外源基因在不结球白菜转基因植株后代中的表达(4)

外源基因在不结球白菜转基因植株后代中的表达

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江苏农业学报%00%年第-3卷第-期

［-0］

虫转基因植株。在不结球白菜抗虫转基因植株

植株的叶片为样品，以!"#$%&质粒为阳性对照，非转基因植株为阴性对照，抗性植’#"()*+杂交显示，

株和质粒都含有同一特异杂交条带（图,），这一结果验证了!"#$基因通过有性生殖过程能传递给后

代。

自交后代抗性分析中，我们亦得到相同的结果。由此可见，采用卡那霉素田间筛选方法，即节省了分子检测所需的昂贵费用，又减轻了生物学抗虫性鉴定和田间选育的工作量，有助于加速选择抗虫性遗传稳定的株系。

本试验中极个别具有卡那霉素抗性的植株并未表现出抗虫性能，推测是由于苗床上的幼苗相互覆盖而未喷洒到卡那霉素溶液所致。我们曾对处于抽

对照（非转化植株）；)*+；3：-.,：/0代转基因植株；1.2：&：!空白；-0.-2：!"#$%&；4：/-代转基因植株。

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转基因植株的"#$%&’(杂交"#$%&’(-.-/01*12345-.1+6.*78/-.41

薹期的转基因不结球白菜自交后代的植株再次喷洒较高浓度的卡那霉素溶液，观察到少量植株的心叶和菜薹转白色，取这些植株的绿色叶片进行抗虫性鉴定，结果表明这些植株既不具有卡那霉素抗性也不具有抗虫性能。参考文献：

［-］蔡小宁，佘建明，朱

--,C

［%］王凌健，倪迪安，王光远，等E青菜组织培养和转化系统的初步

建立［F］（-）：C实验生物学报，-444，D%4D.41C

［D］佘建明，蔡小宁，朱［,］张智奇，周

祯，等E普通不结球白菜抗虫转基因植株

的获得［F］（%）：C江苏农业学报，%000，-2&4.3%C

音，钟维瑾，等E慈姑蛋白酶抑制剂基因转化小白

菜获抗虫转基因植株［F］（,）：C上海农业学报，-444，-1,.4E

［1］秦新民，高成伟E小白菜苏云金芽孢杆菌!&.$%基因的遗传转

化［F］（自然科学版），（D）：C广西师范大学学报-444，-&&&.3%C

［2］刘春明，朱［&］刘春明，朱

-20C

［3］G7HA6@@BF，I6<59=JKI，L78<75<9/CL@>;=M>76=>@8<8:，7>7A@675@6N

（%8O;O）［L］E*;PQ@6B：H78M7>#@>OG!6<8:R76A@6$7A@675@6N’6;99，-434C-02-C

［4］毛慧珠，唐

惕，曹湘玲，等E抗虫转基因甘蓝及其后代的研究

［F］（#辑），（,）：C中国科学-442，%2DD4.D,&C

［-0］佘建明，蔡小宁，朱卫民，等E结球甘蓝抗虫转基因植株及其后

代的抗性表现［F］（%）：C江苏农业学报，%00-，-&&D.&2E

祯，周兆澜，等E豇豆胰蛋白酶抑制剂抗虫基因烟祯，周兆澜，等E豇豆胰蛋白酶抑制剂=)*+在大

草的获得［F］（-3）：C科学通报，-44%，D&-24,.-24&C

肠杆菌中的克隆与表达［F］（%）：C生物工程学报，-44D，4-12.

祯，等E建立青菜（%&’(()*’*+),-,()(））农杆

D讨论

毛慧珠、佘建明等用卡那霉素筛选、室内人工饲

喂幼虫和分子检测方法，分别证明了苏云金杆菌杀虫蛋白基因、豇豆胰蛋白酶抑制剂基因可通过减数分裂过程传递给甘蓝转基因植株的子代，/-、/%、/D

代植株的卡那霉素抗性和抗虫性表现符合孟德尔单

［4，-0］

基因分离规律。本研究对不结球白菜转基因植

菌介导法基因转化体系［F］（%）：C江苏农业学报，-44&，-D--0.

株的自交后代/-、/%、/D、/,代的群体植株进行卡那霉素筛选、室内人工饲喂斜纹夜蛾和分子检测，试验结果同样表明豇豆胰蛋白酶抑制剂基因能通过有性生殖过程传递给后代，卡那霉素抗性和抗虫性在转基因植株自交后代中的表达基本符合孟德尔显性单基因的遗传规律。

带有标记基因———新霉素磷酸转移酶基因的抗虫基因作物，经卡那霉素筛选后，不仅在基因转化过程中能及时淘汰非转化植株，而且在转基因植株自交后代的整体植株水平上也能及时淘汰分离的敏感性植株。在结球甘蓝抗虫转基因植株自交后代抗性分析中，发现凡具有卡那霉素抗性的植株均具有一定程度的抗虫性。分子检测进一步确证它们均为抗

万方数据