细菌发酵L乳酸的研究(19)

细菌发酵L乳酸的研究

细菌发酵Ｌ（＋）－乳酸的研究榭辩ｓ力法

定量：在标样与样品进样量相同的情况下，用外标法定量，计算出样品中乳酸

的含量。

２．５菌种筛选方法

２．５．１菌种筛选的思路：

在发酵工业中，微生物菌种质量的优劣，对生产有极其重要的影响。因此首先从大量的自然资源中筛选理想的菌种。要筛选在商业上有竞争力的菌种，必须事先有周全的考虑，以下几项是Ｔｓａｉ设计的筛选指标和程序‘１６】：

（１）

目标菌能在含葡萄糖的培养基上生长；

（２）能进行同型发酵，并要求产量高，易纯化；（３）需有生产光学异构体Ｌ（＋）哥Ｌ酸的能力；

（４）能抗产物抑制，以便得到高浓度的产物；

（５）能在４２℃生长，以便减少污染；

（６）希望有大批量的发酵比率；

（７）细胞和培养液易于分离。

从初筛得到的乳酸菌种中，筛选产生较纯Ｌ（＋）．乳酸的同型发酵菌株。

２．５。２菌种分离与初筛

①取ＩｍＬ酸奶，酸菜汁，泡菜汁或ｌ克酸面团，奶酪，置于ＭＲＳ培养基中，３７℃富集培养２４ｈｒ。

②取０．１ｍＬ适当的稀释液用涂布法或倾注法、划线法分离，３７＊０培养４８～７２ｈｒ。③培养２～３天至出现针头状圆形菌落、光滑的球形菌落或圆形稍扁平的菌落，

直径一般在１

２ｍｍ，菌落周围的ＣａＣ０３因乳酸菌产生的乳酸溶解形成清晰的

透明圈。

④挑选透明圈／菌落直径大的菌落继续分离纯化。

⑤用纸层析法初步定性鉴定有机酸产物只有乳酸。展开剂为正丁醇：甲酸：水＝４８：９：３；显色剂为０．２％溴甲酚紫：０．０５％甲基红：Ｏ．５％ＮａＯＨ＝１：ｌ：０．１５。同时以２％的乳酸和不接种的培养液分别作为对照。

２．５．３复筛

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