到溶剂中的过程。又称“抽提”或“萃取”。
3..沉淀分离技术:是通过改变某些条件或加入某种物质,使溶液中某种溶质的溶解度降低,从而从溶液中沉淀析出的技术。
4.盐溶:低盐浓度下蛋白质的溶解度随着盐浓度的升高而增加的现象。
5.盐析作用:盐浓度升高到一定程度后,蛋白质的溶解度随着盐浓度的升高而降低,结果使蛋白质沉淀析出,这种现象即为盐析作用。
6.等电点沉淀法:是利用蛋白质在pI时溶解度最低,以及不同的蛋白质有不同的pI这一特性,对蛋白质进行分离纯化的方法。
7.有机溶剂沉淀法:利用不同蛋白质在不同浓度的有机溶剂中的溶解度不同而使蛋白质分离的方法称为有机溶剂沉淀法。
二、填空
1. 现代生化技术的显著特点:是以三高所著称,即:高技术、高投入、及高利润。
2. 生物大分子主要包括: 蛋白质 、 酶 、 核酸 、 多糖 和 脂类 ,它们是生物体内存在的具有特殊生物学功能的高分子化合物。
3. 生化分离技术主要有 沉淀分离技术 分离、 层析分离技术 分离、 电泳分离技术 分离和 超离心分离技术 分离技术。
4. 蛋白质和酶的种类繁多,在提取时应根据其 存在的部位 、分子结构及 溶解性质 的不同选择不同的提取方法。
5. 影响提取的因素主要有 溶剂 、 溶解度 、 温度 、 pH 和 浓度差 等。
6. 水溶液法提取酶和蛋白质时,要注意控制好 盐浓度、 温度、 pH值 等因素。
7. 沉淀分离技术包括 盐析 沉淀、 等电点 沉淀和 有机溶剂 沉淀等技术。
8. 在分段盐析中,在一定的pH和温度条件下,改变离子强度称为 Ks分段 盐析,而在一定的盐和离子强度条件下,改变温度或pH值称为 β分段 盐析。
9. 实验室进行蛋白质盐析沉淀时应用最多、最广的盐是 硫酸铵 。
10. 在核蛋白提取时,应选用0.14mol/L的氯化钠溶液提取 核糖 核蛋白,而选用1mol/L的氯化钠