食品化学实验方案(7)

实验六 木耳菜/地瓜叶/树叶/菠菜中叶绿素含量测定（4学时）

一、原理

叶绿素的分子结构是由四个吡咯环组成的一个卟啉环，此外，还有一个叶绿醇的侧键，由于分子具有共轭结构，因此可吸收光能。叶绿素是脂类化合物，所以它可溶于丙酮、石油醚、已烷等有机溶剂，用有机溶剂提取的叶绿素可在一定波长下测定叶绿素溶液的吸光度，利用Arnon公式计算叶绿素的含量。 二、仪器与试剂

⒈ 仪器 分光光度计、天平、具塞刻度试管、研钵、漏斗等。 ⒉ 试剂 丙酮、碳酸钙。 三、操作步骤

准确称取洗净、擦干（去叶片中的脉）的绿色叶片1.00g，于研钵中加少许碳酸钙研磨成匀浆，用80%丙酮浸提，将上清液过滤（滤纸先用80%丙酮湿润），用滴管吸取80%丙酮分次把研钵中叶绿素浸提液和残渣洗净，然后再用丙酮逐滴把滤纸上的叶绿素溶液洗净移至具塞刻度试管，定容至15mL，于分光光度计652 nm波长下测其吸光度。 四、计算

式中H：叶绿素含量（mg/100g）；

A：在652nm处测得的吸光度； W：样品质量（g）。

五、注意事项

叶绿素是一种极不稳定的化合物，它能被活细胞中的叶绿素酶水解，脱去叶醇基，另外，光照和高温都会使叶绿素发生氧化和分解，因此在分离提取叶绿素的过程中，必须注意控制这些因素，尽可能在低温和弱光下进行，并注意缩短试验时间，以防止叶绿素的破坏。