细胞培养及无菌操作(2)

你还在为没有做过细胞培养实验而烦恼吗？你还在为做细胞实验而痛苦吗？看了这个《细胞培养的有关名词及其概念》相信一定会释疑我的烦恼

液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80℃）、空调、二氧化碳缸瓶、边台（书写实验记录）。

必须放在无菌间的设备：离心机（收集细胞）、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱（孵育培养物）、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱（放置serum和培养用液）。

二 无菌操作

一 无菌室的灭菌：

1.定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者

0.5％过氧乙酸擦拭。

2.CO2孵箱（培养箱）灭菌：先用3‰新洁尔灭擦拭，然后用75％酒精擦拭或者0.5％

过氧乙酸，再用紫外灯照射；

3.实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟；

4.实验后灭菌：用75％酒精（3‰新洁尔灭）擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台。

二 实验人员的无菌准备：

1.肥皂洗手；

2.穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋；

3.用75％酒精棉球擦净双手。

三 无菌操作的演示：

1.凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75％酒精擦拭瓶子的外

表面；

2.靠近酒精灯火焰操作；

3.器皿使用前必须过火灭菌；

4.继续使用的器皿（如瓶盖、滴管）要放在高处，使用时仍要过火；

5.各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸；

6.吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染；

三 器械的清洗和消毒

玻璃器械洗消：

一、新的玻璃器皿的洗消：

1.自来水刷洗，除去灰尘。

2.烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物。