关于常规杂交育种的各种方法介绍
(二)隔离和去雄
1. 隔离 (isolation)
隔离的目的是防止外源花粉的混入。父本和母本都需要隔离。隔离的方法有很多种, 大致上可分为空间隔离、器械隔离和时间隔离三大类。器械隔离包括网室隔离, 硫酸纸袋隔离等。在育种试验地里, 一般用硫酸纸袋或纱网或尼龙网进行器械隔离。对于较大的花朵也可用塑料夹将花冠夹住或用细铁丝将花冠束住, 也可用废纸做成比即将开花的花蕾稍大的纸筒, 套住第二天将要开花的花蕾。花枝太纤细的材料, 如苦瓜和凤仙等最好用网室隔离。空间隔离一般用于种子生产。时间隔离一般很少采用, 因为时间隔离与花期相遇是一对矛盾。
2. 去雄 (emasculation)
去雄是除去隔离范围的花粉来源, 包括雄株、雄花和雄蕊。对于两性花, 除严格自交不亲和和雄性不育材料外, 在花药开裂前必须去雄, 包括去除雄蕊或杀死隔离范围内的花粉。 去雄时间因植物种类而异。除闭花受精植物(如菜豆和豌豆应在开花前3-5天去雄)外, 一般都在开花前24-48h去雄。
(三)花粉的制备
通常在授粉前一天摘取次日将开放的花蕾, 带回室内, 挑取花药置于培养皿内, 在室温和干燥条件下, 经过一定时间, 花药会自然开裂。将散出的花粉收集于小瓶中, 贴上标签, 注明品种, 尽快置于盛有氯化钙或变色硅胶的干燥器内, 放在低温(0-5 ℃)、黑暗和干燥条件下贮藏。但要注意有些植物的花粉不适宜在干燥条件下贮藏, 如郁金香、君子兰等花粉贮藏的湿度不得低于40%。 也可用蜂棒或海绵头在散粉时收集花粉。番茄等茄科植物也可使用电力震动采粉器采粉。不同植物的花粉寿命不同。如百合花粉在 0.5 ℃、 35% 相对湿度的条件下贮藏 194 天后仍有很高萌发率; 苹果、松、雪松、银杏等的花粉在一般冰箱和干燥器中保存一年以上仍有较高的发芽率; 郁金香花粉在20℃、90%相对湿度下, 贮藏10天后, 萌发率便由45% 降至15%; 萝卜花粉在自然条件下可保持 3 天的生活力; 唐昌蒲花粉在室温下2 天就失去发芽力; 黄瓜花粉在自然条件下4-5小时后便丧失生活力。
经长期贮藏或从外地寄来的花粉, 在杂交前应先检验花粉的生活力。检验花粉生活力的常用方法有以下几种:
1. 形态检验法: 在显微镜下观察, 一般畸形、皱缩的花粉无生活力。