嗜热真菌耐热木聚糖酶的产酶条件和酶谱分析_李(4)

52 微生物学通报　　　　　　　　　　　　2004年31(2)

21112　氮源种类对产酶的影响:以不同的有机氮源和无机氮源作为唯一氮源,碳源用

同一批次的自制玉米芯水不溶木聚糖,含量为210%,来考察氮源对木聚糖酶合成的影

响。实验发现无机氮源对酶合成促进作用不大,几类铵盐所产木聚糖酶活力都很低;有机氮源相对于无机氮源而言,较为理想,其中以Tryptone作为氮源菌株所产木聚糖酶为最高,如表3所示。试验还表明单一氮源不如复合氮源好,故选用Tryptone+Yeastextract作为复合氮源。从发酵液的终pH,虽然菌

株利用有机氮源使发酵液的pH值逐渐升高,。

表3　3

氮源类型

TryptoneYeastextractSoybeanBeefpeptone(NH4)2SO4NH4Cl

di2AmmoniumhydrogencitrateNH4NO3

Trytone(

110%)+Yeastextract(110%)Control

(umL)

1181886675386848512298162788

发酵液终pH值

8123815381368145617261756156616481667110

3氮源含量210%,玉米芯木聚糖为碳源210%,初始pH值710,两次实验结果平均值

21113　初始pH值对产酶的影响:在

优化碳氮源的基础上,以011molΠL柠

檬酸或氢氧化钠溶液调节培养基的初始pH410～810,培养7d最高酶活力如图1。培养基初始pH不仅影响菌丝的生长繁殖,而且对产酶量有显著的影响。图1结果显示,培养基初始pH在610～715之间对菌株合成和分泌木聚糖酶有利:从初始pH515的酶活力

图1　培养基初始pH对产酶的影响

　—■——木聚酶活力,　—◆——终pH值

1,035uΠmL增至pH615的1,558uΠmL,

并在pH710时得到最高酶活力1,627

uΠmL;而在初始pH为410和810时,

所得到的酶活力分别为pH710的42%和77%。这表明该菌产酶的最适pH是中性的。

在发酵过程中,通过显微镜观察该菌在不同初始pH的培养基中的生长过程,结合菌株培养7d的发酵液的最终pH值的变化,可知该菌生长对培养基的要求并不苛刻,其在初始pH510～810的培养基中都能较好地生长,但酶的合成和分泌对培养基初始pH的要求相对来说要严格得多:仅在初始pH615～710左右的培养基中才能得到高产量的木聚糖酶。21114　温度对产酶的影响:在最佳碳源和最佳氮源培养基基础上,采用不同温度对菌株进行发酵培养。由图2可知,本试验条件下,在50℃时该菌所产木聚糖酶活力最高,