生物工程下游技术期末复习题(11)

老师给的

2、 微囊化所用的试剂和膜材料必须对细胞无毒害作用。

3、 微囊化所形成的膜必须能使营养物和代谢产物自由通过，膜的孔径可以控制。

4、 膜应具有足够的机械强度以抵抗培养过程中的搅拌，不至使微囊破裂。

总观目前的方法用得最多的是聚赖氨酸/海藻酸法，其原理如下：

海藻酸是以1，4键连接的聚醛酸，其主要成分是甘露糖醛酸和古罗糖醛酸。当它的水溶液以钙盐的形式存在时，则成凝胶状态。而用螯合剂将钙离子去除后，则海藻酸又回复到溶液状态。当海藻酸钙凝胶用聚赖氨酸处理后，其接触部分不再被螯合剂去钙而溶解。据此，先将动物细胞与海藻酸钙混合，经过微囊发生器滴入CaCl2溶液中形成凝胶微珠，然后用聚赖氨酸溶液处理微球表面，最后再用柠檬酸去除微珠的钙离子，这样，微珠内的海藻酸层液态，动物细胞悬浮其中，而微珠表面由于受到聚赖氨酸的处理而不再溶解，形成一层薄膜，动物细胞就被这层膜包在微囊里了，如此就可以制成细胞微囊。

9、凝胶介质应具备的条件

凝胶过滤是生物化学中应用最广泛的分离纯化技术之一，它具有设备简单、易于操作、活性物质回收率高、重现性好等优点。凝胶过滤介质的性能是获取上述优点的基本保证，凝胶介质应具备以下条件。

1、 介质本身为惰性物质，在应用过程中它不与溶质、溶剂分子发生任何作用。

2、 应尽量减少介质内含的带电离子基团，以减少非特异性吸附，提高蛋白质的收率。但是由于绝大部分的多糖类骨架中都或多或少的含有一些带电基团（如羧基）等，这些基团在低离子强度时，对带电荷的溶质发生作用，将带正电的物质滞留，产生非特异吸附作用。对大多数分子而言，采用离子强度大于0.02mol/L的缓冲液即可消除这种效应。

3、 介质内孔径大小要分布均匀，既孔径分布较窄，在分级分离中这点尤为重要。

4、 凝胶珠粒大小均匀，既粒径的均一性好，均一系数越接近1越好。为提高柱效，根据实验目的及条件选用适合的粒径。细粒径分辨率高，但流速慢，压力降大，粗粒径适用于高流速低压色谱及间隙操作。

5、 介质要具有优良的物理化学稳定性及较高的机械强度，易于消毒，以增加使用寿命。

凝胶过滤介质在各种分离介质中占有特殊的地位。由于它有上述优点，能满足生化分离的基本要求，将其进行化学改性可衍生出种类繁多的层析介质，可以制备各种离子交换剂及缓冲离子交换剂；可以制备疏水色谱介质及