水分胁迫对番茄幼苗叶片和根系中多胺代谢的影(2)

98西北农林科技大学学报(自然科学版)第37卷

wasindicatedthattherewasasignificantpositivecorrelationbetweenPAs(SpdandSpm)contentsandPAOactivityinleavesandrootsoftomatoseedlings,andpolyaminesmetabolisminleavesandrootswascorrelatedevidently.Acloserelationshipbetweenpolyaminesmetabolismandtomatodrought2resistancewasfound.

Keywords:tomato;waterstress;polyamine;enzymeactivity;droughtresistance

　　水分胁迫是植物所处逆境中最普遍的形式之一,它严重制约了干旱地区农业生产的可持续发展。番茄(SolanumlycopersicumL.)是设施蔬菜的主栽品种,在其生育过程中,对水分的要求较高,水分胁迫对其生理代谢有显著影响。多胺(Polyamines,PAs)是一类广泛存在于原核生物及真核生物中具有强烈生物活性的低分子量脂肪族含氮碱,是进化中高度保守的有机多聚阳离子。高等植物含有的多胺主要有腐胺(putrescine,Put)、亚精胺(spermi2dine,Spd)、精胺(spermine,Spm)和其他胺类物质,

毒、浸种、28℃恒温催芽后,选取出芽一致的饱满种

子播入装有营养基质的带孔营养钵中育苗,温室昼温25～30℃,夜温15～18℃。待第6片真叶展开时,挑选整齐一致的幼苗定植于通气水培装置,加Hoagland营养液进行预培养,调节营养液pH为6.5±0.1,用通气泵间歇通气供氧40min/h。预培养7d后,通过在营养液中加入不同质量浓度(0g/L(CK),50g/L(T1),75g/L(T2),100g/L(T3))的PEG6000,每处理3次重复0d取样,选取生(,且不同时间换株取3次,指标测定时各样品重复3次。试验期间每天向水培槽中补充营养液至标记刻度。1.3　测定指标与方法

1.3.1　PAs含量的测定　在刘俊等[8]方法的基础

以游离态、结合态和束缚态3种形态存在[1]。近几十年来的研究表明,育,抑制乙烯合成,控制性别分化、等功能,,上,对甘蔗[2]25]、6]大豆[7]的研究表明,。

本研究以番茄为材料,用聚乙二醇(PEG6000)模拟水分胁迫,于番茄幼苗长至6叶一心后进行水培处理(便于控制,避免其他因素的干扰),研究水分胁迫下番茄幼苗叶片、根系中多胺含量、精氨酸脱羧酶(argininedecarboxylase,ADC,EC4.1.1.19)、鸟氨酸脱羧酶(ornithinedeearboxylase,ODC,EC4.1.1.17)和多胺氧化酶(polyamineoxidase,PAO,EC1.5.3.3)活性的动态变化,探讨番茄体内多胺代谢与抗旱的关系,以及内源多胺在番茄幼苗抗旱性中的作用,以期为植物抗旱性的深入研究提供理论依据。

上稍加变动。取冰冻样品1.0g,加入6mL预冷的体积分数5%高氯酸冰浴研磨,冰浴浸提1h后离心(12000r/min、)。取1mL上清液加入30min、4℃

到10mL带盖塑料离心管中,加入20μL苯甲酰氯,再加入1mL2mol/LNaOH,涡漩1min后于37℃水浴反应30min。加入2mL饱和NaCl溶

液,混匀后用2mL乙醚萃取,5000r/min离心5min后,取1mL醚相真空干燥,用1mL甲醇涡漩溶解后过0.45μm的滤膜。取10μL用Shimadzu(岛津)LC22010A型高效液相色谱仪检测:紫外检测器,层析柱为反向C18柱,流动相为V(甲醇)∶V(水)=60∶40,流速0.7mL/min,柱温30℃,检测波长230nm。以腐胺、亚精胺、精胺标准品(Sig2ma产品)制备标样,作标准曲线。多胺含量单位为(以鲜质量计算)。“nmol/g”

1.3.2　ADC、ODC活性的测定　参照赵福庚等[9]

1　材料与方法

1.1　材　料

供试番茄品种为‘毛粉802’,由陕西杨凌西北农林科技大学农城种业科技中心提供;采用营养液

水培法,以聚乙二醇(PEG6000)为渗透剂模拟水分胁迫。1.2　试验处理

的方法并略加修改。取1.0g冰冻材料,加入5mL

预冷的提取液(100mmol/L磷酸缓冲液,pH为8.0,内含5mmol/LEDTA、0.1mmol/L苯甲基磺

试验于2007209～12和2008202～05在西北农

林科技大学试验温室内进行。精选番茄种子,经消酰氟、1mmol/L磷酸吡哆醛、0.1%聚乙烯吡咯烷酮、5mmol/L二硫苏糖醇、20mmol/L抗坏血酸、