鸡胚培养和细胞培养(3)

鸡胚培养

检卵器 有市售专用检卵器，在暗室中操作。也可根据条件向行设计，用木板

制成一大小为 35 × 25.5 × 15 厘米的木盒，上半层为一暗室，上方开一小孔，以便于用眼检视鸡胚，两侧开大孔以供双手伸入小暗室转动鸡胚蛋和进行标记。

木盒中间有一隔板，其中间部位开一卵形圆孔，木盒下层安装有 100 瓦灯泡，

待检胚蛋置于卵形孔上。开灯检查，不必在暗室中进行。

打孔器 可用剪刀代替

.

卵 架 孵育用盛放鸡胚蛋的卵盘有市售专用者，实验操作中所用卵架可用木

板制成小方盒，上面开一卵形孔。

三、鸡胚的实验室孵育

选择实验室用鸡卵，最好用白色薄壳鸡蛋，其易于观察胚胎的生活情况。实

验用卵一般不宜保存过长时间，通常保存期不应超过 10 天， 5 天以内最好。

而且不宜在高温下保存，通常保存于 4~20 ℃ ，以 10 ℃ 条件下最好。适宜的

孵育温度为 38~39 ℃ ，相对湿度为 45~60 ％，并注意空气流通。孵育 3 天后

每天应翻卵 1~2 次，以保证气体交换均匀，发育齐全，从而避免半边发育现象

的出现。孵后第四天用检卵器对鸡卵进行检视，检出未受精卵和死亡的鸡胚。经

四天孵育后，未受精卵不见有鸡胚迹象，仅见模糊的卵黄暗影；受精卵则可见清

晰的血管小团，其中有鸡胚迹象，较大的鸡胚可见到胚胎主动运动 ; 濒死或死

亡的鸡胚则见到胚胎运动呆滞或不运动，血管昏暗、折断或漂落，这种鸡胚应剔

出不用。

四、鸡胚的接种

1.绒毛尿囊膜接种

主要用于痘病毒和疱疹病毒的分离和增殖，这些病毒可在鸡胚绒毛尿囊膜上

形成痘斑和病斑。此外其它用于绒毛尿囊腔接种的病毒也可使用，而且收毒量更

高，缺点是操作不易成功。

选取10-13日龄的鸡胚，照检后，将气室及胚胎位划出，并在胚位附近无大

血管处，划一记号，用蛋钻在卵壳上磨一裂缝（或用电烙器在卵壳上烙出一个直

径为2-3mm的烤焦圈），小心将蛋壳去掉，注意切勿损伤壳膜；在气室中央也钻

一个小口，用针尖挑破壳膜，切勿损伤其下的绒毛尿囊膜，滴加1滴无菌生理盐

水于刺破处，用吸耳球紧贴气室中央小口，造成负压，即可见生理盐水下沉，绒