二恶英中毒对AhR基因表达和自由基水平的影响

二恶英中毒对AhR基因表达和自由基水平的影响

36 生理生化中国畜牧兽医　2009年第36卷第12期

二噁英中毒对AhR基因表达和自由基水平的影响

彭洁1,高洪2

(1.云南农业职业技术学院,昆明　650212;2.云南农业大学,昆明　650201)

摘要:本试验研究了二噁英对大鼠肝脏芳香烃受体(arylhydrocarbon,AhR)(freeradical

scavenger,FRS)的保护效应。动物随机分为3组:对照组(Ⅰ组)、(Ⅱ)Ⅲ组)。3组动物

经相应处理后分别在4、8、12、16d采集血液和肝脏作为检测样本。)水平在4、8、12、16d测定时明显高于Ⅰ(P<0.01)、Ⅲ组(P>0.05),Ⅱ,SOD)水平在4、8、12、16d测定时明显高于Ⅰ(P<0.01)、Ⅲ组(P>0.AhR,极少量的存在于胞核中;Ⅱ组随着时间变化呈增加趋势,在4d明显低于Ⅰ(),dP>0.05)、12、16d(P<0.01);Ⅲ组在第4天AhR基因表达的变化类似于Ⅰ组,;Ⅰ,Ⅱ组随时间的增加明显增多(P<0.01),Ⅲ组也有所增加,AhR的表达,从而发挥各种毒性效应,最终导致机体的损伤;而FRS则能明显抑制二噁英对肝脏中AhR的影响,从而抑制各种毒性效应,对由二噁英诱导的肝损伤具有显著的保护效应。进一步说明了体内自由基水平的升高在二噁英中毒的发生、发展中发挥了重要作用。

关键词:二噁英;芳香烃受体;自由基;保护效应

中图分类号:S856.9　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:167127236(2009)1220036206

　　二噁英(Dioxin)是一类毒性极高的环境持续污染物,不具备环境相关性(吴文忠,2006)。在环境中累积,不仅破坏了生态环境,且经过生物链富集,严重危害动物和人类健康。其毒性极强,是氰化钾的100倍(Pirjo等,2001;Takko等,2004),巨大的毒

及AhR,但是由于Dioxin毒性效应的多样性及AhR分布的广泛性,AhR介导Dioxin各种不同毒

性效应的确切机制还不甚清楚,仍有待于进一步的研究。

目前Dioxin检测方法的研究主要集中于色谱法、免疫法和生物检测法三大类。色谱学方法处理复杂、要求高、费用高。免疫学方法与色谱学方法相比其优势在于所需时间短、操作简单、费用低、选择性好、灵敏度高,本研究用免疫组化的方法检测AhR,进一步探索Dioxin的毒性机制和检测方法。

本试验研究拟用Dioxin、Dioxin+FRS处理试验动物,采用电子显微照像和免疫组织化学等技术,从自由基的角度探讨Dioxin对肝脏AhR的影响及自由基清除剂对机体受损的保护作用,进一步深入认识与理解Dioxin的毒性机制,并为相关药物的设计和开发提供试验依据。1　材料与方法

1.1　主要试剂　PCB(纯度99%,德国Dr.Ehren2storfer公司)、二甲基亚砜(DMSO)、超氧化物歧化

性在沉淀积累之后无法排泄降解,是致癌的首号元凶,可引起人体部位的肿瘤,具有强烈的致癌、致畸、致突变的作用,且具有生殖毒性、免疫毒性、内分泌毒性(Catherine等,2005;Lanice等,2005)。由于Dioxin的特殊性质,人们经过二十多年的研究对Dioxin的机理有了一定的认识,但对Dioxin的毒性

机制并不完全清楚。目前许多学者认为Dioxin并不与蛋白质和核酸形成加合物,也不直接损害细胞DNA,它主要是通过与AhR相结合,两者形成的复

合物与胞内Dioxin反应增强子作用,诱导特异基因的表达,其又产生表达产物,可将前致癌物转化为致癌物,从而促进机体癌症的发生(Yugo等,2005)。研究结果发现,大部分Dioxin毒性效应的发挥都涉

收稿日期:2009206226

作者简介:彭洁(1981-),女,云南人,助教,硕士,研究方向:分

子病理与比较病理学。

通信作者:高洪。

基金项目:云南省中青年学术技术带头人培养专项(2004PY012

11)。

酶(SOD)测定试剂盒、丙二醛(MDA)测定试剂盒、免疫组化检测试剂盒、芳香烃受体单克隆抗体等。1.2　主要仪器设备　LEICA2RM2128转轮式切片

机、YXQ2SG462280压力蒸汽灭菌器、PHB23pH酸