多西他赛注射液对血管刺激性与溶血性试验研究

多西他赛注射液对血管刺激性与溶血性试验研究

1

苏宏健，宗

23

爽，苏云明，王

4

忠，黄

炎

4

1.哈药集团技术中心制剂研究室（黑龙江哈尔滨）；2.哈药集团生物工程有限公司（黑龙江哈尔滨）；

3.黑龙江省中医药大学药理教研室；4.哈药集团技术中心

摘要目的：观察多西他赛注射液是否具有血管刺激性、溶血反应。方法：家兔耳缘静脉注射多西他赛注射液

96h对动物和注射部位进行肉眼观察耳局部血管高、低剂量组，每日一次，连续5次，每天给药前及最后给药后48h、刺激情况，停药96h后对注射部位做病理组织学检查；体外不同浓度的多西他赛注射液0.1～0.5ml在2%兔红细胞

混悬液中放置15min～4h，观察对兔红细胞悬液的溶血作用及有无红细胞凝聚作用。结果：多西他赛注射液对家兔血管内皮没有损伤和刺激作用；对兔红细胞没有致溶血作用和凝聚作用。结论：多西他赛注射液用药血管没有刺激性反应，无溶血及红细胞凝聚现象。制剂有关安全性检测结果符合新药申报要求。

关键词：多西他赛注射液；特殊安全性；血管刺激；溶血

中图分类号：R965；R979.1文献标识码：A

文章编号：1006－2882（2012）01－032－02

StudyofDocetaxelInjectiononVascularIrritationandHemolysisTest

SuHongjian，etal

PreparationLaboratoryofTechnicalCenter，HarbinPharmaceuticalGroup

Abstract：Objective：Toobservewhetherdocetaxelinjectionhasvascularstimulation，hemolyzationandagglutination.Methods：Thevascularstimulationassayofdocetaxelinjectiononrabbitatthedoseofhighandlowgroup，qdanimalsandtheearlocalvascularstimulationofinjectionfor5days.Beforeinjectionandafteradministrationof48hand96h，

sitewasthenakedeyeobservation，drugwithdrawalafter96hhistologicexaminationfortheinjectionsite.Invitroeffectsofdif-ferentconcentrationofdocetaxelin0.1～0.5mlin2%rabbitredcellssuspensionplaced15min～4h，observedonrabbiterythrocytesuspensionsofhemolysisandredcellaggregationwithout.Results：Itwasshowedthatthedocetaxelinjectionhadnovascularirritationandinjuryeffectonrabbitvascularendothelialcell.Noevidencesofhemolyzationandaggregationonrab-biterythrocyteinvitro.Conclusion：Thetestresultsofdocetaxelinjectionshowtherearenovascularstimulationonrabbitvas-cularendothelialcellandnohemolyzationoragglutinationonrabbitredbloodcellsinvitro.Theseresultsofpreparationsafetywilljustfitthenewdrugsapplicationreguirements.

Keywords：Docetaxelinjection；specialsafetyevaluation；vascularstimulation；hemolysis

多西他赛为紫杉类药物，通过促进微管双聚体装配成

微管，同时通过防止去多聚化过程而使微管稳定，阻滞细胞于G2和M期，从而抑制癌细胞的有丝分裂和增殖。多西他赛的药理作用比紫杉醇强。临床研究表明，对于蒽环类耐药乳腺癌，多西他赛较紫杉醇有更高的有效率。多西他赛是目前为止蒽环类耐药乳腺癌的二线治疗中最有效的药物；在非小细胞肺癌单药治疗和联合化疗中，多西他赛是最有效的药物之一。本研究按照国家药品监督管理局注射剂研制指导原则有关安全性试验项目要求进行了血管刺激与溶血实验，验证多西他赛注射液的安全性，为临床安全用药提供参考依据。1目的

观察多西他赛注射液是否具有血管刺激性与溶血反应，验证多西他赛注射液的安全性，为临床安全用药提供参考依据。

2材料

2.1供试药物

多西他赛注射液，哈药集团生物工程有限公司，批号：20080601，多西他赛20mg/瓶和多西他赛溶剂1.5ml/瓶。用

2

法：多西他赛的推荐剂量为每三周75mg/m，滴注一小时。计算用药量后先制成预注射液，再注入250ml0.9%的生理盐水中进行滴注，多西他赛的最终浓度不超过0.74mg/ml。实验时，高剂量以生理盐水溶解制成1ml含2mg溶液，低剂量以生理盐水溶解制成1ml含1mg溶液供试验用。2.2阳性对照药

