细菌发酵L乳酸的研究(16)

细菌发酵L乳酸的研究

细菌发酵Ｌ（＋）．乳酸的研究

耙辩与方法

１６～２０

ｈｒ，糖化完全后，加热到８０。Ｃ灭酶２０ｍｉｎ，糖化不宜拖长时间，以免

副反应引起糖度降低。

纯乳酸培养基（平板）：用乳酸代替ＭＲＳ培养基中的葡萄糖成分，不调ｐＨ

高浓度乳酸钙平板：ＭＲＳ培养基加入一定浓度（６、８、１０、ｌＩ、１２％）的乳酸

钙

琥珀酸平板：用３％琥珀酸代替ＭＲＳ培养基中的葡萄糖，其他成分不变。鉴别培养基

ａ）普通型基本培养基（ｇ／Ｌ）：葡萄糖１，（ＮＨ４）２Ｓ０４２，柠檬酸钠１，ＭｇＳ０４

０．２，ＫＩ－１２Ｐ０４６，Ｋ２ＨＰ０４

４，琼脂１５，蒸馏水配制，ｐＨ值６．５～７．０，１２１℃

灭菌２０ｒａｉｎ

ｂ）新型基本培养基（ｇ，Ｌ）：葡萄糖２０．（ＮＨ４）２Ｓ０４４，ＭｇＳ０４０．４，ＭｎＳ０４

Ｏ．０００８，ＦｅＳ０４Ｏ．叭，ＮａＣＩ２．５，Ｋ２ＨＰ０４０．５，ＫＨ２Ｐ０４

０．５，琼脂１５，蒸馏

水配制，ｐＨ值６．５～７．０，１２１℃灭菌２０ｒａｉｎ

ｃ）改良培养基（ｇ，Ｌ）：葡萄糖２０，ＮＨ４Ｃ１

３，乙酸钠１０，ＭｇＳ０４７Ｈ２０

０．２，ＭｎＳ０４０．０１，ＦｅＳ０４０．０１，ＮａＣｌ０．０ｌ，Ｋ２ＨＰ０４０．５，ＫＨ２Ｐ０４Ｏ．５，琼

脂１５，蒸馏水配制，ｐＨ值６．５～７．０，１２１℃灭菌２０ｍｉｎ细菌鉴定各培养基【２９１０．５Ｍ的ＥＤＴＡ标准液［３６１

标准ＮａＯＨ溶液的配置和标定：用草酸标定。为了有利于乳酸含量的计算，

０．１１１ＭＮａＯＨ标准溶液的配制：称４．４４｝ｇＮａＯＨ溶于１０００ｍＬ蒸馏水（水煮沸

排Ｃ０２）。然后用草酸标定。草酸溶液配制：用分析天平准确称３．４９８９草酸，溶于５００ｍＬ蒸馏水中，定容。用１０ｍＬ草酸溶液标定，用酚酞指示剂。

ＰＡＧＥ有关试剂：

３０％丙稀酰胺储备液：３０９丙稀酰胺＋０．８９Ｎ，Ｎ一甲叉双丙稀酰胺溶于

１００ｍＬｄｄＨ２０中。

浓缩胶缓冲液储液（１Ｍ＂Ｉｒｉｓ．ＨＣＩ，ｐＨ６．８）分离胶缓冲液储液（１．５Ｍ＂Ｉｒｉｓ—ＨＣＩ，ｐＨ８．８）电极缓冲液：ｐＨ８．３Ｔｒｉｓ一甘氨酸ＡＰ溶液、洗脱液及保存液配置方法【５９】