发酵法年产5万吨乙醇的工艺设计【毕业设计论文(19)

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一般缺乏水解淀粉的酶类，不能直接利用淀粉质原料，如果能够表达淀粉酶基因，则酵母就有可能直接利用淀粉质原料进行发酵。人们把细菌或霉菌中产生淀粉酶的基因片段克隆到酵母汇总，构建了不同种类的酵母工程菌。虽然构建分解淀粉酿酒酵母的工作已取得相当大的进展，但仍存在不少问题寻要解决，如构建的多数菌株利用糊精及淀粉的能力是有限的，而且讲解速率较慢等。

2) 运动发酵单胞菌 运动单胞菌最早是Linder于1942从龙舌兰酒中分离得到的。为革兰阴性、厌氧细菌，单胞菌能够耐一定的氧气。其通过ED途径，专一代谢葡萄糖、果糖、蔗糖作为碳源和能源。利用葡萄糖和果糖时。能够得到近似理论产量的乙醇。该菌具有高耐糖能力、高耐乙醇能力、低生物量和高乙醇回收率以及发酵速度快等优点。单它的缺点时碳源利用面窄，仅限于葡萄糖、果糖和蔗糖。所以，当以淀粉质原料发酵制乙醇时需要对原料进行处理转化为可被利用的糖类。将运动单胞菌与其他微生物如黑曲霉共固定化，可以解决碳源利用面窄的问题。

本文选择活性干酵母为发酵乙醇。目前，活性干酵母已经广泛用于乙醇企业中。经多年的推广，国内不少企业已经成功的将活性干酵母应用于乙醇生产，实现了提高酒分、降低消耗等目标。 3.3.2酵母生长条件

酵母的生长受到温度、pH和培养基组成等因素的影响

1)温度 温度对酵母的生长影响。酵母正常的生活和繁殖温度是29~30℃。在很高或很低的温度下，酵母的生命活动会削弱或停止。酵母生长的最高温度是38℃，最低位-5℃；在50℃时酵母死亡。温度不同，酵母的世代时间也显著不同，如表3.1所示。

表3.1 乙醇酵母在不同温度下的世代时间

温度/℃ 乙醇酵母世代时间/h

8 42.0

10 11.0

18 3.2

28 1.6

33 1.4

36 2.0

39 4.0

酵母生长的最适温度和最适的发酵温度不同。生产实践中，酵母的最适生长温度控制在28~30℃，最适发酵温度控制在30~33℃。此外，在较高的温度下，野生酵母和细菌的繁殖速度要比乙醇酵母

[16]

快，会导致发酵醪酸度增加，降低乙醇产率。

2)pH 发酵醪的pH和氧化还原电位有关，而氧化还原电位有与酵母的呼吸有直接联系。乙醇酵母可在pH4.0~6.0环境中进行繁殖，如果醪液的pH低于3，则酵母的活力大减。酵母生长的最适pH为4.8~5.0，当pH降到4.2以下时，酵母仍能继续繁殖，但此时，乳酸菌已停止生长。酒母的这种耐酸性常用来清除污染醪中的细菌，即采用加酸调节醪液pH至3.8~4，并保持一段时间酵母能继续生长并最终占据优势，而细菌污染可被消除。正常的糖化醪的pH为5.0~5.5左右，适宜于酵母菌的繁殖和发酵。但为了保证酵母菌繁殖，并一直杂菌生长，生产中常将酒母糖化醪的pH控制在4.0~4.5[17]。

3)培养基 酵母的生长需要各种营养，在培养基的制备上必须首先满足酵母生长和发酵的需求，并在此基础上，考虑各组成配比及成分对酵母的影响。这里介绍以下几种因素的影响。

① 糖化醪浓度的影响。酵母的生长速度与细胞内和糖化醪的渗透压之差有关，两者之间的渗透压差越大，酵母增殖得越快。所以，淀粉质原料生产乙醇所用的酒母糖化醪在可能的情况应较发酵用糖化醪稀在两个百分点左右。

② 无机酸和有机酸的影响。亚硫酸、亚硝酸和氢氟酸及他们的盐类，即使在很低浓度时（二氧化硫浓度为0.0025％，亚硝酸盐在0.0005%），都会阻碍酵母的正常生长。在浓度为0.35% ~0.6%的硫酸溶液中，经过15min，所有酵母都能保持其生命活力，经24h也只能有2%的死细胞。乳酸菌在0.15%的硫酸溶液中，经过2h就死亡，而在0.5%的硫酸溶液中，经2h全部细菌死亡。但野生酵母也能在1.3%的硫酸溶液中忍耐2h[18]。

游离的有机酸对酵母有较大的抑制作用。丁酸和己酸的一致作用最为强烈。但pH降到4时，酵母对挥发酸的敏感性最强。

③ 糠醛、氨基糖扥的影响。尤其对于纤维质原料的酸水解液中，如果醪液中存在糠醛时，出牙的细胞数会减少，细胞也较小。即使微量的糠醛也会造成从糖蜜发酵醪中分离得到的面包酵母的麦芽糖酶和酒化酶活力的降低。

乙醇酵母细胞表面具有负电荷，因此，它将具有正电荷的氨基糖分子吸附在自己的表面。随着pH的降低，酵母细胞的负电荷加强，氨基糖的吸附量也随之曾加。氨基糖是得酵母变成褐色，并促使酵母细胞死亡。当醪液氨基糖含量从0.005g/100mL增加到0.3g/100mL时，经24h，酵母细胞数降低0.3~1倍[14]。