医学生物学实验及习题整理(3)

接复合体使细胞结合在一起；间充质间结合则更多地依赖基质的作用，因此容易分离。

3．细胞的计数方法是什么？

n/4*104 *稀释倍数

4．怎样鉴别死、活细胞？

台盼蓝染色法”。

5. 怎样进行细胞计数？

答：低倍镜下按一定方向逐格计数板内四个角的每格大格中的呈透亮的细胞数。若细胞正好压在格线上，则按数上不数下、数左不数右的原则计数。

实验二 细胞标本的制备与形态观察

蟾蜍软骨细胞、中性红染料、高尔基体粉红色

实验三 细胞无丝分裂和有丝分裂

1． 马蛔虫子宫切片有何特征？

子宫腔内充满处于有丝分裂不同时期受精卵细胞。每个受精卵细胞由厚膜包围，呈灰色。受精卵细胞在膜内进行分裂，此膜只在发育早期紧贴细胞质，在较晚期膜与分裂球之间有清亮的间隙，这是由于分裂球收缩而形成的。

实验四 亚细胞组分的分离及观察鉴定

1. 亚细胞组分的分离及观察鉴定的实验原理是什么？

答：将悬浮液静止不动时，由于重力场的作用，悬浮的颗粒就要逐渐地沉降下来，颗粒越重，下沉越快，反之则上浮。但是颗粒在重力场中的沉降速度并不只是与它的质量有关，还与它的密度、大小和形状有关，此外还与介质溶液的粘度等因素有关。但是当颗粒的大小小于几个微米时，它沉降的速度很慢，而扩散现象非常严重，所以不能仅依靠重力场来观察它们的沉降速度，必须利用高速离心的方法，产生出强大的离心力场，于是就产生了超速离心、分级分离的技术。细胞内不同结构的比重、大小和形态都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同。根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种亚细胞组分分级分离出来。 沉降速度：细胞核>线粒体>微粒体

2. 为什么本实验要在低温下操作？

答：防止亚细胞在分离的过程中被破坏。

3. 用冷玻片滴片有何意义？

答：利于细胞、亚细胞较牢固地贴于片上。

4、线粒体染色：詹纳斯绿

细胞核染色：甲基绿-派洛宁

5、永久制片观察：

苏木精染色，深蓝色线状物或颗粒物为线粒体

镀银染色：深棕色网状结构为高尔基体

第三版块生物大分子的分析方法实验一

生物分子在细胞内分布的分析

1.Feulgen反应的原理是什么？

答：DNA 是遗传的物质基础，主要存在于细胞核中，在60℃ HCl水解作用下，DNA分子中脱氧核糖的C-1’与膘吟碱基形成的糖苷键断裂，在脱氧核糖的C-1’上暴露出游离醛基，醛基与Schiff 氏试剂（无色亚硫酸品红液）反应形成紫红色化合物。这是DNA特有的显色反应；称为福尔根（Feulgen）反应。

亮绿染细胞质，呈绿色。

3.实验中应注意的问题是什么？

答：1. 水解的时间不宜太长或太短水浴温度要保持60℃以上，以保证充分水解以及染液能