响应面法提取生物黄酮的相关资料
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黄酮浓度Crag/,.1)图1芦丁标准曲线
总黄酮提取及含量测定:准确称取西兰花于粉19置于容积100ral烧瓶内,以一定液固比例加入乙醇水溶液在一定温度下回流提取一定时间后过滤。滤渣以同样条件提取、过滤,合并滤液,然后用乙醇水溶液定容。用制作标准曲线方法测定西兰花总黄酮得率。提取液总黄酮含量(以芦丁计,mg)=样液黄酮含量(rag)×提取液定容体积(IIll)/样液体积(IIll),得率(%)=样液中黄酮的含量(1Tlg)/西兰花重量(mg)×100%。
响应面设计试验:根据单因素预试验结果,以总黄
酮提取率为响应值,按册中旋转中心组合设计法
(简称CCrtD)进行响应面试验设计,对影响总黄酮提取得率的4个因素(提取温度、时间、液固比、乙醇浓度)进行优化[6f,RSN试验设计因子水平见表1。
表1因素水平表
2结果与分析
以提取时间A、提取温度B、乙醇浓度C和液固比D为自变量,以西兰花总黄酮得率为响应值(Y),进行响应面分析试验结果见表2。采用Design—expert
7.0
软件对表2中的数据进行多项式拟合回归建立多元二次响应面回归模型:Y=O.68+O.048A+0.00333B
+0.12C+O.1lD一0.00725AB一0.079AC+0.018AD+0.1BC一0.019BD+0.14CD一0.05A2—0.05882
—0.096C2—0.1I:)2。根据方差分析结果可知。二次方
程模型极显著,乙醇浓度与液固比达极显著水平,提取
温度不显著,在所选取的各因素范围内,按照对结果的影响排序为:乙醇浓度>液固比>提取时间>提取温度。二次项C2、D2影响极显著,交互项按照影响大小
排列依次为CD>BC>AC>BD>AD>AB。其中Bc、
CD影响极显著,表明各因素对黄酮得率的影响不是简
万方数据
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单的线性关系。图2(见封四)直观地反映了各因素交互作用对响应值的影响。比较6组图可知,液固比与乙醇浓度对黄酮得率的影响极显著,表现为曲线较陡;而提取温度与提取时间影响不显著,表现为曲线较为平滑,且随其数值的增加或减少,响应值无显著性变化。
表2响应面分析方案殛实验结果
通过回归模型预测乳苣总黄酮提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度90%,液固比30:1,提取温度85.28℃,提取时间为1.82h,在此条件下西兰花总黄酮得率理论上可达0.887%。考虑到实际操作的可行性,将西兰花总黄酮的提取条件在回归方程得到的理论值基础
上修正为:乙醇浓度90%,液固比30:1,提取温度85℃,提取时间为110min。该工艺条件的乳苣总黄酮得率为0.853%。
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