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生物工程下游技术期末复习题(7)

发布时间:2021-06-06   来源:未知    
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老师给的

型色谱复性,其中常用的吸附色谱复性包括金属螯合色谱复性、亲和色谱复性、离子交换色谱复性、疏水相互作用色谱复性等。

①凝胶过滤是通过分子筛效应将变性蛋白质与变性剂分离,从而使变性蛋白质进入复性溶液进行复性。

②金属螯合色谱复性主要是针对Histine tag(组氨酸标签)的基因工程蛋白质。将含有带组氨酸标签蛋白质的裂解液流过含有镍的亲和层析柱,组氨酸就可以与镍螯合从而结合在柱子上,而裂解液中其他蛋白质由于没有组氨酸标签而直接流出柱子,从而达到分离目的。

③亲和色谱复性是利用抗原抗体相互作用、酶与底物相互作用或其他特异性相互作用帮助蛋白质复性。

④其它吸附色谱复性方法。离子交换色谱、疏水作用色谱等色谱技术,通过选择合适的条件,溶解了的包含体可以通过各种作用达到复性。

3、 微囊化动物细胞及其应用

目前微囊化细胞可以在两方面应用,意识培养微囊化动物细胞以生产一些药物;二是作为药物直接用于治疗或作为筛选药物之用。

一、 生产药物上的应用

1、 单克隆抗体的生产

微囊化哺乳动物的主要应用是单克隆抗体的生产。微囊工艺已生产以克计的单克隆抗体。

2、 高值生化药物的生产

一些生化药物的生产,总生产率可达培养瓶生产的5被以上。而且,产物在电泳上显示纯度明显高。

3、 干扰素的生产

通过对一些培养生产干扰素发现,细胞在微囊中生长比悬浮胖或单层培养更旺盛。

二、 在治疗及药物筛选上的应用

1、 人工器官

微囊化动物细胞在排除免疫反应上可能有普遍意义。人们已将某些器官的细胞微囊化并植入体内以期待能代替这些器官的功能。

2、 抗癌药物的筛选

微囊化的肿瘤细胞用于估价抗癌药物对活体的作用。人的肿瘤细胞经微囊化后注入小鼠腹腔中,服用受检的抗癌药,检测微囊化的肿瘤细胞对药物的反应,结果发现抗癌药能穿透微囊的膜作用于微囊中的肿瘤细胞,抑制和杀灭的水平与其他体外和体内测定的药效一致。

4、同无机基质的填料相比较,有机高分子类型填料的普遍特征

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