多西他赛注射液，AventisPharmaDagenham，批号D7D372，多西他赛20mg/瓶和多西他赛溶剂1.5ml/瓶，用法用量同上。以生理盐水溶解制成1ml含1mg溶液供试验用。

2.3实验动物

大耳白家兔，体重2.5－3.0kg，雌雄各半，黑龙江中医药大学药物安全评价中心提供，许可证：SYXK（黑）2008－001

2.4实验仪器及试剂

生理盐水（0.9%氯化钠注射液）哈尔滨三联药业有限公司批号：071003B11

甲醛溶液：哈尔滨新春化工产品有限公司批号：20081026，实验时配成10%甲醛溶液用于固定。

离心机：北京医用离心机厂型号：LDZ4－1.2

恒温水浴锅：上海跃进医疗器械厂型号：HH·S11－2－Ⅱ3方法

3.1溶血试验

3.1.1制备2%红细胞悬液

取家兔血10ml，放入洁净盛有玻璃球的三角烧杯中振摇10min，除去纤维蛋白原后，加约10倍量生理盐水（0.9%），摇匀，以2000r/min离心15min，弃去上清液，沉淀红细胞，再用生理盐水反复洗涤至上清液无红色为止，量取血球，以生理盐水配置成2%红细胞悬液。3.1.2测试方法

1－5号管为供试品管，6号取洁净试管7支，进行编号，

7号为阳性对照管。按表1配比量依次加入为阴性对照管，

2%红细胞悬液和生理盐水，混匀后，于37℃±0.5℃恒温水浴放置30min，然后分别加入不同量多西他赛注射液，第6管不加药液，加生理盐水做阴性对照管，第7管亦不加药

