EGFR检测在肺癌中的临床意义(2)

EGFR检测在肺癌中的临床意义

明显高于正常肺组织,而且EGFR在正常肺组织、癌前病变和肺癌组织中的表达是逐级升高的。他的研究同时发现:

EGFR在细胞膜和细胞浆中均高表达,细胞浆中EGFR的表

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族与肿瘤复发之间关系的研究中均采用免疫组化法。

然而免疫组化法同时具有三大缺点:①受检测者主观影响大;②是一种定性检测,不能定量;③必须有一定的细胞数量;因此大多数免疫组化研究只能以可以手术的病例为研究对象。这些缺点使得采用免疫组化法的研究有一定的片面性。如:1999年PeterT等[13]298例NSCLC,但以

T2,这必然导致在研究,研究结果

达与肺鳞癌的预后有关(P=0104),而细胞膜上EGFR的表达与肺鳞癌的预后无关(P=0120)。1999年Polosa等[11]在对肺癌组织中EGFR表达的研究中同样采用了免疫组化法,结果亦证实支气管上皮细胞的细胞膜高表达EGFR。大多数用免疫组化法对EGFR在肺癌中分布和表达情况的研究证实:在正常肺组织中EGFR的表达很低;,SCEGFR过度表达,NSCLC。因此,目前有大量的研究试图用更对患者的创伤小、应用范围广的方法测定EGFR。

2.2.2　ELISA　ELISA是一种定量检测血清、血浆或组织中

虽然EGFR,但

EGFR与淋巴结转移、。Milas等[12]在2003年用免疫组化法检测了29例非小细胞肺癌脑转移患者

的EGFR的细胞外结构域(ECD)含量的方法。ELISA用于检测EGFR开始于19世纪80年代,AbeY等[18]在1987年用

ELISA法分别检测了血清和血浆中EGFR水平,他们认为ELISA法是一种检测EGFR较为敏感的方法。其后有大量的

肿瘤组织切片中EGFR、cyclooxygenase2(COX22)和BAX的表达。结果EGFR、cyclooxygenase2(COX22)和BAX均与肺癌淋巴结转移有关。1999年Peter等[13]研究了298例NSCLC肿瘤组织(包括116例腺癌、33例大细胞癌、119例鳞癌、9例混合细胞癌、4例其他类型癌;67例T1期、108例T2期、18例

T3期、4例T4期;133例N0期、31例N1期、32例N2期、1例N3期)EGFR的基因扩增和蛋白表达情况,结果13%的NSCLC高表达EGFR,而且EGFR的高表达与肿瘤大小、是否

研究针对用ELISA法检测EGFR。Sasaki等[19]在2003年用

ELISA法检测了106例肺癌患者血清中EGFR的表达,其结

果显示有淋巴结转移的NSCLC患者血清中EGFR平均水平为231515+/-201065fm/ml,无淋巴结转移的NSCLC患者血清中EGFR平均水平为161390+/-101970fm/ml,他们认为:血清中EGFR水平与淋巴结转移有关。Min2Jeong等[8]在

2000年用ELISA法检测了38例颈部肿瘤患者血清中EGFR

有淋巴结转移以及生存期无关。Nicholson等[14]在2001年发表的一项荟萃分析中总结了从1985年至2000年9月

PubMed收录的所有有关EGFR的文献。他们发现:有两百多

的水平,他们认为ELISA法检测EGFRECD是一种较好的对颈部肿瘤发展检测的方法。

ELISA法有以下优点:①可定量检测;②有标准曲线作

个研究结果证实EGFR的表达水平与肿瘤患者的预后有关;

10种肿瘤的癌组织高表达EGFR并与预后有关;在头颈部肿

对比;③重复性好;④对患者的损伤小;⑤方便;⑥不需要获取肿瘤细胞。临床上大量无法手术的患者可以用ELISA法检测外周血中的EGFR。ELISA弥补了免疫组化在临床应用中的不足。因此,ELISA法检测EGFR将有很好的临床应用前景。但ELISA同时具有两大缺点:①它是一种间接测定法,不能直接测定EGFR;②需要有已标记的纯抗体或抗原。

Pfeiffer等[13]在1998年分别用免疫组化法和ELISA法检

瘤、卵巢癌、膀胱和食管癌中有70%的研究认为EGFR是有效的判断预后的指标;在胃癌、乳腺癌、子宫内膜癌中有

52%的研究认为EGFR是判断预后的指标;但在NSCLC中仅

有30%的研究认为EGFR与预后有关。最近的一项对20000名患者生存期与EGFR表达之间相关性的荟萃分析[15]表明:在头颈部肿瘤、卵巢癌、膀胱和食管癌中EGFR与预后密切相关,但与肺癌预后的相关性差。

今后,对EGFR检测的标准化和免疫组化检测EGFR磷酸化程度或EGFR活性可能可以使EGFR成为更可靠的预后指标。

2.2　EGFR的检测

2.2.1　免疫组化法　免疫组化法是一种有效的检测实体瘤

测了190例肺癌患者肿瘤组织中EGFR的表达水平。其检测结果显示:用ELISA法检测的肺癌患者肿瘤组织EGFR的中位表达为110nmolEGFRg-1,其表达范围是011～2619nmol

EGFRg-1,ELISA法和免疫组化法之间的密切相关(相关系

数为0163,P<01001)。

2.2.3　EGFR的基因检测　随着基因检测方法的不断提高,

组织标本中蛋白质水平的方法[16],在病理实验室中广泛应用。免疫组化法具有以下优点:①保留了原有组织结构;②可以反映抗原或抗体活体状态下的细胞内定位;③易于区分良恶性细胞;④只要小块组织标本;⑤无放射污染。由于以上优点,免疫组化法在EGFR表达水平的研究中最为常用。例如:Chandrika等[10]在2002年对60例NSCLC肿瘤组织中

EGFR分布的研究、1999年Polosa等[11]在对肺癌组织中EGFR表达的研究、LaiWW[17]在2001年对表皮生长因子家

目前人们已经可以通过多种手段检测某一段基因。常用的方法有PCR、RT2PCR(逆转录2聚合酶链反应)、quantitativere2

al2timePCRsystem(Taqman,定量实时PCR)、Southern杂交、Notrhern杂交、原位杂交。Clarke等[21]在2003年用RT2PCR

法检测了43例肿瘤患者血清中EGFR的基因,结果10例

NSCLC患者中有3例EGFR阳性,11例胰腺癌患者中有2例EGFR阳性,16例直肠肿瘤患者中有2例EGFR阳性。他认

为用RT2PCR法检测血中EGFRmRNA值得进一步研究。