盐生杜氏藻软胶囊中β, β-胡萝卜素几何异构体组成的测定
※分析检测
估算出顺式异构体的吸光系数(见表1)。
表1 β,β-胡萝卜素顺式异构体吸光系数的估算
食品科学
2008, Vol. 29, No. 06287
提的。本研究的结果表明:各β,β-胡萝卜素顺式异构体的吸光系数是不同的。根据各组分色谱的峰面积,经过吸光系数的换算,所得结果见图10(b)。显然,图10(b)所示结果更真实地反映了盐生杜氏藻软胶囊内容物中β,β-胡萝卜素几何异构体组成。
Table 1 Estimation results of absorptivity of β,β-carotene E-isomer
异构体种类
KZ*吸光系数(A1c**)m
1%
全反式异构体9,9'-顺式异构体13,13'-顺式异构体
94.5772500
78.7592018
75.3111990
注:*:见式(1);**:光程为1cm时浓度为1%(W/V)的溶液吸光系数。
3.50002.5000吸光度
1.50000.5000-0.5000
0.00
Ⅰ
2.5几何异构化对分子电子吸收光谱特征的影响
Ⅲ
当β,β-胡萝卜素全反式异构体发生异构化时,其光谱特征亦发生变化。所有顺式异构体与全反式异构体相比,在342nm处会出现一特征性吸收峰,亦称“顺式峰”。同时,当全反式异构体发生顺式构型变化时,其电子吸收光谱主吸收段发生明显“紫移”,λmax紫移可达9nm(图8)。从图8可以看出:顺式异构化位置越靠近分子中部,电子吸收光谱“紫移”越明显。
1.1000
13-顺式异构体
0.90000.7000吸光度
0.50000.30000.1000-0.1000
300
350
400450
波长(nm)
500
550
Ⅱ
5.0010.0015.0020.0025.00
保留时间(min)
I.全反式异构体;II.13-顺式异构体;III.9-顺式异构体。图9 盐生杜氏藻软胶囊内容物的C30-HPLC色谱图
Fig.9 C30-HPLC-PDA chromatogram of Dunaliella salina soft-gel
capsule containing52.40%
44.07%
39.52%
45.92%
图8 β,β-胡萝卜素几何异构体的电子吸收光谱图
Fig.8 Electronic absorption spectra ofβ,β-carotene geometrical
isomers
8.08%
Ⅰ
aⅡ
Ⅲ
10.01%
ⅠⅡ
b
Ⅲ
a.色谱峰面积结果;b.经过吸光系数换算的结果。Ⅰ.全反式异构体;Ⅱ.
实际上,β,β-胡萝卜素全反式异构体的顺式异构化除了导致光谱精细特征发生变化外,其光吸收强度也有所改变。与全反式异构体相比,顺式异构体在λmax处的吸光能力下降,同时,在342nm处的吸光能力上升,形成顺式特征峰。顺式异构位置越靠近分子中心,二者的变化值越大。这一消长规律在客观上反映了β,β-胡萝卜素全反式异构体分子顺式异构化所导致的在λmax处的吸光系数下降与顺式特征峰强度增加之间的关系[6]。2.6
盐生杜氏藻软胶囊内容物中β,β-胡萝卜素几何异构体组成
图9为盐生杜氏藻软胶囊内容物的C30-HPLC色谱图。根据其色谱行为和光谱特征可对其中各β,β-胡萝卜素几何异构体组分进行定性。
由于β,β-胡萝卜素顺式异构体参比样品的缺乏,在一般的检测中只能根据其色谱的峰面积进行测定,其结果见图10(a)。这样做是以各组分的吸光系数相同为前
13-顺式异构体;Ⅲ.9-顺式异构体。
图10 盐生杜氏藻软胶囊内容物中β,β-胡萝卜素几何异构体的组成Fig.10 Geometrical isomer composition ofβ,β-carotene from
Dunaliella salina soft-gel capsule containing
参考文献:
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