生理盐水改加蒸馏水，做阳性对照管，各试管均摇匀后，液，

30min、置37℃±0.5℃恒温水浴中，开始观察放入后15min、

45min、1h、2h、3h、4h有无溶血出现，判断标准见表2

表1溶血试验配比表

试管号

2%红细胞悬液（ml）生理盐水（ml）多西他赛（ml）蒸馏水（ml）

12.52.40.10

22.52.30.20

32.52.20.30

42.52.10.40

52.52.00.50

62.52.500

72.5002.5

7号管红色澄明，管底无红细胞残溶血和红细胞凝聚作用，

结果见表3。留表明全部溶血，

表3溶血实验结果

试管编号1234567

15min－－－－－－+++

30min－－－－－－+++

观察时间45min1h2h－－－－－－－－－－－－－－－－－－+++++++++

3h－－－－－－+++

4h－－－－－－+++

：“－”；“+”，“++”注不溶血，也不发生凝聚凝聚部，“+++”完全溶血。分溶血

4.2血管刺激性实验结果4.2.1目检

给药组、空白家兔耳缘静脉注射供试品和生理盐水后，

阳性药组家兔耳缘静脉注射部位均未见红肿、充血对照组、

等刺激现象。4.2.2镜检

给药组、空白对照组、阳性药组光镜病理组织学检查，

家兔耳缘静脉注射部位血管结构完整，血管内皮细胞无肿

变性、坏死，管壁无炎细胞浸润，管腔内无血栓形成

。胀、

表2

结果

全溶血部分溶血无溶血凝聚

溶血判断标准

现象

管底无细胞残留溶液澄明红色，

管底有少量红细胞残留溶液澄明红色或棕色，

红细胞全部下沉，上层液体无色澄明虽不溶血，但出现红细胞凝聚，振摇后不能分散

3.2

血管刺激性试验

雌雄各半，分四组，每组3只。多西他赛取家兔12只、

高剂量和低剂量组以无菌注射器每日给家兔左耳耳缘静脉缓慢注多西他赛注射液5ml/只，空白对照组家兔左耳耳缘静脉注等量生理盐水溶液，阳性组家兔左耳耳缘静脉注等

均每天一次，连续五次，每天量阳性药物多西他赛注射液，

96h对动物和注射部位进行肉眼给药前及最后给药后48h、

观察耳局部血管刺激情况，观察结束后，处死家兔，剪取注

HE射部位耳，放入10%甲醛溶液中固定，石蜡包埋，切片、

染色，光镜下观察血管有无变性和组织坏死。4结果

4.1溶血试验结果

4小时内观察，1－6管溶液红细胞下沉，上层液体无色澄明，振摇后红细胞能完全分散，表明供试品和生理盐水无

组织多普勒Tei指数评价尿毒症患者左室功能

毕秋香，巨

兰，杨

军

大庆油田总医院（163001）

摘要目的：探讨组织多普勒Tei指数在评价尿毒症患者心脏功能损害的价值。方法：将46例尿毒症患者及30例正常人分别进行二维超声心动图（2D）各参数及EF、FS、二尖瓣脉冲及组织多普勒检测，分析两组间各项指标差LVDd、LVDs明显増大，IVSd、IVSs、LVPWs、LVPWd显著增厚，LVM显著增重异。结果：尿毒症组较对照组比较LA、（P＜0.01）。两组左心功能参数比较EF、FS、E无统计学差异，A、VA较对照组增大，E/A、VE、VE/VA均较对照组减

TDI－Tei较对照组明显增大（P＜0.01）。结论：尿毒症患者2D表现与正常组相比有明显差异，Tei指小（P＜0.01），

有效地评价尿毒症患者的左心功能，特别是在收缩功能正常情况下早期提示舒张功能障碍。数能够简便、

关键词：尿毒症；组织多普勒；Tei指数；心功能；超声心动图

中图分类号：R445.1

文献标识码：A

文章编号：1006－2882（2012）01－034－02

InvestigationoftheTissueDopplerTeiIndexinEvaluation

ofLeftVentricularFunctioninUremiaPatients

BiQiuxiang，etal

DaqingOilFieldGereralHospital（163001）

Abstract：Objective：ToinvestigatethetissueDopplerTeiindexintheevaluationofcardiacdysfunctioninpatientswithuremiavalue.Methods：46patientswithuremicpatientsand30normalsubjectsweretwo－dimensionalechocardiography（2D）andtheparametersEF，FS，andtissueDopplermitralpulsedetection，analysis，differencesintheindicatorsbetweentheLVDd，LVDswasZenglarge，IVSd，IVSs，LVPWs，LVPWdtwogroups.Results：InuremicgroupthaninthecontrolgroupLA，

significantthickening，LVMsignificantweightgain（P＜0.01）.TwosetsofparametersofleftventricularfunctioncomparedFS，Enosignificantdifference，A，VAthanthecontrolgroupincreased，E/A，VE，VE/VAthanthecontrolgroupde-EF，

creased（P＜0.01），TDI－Teithanthecontrolgroupsignificantlyincreased（P＜0.01）.Conclusion：2DperformanceinTeiindexcanbesimpleandeffectiveevaluationuremicpatientscomparedwiththenormalgroupweresignificantlydifferent，

ofleftventricularfunctioninpatientswithuremia，especiallyinthecaseofnormalsystolicfunction，diastolicdysfunctionearlytips.

Keywords：uremia；tissueDoppler；Teiindex；heart；

echocardiography

注多西他赛注射液对血管无刺激性，无溶血作用。表明多

西他赛注射液安全性好，制剂有关安全性检测结果符合新

可供临床应用。药申报要求，

参考文献

［1］陈奇.中药药理研究方法学，.北京：人民卫生出第2版［M］2006：157.版社，［2］王治乔，袁伯俊.新药临床前安全性评价与实践［M］.军事

1997：164.医学科学出版社，

5

结论

多西他赛注射液用药血管没有刺激性反应，无溶血及红细胞凝聚现象。6讨论

本实验采用的方法简便、准确、可靠，严格遵照相关指导原则指标检测多西他赛注射液均未出现阳性结果，说明

［3］国家食品药品监督管理局.《化学药物刺激性、过敏性和溶血

课题研究组.化学药物刺激性、过敏性性研究技术指导原则》，2005.和溶血性研究技术指导原则［M］

［4］徐叔云，M］.北京：人民卫卞如廉.药理实验方法学，第3版［

生出版社.

收稿日期：2011－11－30