骨髓间充质干细胞移植急性一氧化碳中毒迟发性(4)

邢红霞，等. 骨髓间充质干细胞移植急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠星形胶质细胞及髓鞘的变化 www.CRTER

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入法和腹腔内气体注射法[12-13]，本实验采用腹腔内气体注射法制作动物模型，首次以剂量为100 mL/kg注射一氧化碳气体后大鼠很快昏迷，皮肤呈现樱红色，与急性重度一氧化碳中毒的临床表现相似，以后每隔3 h以 60 mL/kg的剂量维持，连续注射4次。

治疗DEACMP常用的方法包括：高压氧治疗、紫外线照射充氧自血回输治疗[14]、药物治疗及对症支持治疗，目前最常用的方法是高压氧治疗，它能迅速纠正机体缺氧状态、有效改善循环、加速细胞的再生和修复等积极作用，在一定程度上可以缓解DEACMP患者的临床症状。但是，高压氧治疗及对症支持治疗不能从根本上有效改善患者的病情。因此到目前为止还没有特别有效的治疗方法，这一问题仍需要进行探索。

骨髓间充质干细胞是骨髓细胞中除造血干细胞之外的具有自我更新及多向分化潜能的干细胞[15]，形态为成纤维细胞的形态，本实验培养的细胞形状为梭形或者多角形，在形态上符合其特点。骨髓间充质干细胞可表达多种细胞表面标记物，但到目前为止还没有发现那一种标记物具有特异性，到目前为止比较公认的表面标记物是缺乏CD34、CD45、CD31等的表达，而表达CD29及CD44等[16]，本实验选用CD44及CD34对细胞进行鉴定，结果显示：细胞表面标记物CD44表达阳性，而CD34阳性细胞偶有零星表达，符合该细胞的特点。有实验提示骨髓细胞体外培养、纯化至第3代或第4代经表面标记物标记显示骨髓间充质干细胞的纯度可达到90%以上，本实验结果提示培养至第4代时阳性细胞的构成比为92.0%，细胞活力好，与其他人的研究结果基本相符。

星形胶质细胞是哺乳动物脑内广泛存在的一种细胞，胶质纤维酸性蛋白是成熟星形胶质细胞的特异性蛋白。星形胶质细胞在正常生理状态下对神经元起支持，营养，保护和绝缘作用。在脑损伤后，星形胶质细胞会反应性升高，这有助于神经的保护和神经功能的恢复。本实验结果显示：胶质纤维酸性蛋白的表达在6，12，24 h干细胞移植组明显高于对照组(P < 0.05)，可能是骨髓间充质干细胞进入脑内以后上调了星形胶质细胞的反应性，同时通过分泌的多种因子增强了星形胶质细胞的Na+

依赖性转运体经过“谷氨酸-谷氨酰胺”循环清除兴奋性神经递质的功能，减轻了氧化应激反应而起到保护作用。同时本实验结果显示：6，12 h干细胞移植组大鼠脑内髓鞘的平均吸光度值明显升高，表明骨髓间充质干细胞移植以后通过细胞本身以及它与其他细胞的协同作用分泌了多种神经营养因子改变了局部微环境，改善了神经髓鞘的营养状态，抑制了自由基及各种兴奋性氨基酸的损伤，促进了脱髓鞘的再生。同时本实验发现，6，12，24 h干细胞移植组大鼠脑内髓鞘的平均吸光度在2周时比第1，3，4周高，说明细胞移植后的积极作用在一二周最明显，2周后作用开始减弱。

ISSN 1673-8225 CN 21-1539/R CODEN: ZLKHAH

万方数据

本实验发现骨髓间充质干细胞经左侧颈动脉移植到DEACMP大鼠体内后可以增加星形胶质细胞反应性，促进髓鞘的再生。移植的最佳时机为发病后的6~24 h之间。细胞移植后的积极作用在一二周最明显，2周后作用开始减弱。

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