转基因大豆 ELISA方法定量检测抗农达® (Roundup Ready®)19
流程图
实验样品和参照标准抽提流程
程序
称量
加缓冲液
混匀 体积/质量 0.5 g 4.5 ml 说明 称量试验样品、空白、参照标准 加入抽提缓冲液 实验样品与抽提缓冲液充分混匀
以5000 rpm将样品离心15 min,吸取上清
离心 5000 rpm
到另一干净离心管中
稀释 根据不同基质以稀释实验样品和参照标准 1:300或1:10稀释
ELISA实验流程
程序
加样
温育
洗涤
加样
温育
洗涤
加样
温育
加样
测量吸光
值 体积 100 µl 100 µl 100 µl 100 µl 说明 微量移液器吸取已稀释的实验样品、参考标准的抽提液和空白至相应酶标孔 37℃温育1 h 用洗脱缓冲液洗涤3次 向每个酶标孔中加入偶联抗体 37℃温育1 h 用洗脱缓冲液洗涤3次 向每个酶标孔中加入显色底物 室温温育10 min 向每个酶孔中加入终止液 用酶标仪测量每孔在450 nm的吸光值
食品中转基因成分检测 第12章