一株蛋白酶产生菌的分离鉴定(3)

２００９年１９（２）

生物技术

５３

对结果表明，该分离菌株与产碱假单胞菌有１００％的相似性，但是其却不在同一个分支上。

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可能是菌株变异主要的原因。

吐曼河河水常年受到各方的污染，诸如２００２年，杜新宪通过ＧＨＺＢｌ—１９９９地表水环境质量标准Ｓ指标证实吐曼河水质已经受到一定程度的污染，水质属于三类，主要超标项目为硫酸盐、总硬度、悬浮物和大肠菌群数等。他指出，喀什市的工业废水（地区火电厂、地区肠衣厂和小皮革厂等）和生活污水（养猪场、厕所、洗车场、饲养废水和生活污水）是吐曼河的主要排放污染源【ｌ引。本研究分离到的产蛋白酶的细菌对推动喀什本土微生物的开发利用和本地区微生物的研究，同时也为吐曼河的生物治理提供可参考数据。

参考文献：【１］Ｍａｌａ

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２．３．３菌株酶活的测定

４０℃、ｐＨ６．２下分离菌株的粗酶酶活达到１６８ＩＪ／ｍｌ。

３讨论

基于生理生化实验和１６ＳｒＲＮＡ序列分析，对喀什市吐曼河分离的一株细菌进行分离鉴定。实验结果表明，该分离菌Ｇ’，球状。需盐但不耐盐，ｐＨ耐受范围是ｐＨ６．２—７．８，产蛋白酶。１６ＳｒｌｌＮＡ序列分析表明，该细菌与类产碱假单胞菌（Ｐ．

［９］Ｓｎ越Ｐ．Ｈ．Ａ．，Ｍａｉｒ，Ｎ．Ｓ．。娜。Ｍ．Ｅ．，ａｎｄ

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ｐ鲫疡口ｆｃ口ｆｉｇ执甜）１６ＳｒＲＮＡ序列有１６０％的相似性。所以，初步

推断该细菌属于Ｐｓｅｕ＆ｍｍｎａｓ属。因此，本研究将推动本地区

本土微生物的基础和应用研究。

序列比对结果表明，该分离菌株与产碱假单胞菌有１００％的相似性，但是其却不在同一个分支上。该结果表明，类产碱假单胞菌（Ｐ．ｐ删ｄ∞妇￡酱册岛）存在种属的多样性，遗传漂变很

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脂肪酶菌种的筛选、鉴定及酶学性质研究

胡长浩，施文芳，沈麟，林琳’

（福建师范大学生命科学学院，福建福州３５０１０８）

摘要：目的：筛选耐热脂肪酶产生菌并研究其酶学特性。方法：以固体平板法筛选产酶菌株，单因素和分子进化树分析确定产酶条件、酶学性质及分类地位。结果：产酶条件初步确定为２０７０糊精、３％酵母膏、ＭｇＳＯ， ７ｄｄＨ２００．１％、ｌ＜２ＨＰ０４０．１％、ｃ．ｃ１２０．１％、三丁酸甘油酯乳化液０．１％，起始ｐＨ７．０，装量为５０ｍ／ｄ２５０ｍＬ摇瓶，发酵温度及周期为３５℃，２２ｈ。酶学性质表明：较适作用温度，ｐＨ分别为４５。Ｃ，１０．Ｏ，在ｐＨ５．０～１１．０范围内稳定；该酶具有较好的热稳定性，６０℃下温浴３０ｍｉｎ仍保留７７％的活性；可水解长链油脂（Ｃ培：Ｏ）；Ｏ．０１％的ＳＤＳ及ｌＯｍｍｏｌ／Ｌ的Ｐｂ２＋、Ｂｆ＋抑制该酶的活性，０．０５％的ＥＤＴＡ没有影响，０．０１％的ＴｆｉｔｏｎＸ一１００、Ｔｗｅｅｎ８０及ｌＯｍｍｏｌ／Ｌ的Ｋ＋有促进作用；１６Ｓ

结论：获得了一株耐热脂肪酶产生菌ＦＬ一１２，并初步鉴定为Ｓｔａｉｏｈｙ／ｏ锄ｘ＇ｕｓ衄舰口。

关键词：葡萄球菌脂肪酶；热稳定性；筛选；酶学性质；１６ＳｒＤＮＡ

ｒＤＮＡ的分子进化树分析表明，该菌株与＆印锄沁蝴口删有最紧密的亲缘关系。

文章编号：１００４—３１１ｘ（２００９）０２—００５３—０６

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中图分类号：Ｑ９３９．１１５

文献标识码：Ａ

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