第2期王天然 等 槲皮素干预实验性慢性肾功能衰竭大鼠肾脏组织病理改变 4
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槲皮素(Quercetin)是广泛存在于植物中的一
种黄酮类化合物,对人类具有防治多种疾病的有益作用,如祛痰、止咳、平喘、心血管保护、抗血小板聚集、抗癌、抗溃疡、抗变态反应、抗病毒、抗
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炎及白内障预防等。国内有实验研究结果显示,槲皮素对糖尿病性肾病有防治作用。我们研究了槲皮素对动物实验性慢性肾功能衰竭的干预作用,对肾脏组织、细胞病理改变的影响,现将结果报告如下。1 材料和方法111 槲皮素
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组织,分别在分析天平上称重(mg);②计算肾脏
指数:肾脏指数=平均单肾重(mg)/体重(g);③参照脑组织水份含量测定烘干法测定肾组织水份
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含量(重量百分率)。11512 肾脏病理学检查上述实验肾脏称重后从中间纵向剖开并切取约1mm厚片以4%,,常规H,5(羟脯氨酸测定)
1片,约500mg,剪碎,置组织匀浆器中,以生理盐水制成10%匀浆。参照
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尿液羟脯氨酸的测定方法,以分析纯明胶为标准品作标准曲线进行测定。试剂自配,所用化学试剂均为国产分析纯。11514 肾组织细胞NF-κB检测制做病理切片时另制1套白片,按免疫组织化学染色法检测肾组织细胞NF-κBP65。兔抗NF-κBP65抗体及免疫组织化学试剂盒均购自博士德公司;DAB(3,3’-二氨基联苯胺)为国产,显色底物液自配;其他试剂自备。116 统计学处理
准。。112 实验动物
SD大白鼠。购自四川抗菌素工业研究所,合格证号2001-23。雌雄兼用(各组均各半),开始实验时体重130~160g,各组基本均衡。实验环境为成都利尔药业有限公司动物实验中心,实验动物环境设施合格证书号:川实动字第2001-20号。
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113 实验性肾衰造模方法实验大白鼠喂饲含0175%腺嘌呤食物60d,其余饲养条件按常规动物实验标准进行。114 实验动物分组
分2批。第1批38只:正常对照组(不喂腺嘌呤,也不给药)8只、肾衰对照组(喂腺嘌呤造模,给生理盐水)20只、槲皮素干预组(喂腺嘌呤造模,给槲皮素干预)10只。第2批98只:正常对照组8只、肾衰对照组80只、干预组10只。
给药剂量和途径:干预组从第15d开始,经口给予槲皮素,100mg/Kg d;共喂药6周。肾衰对照组同时给等体积生理盐水。115 观察指标与方法
11511 肾脏重量、肾脏指数、肾组织水份含量
各有数据的指标都按组表示为平均值±标准差
(x ±s),应用SPSS1112统计软件,将正常组、干预组与肾衰对照组进行t检验。2 实验结果211 实验动物死亡率正常组、肾衰组与干预组依次为0184%与20%;正常组及槲皮素干预组与肾衰对照组间t检验,P<01001。212 实验动物体重、肾脏重量和水份含量(本项及以下均为各组存活鼠)
实验结果(表1)显示,肾衰组大鼠体重比正常组显著减轻,肾脏显著肿大,并出现水肿;槲皮素干预组肾脏也显著肿大,但肾脏指数比肾衰组显著减小,水肿程度明显减轻。
肾脏指数(I)
3123±0129312163±21943
3333
①实验结束时以架盘天平(最大称量500g)
称大鼠体重(g);然后处死大鼠,取双肾剔尽其它
组别正常组肾衰组干预组
n
表1 各组大鼠体重、肾脏重量、肾组织含水量
体重(g)
240±243109±1433333
平均单肾重量(mg)
776±10231354±2791228±296
33
肾组织水份含量(%)
76136±01783
79129±0190)3
33
161616
2
与体重g比值;②为实验结束时所剩大鼠。经t检验,333与对照组P<01001;3P<0105
213 肾脏病理检查结果21311 正常组
21312 肾衰组
肾小球、肾小管、血管及间质结构清析,未见
明显病变。
部分肾小球萎缩消失;残余肾小球结构不清,主要表现球囊变小。毛细血管透明变性,有的仅见内皮细胞核。间质纤维化;大量PMN、Lc浸润。