聚合酶链式反应技术
2.退火:低温下,引物与模板
DNA互补区结合(55℃,30s)。
3.延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)
1.变性(denaturation):通过加热使模板DNA的双链之间的氢键断裂,双链分开而成单链的过程。
2.退火(annealling):当温度降低时,引物与模板DNA中互补区域结合成杂交分子。
3.延伸(extension):在DNA聚合酶、dNTPs、 Mg2 存在下,DNA聚合酶催化引物按5’→3’方向延伸,合成出与模板DNA链互补的DNA子链。
以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。