转基因大豆 ELISA方法定量检测抗农达® (Roundup Ready®)17
37℃,微量滴定板温育1 h。
洗涤
温育结束后,重复前面用到的洗涤步骤。
加入底物
每孔中加入100 µl显色溶液。
轻轻摇动酶标板,室温温育10 min。
加显色底物时应连续一次完成,不得中断。
在移液操作中保持相同次序和时间间隔。酶标板应注意避光,防止颜色的亮度因受到光的影响而发生变化。
加入终止缓冲液
温育结束后,按照加入显色底物同样的顺序向酶标孔中加入100 µl终止液。
在加入终止液时应连续一次完成,不得中断,酶标板应注意避光,防止颜色的亮度因受到光的影响而发生变化。
测定吸光值
用酶标仪在450 nm波长测量每孔的吸光值 (OD)。
在加入终止液30 min之内读取吸光值。
记录所得结果,计算平均吸光值或用计算机处理。
评估
标准品用于制作标准曲线。实验样品及参照标准的数值需减去检测空白的数值,所测量的参照标准品的平均值用于生成标准曲线,实验样品的平均值根据标准曲线计算相应浓度。
结果可信度判断的原则
食品中转基因成分检测 第12章